常規考馬(ma)斯(si)亮(liang)藍(lan)染色(se)試劑(ji)盒(Commassie Blue Staining Kit)采(cai)用了(le)zui經(jing)典(dian)的(de)考馬(ma)斯(si)亮(liang)藍(lan)R250染色(se)和(he)脫(tuo)色方(fang)法(fa)，可(ke)用於(yu)SDS-PAGE或(huo)非(fei)變(bian)性(xing)PAGE等(deng)蛋(dan)白電泳(yong)凝膠的(de)常規染色(se)和(he)脫(tuo)色或(huo)Western轉(zhuan)膜後(hou)PAGE膠上殘余(yu)蛋(dan)白的(de)檢(jian)測(ce)。
常規考馬(ma)斯(si)亮(liang)藍(lan)染色(se)試劑(ji)盒 凝膠染色(se)

常規考馬(ma)斯(si)亮(liang)藍(lan)染色(se)試劑(ji)盒

產(chan)品簡(jian)介：

常規考馬(ma)斯(si)亮(liang)藍(lan)染色(se)試劑(ji)盒(Commassie Blue Staining Kit)采(cai)用了(le)zui經(jing)典(dian)的(de)考馬(ma)斯(si)亮(liang)藍(lan)R250染色(se)和(he)脫(tuo)色方(fang)法(fa)，可(ke)用於(yu)SDS-PAGE或(huo)非(fei)變(bian)性(xing)PAGE等(deng)蛋(dan)白電泳(yong)凝膠的(de)常規染色(se)和(he)脫(tuo)色或(huo)Western轉(zhuan)膜後(hou)PAGE膠上殘余(yu)蛋(dan)白的(de)檢(jian)測(ce)。

NobleRyder 常規考馬(ma)斯(si)亮(liang)藍(lan)染色(se)試劑(ji)盒中(zhong)的(de)染色(se)液(ye)和(he)脫(tuo)色液(ye)經(jing)過改(gai)良(liang)，不含有毒的(de)甲(jia)醇(chun)，含有刺(ci)激性(xing)氣(qi)味(wei)的(de)乙(yi)酸。采用常規染色(se)脫(tuo)色(se)方(fang)法(fa)累(lei)計時(shi)間達(da)到(dao)2～3h後(hou)可(ke)以觀(guan)察(cha)到蛋(dan)白條帶(dai)，采(cai)用快(kuai)速染色(se)脫(tuo)色(se)方(fang)法(fa)20min左(zuo)右(you)即(ji)可(ke)觀(guan)察(cha)到蛋(dan)白條帶(dai)。如(ru)果(guo)想觀(guan)察(cha)到更清晰(xi)的(de)蛋(dan)白條帶(dai)則(ze)需延(yan)長(chang)染色(se)、脫(tuo)色(se)時(shi)間。

產(chan)品組(zu)成(cheng)：

自(zi)備材料：

1、水(shui)平(ping)搖(yao)床(chuang)或(huo)側(ce)擺(bai)搖(yao)床(chuang)

2、蒸(zheng)餾(liu)水

3、20%甘油水溶液(ye)

常規考馬(ma)斯(si)亮(liang)藍(lan)染色(se)試劑(ji)盒 凝膠染色(se)

操(cao)作步(bu)驟(僅(jin)供(gong)參考)：

(壹(yi))常規染色(se)脫(tuo)色(se)方(fang)法(fa)

1、PAGE電(dian)泳(yong)後(hou)取凝膠放(fang)入(ru)適量(liang)Commassie Blue Stain中(zhong)，確保染色(se)液(ye)充分覆(fu)蓋(gai)凝膠。

2、置(zhi)於(yu)水平(ping)搖(yao)床(chuang)或(huo)側(ce)擺(bai)搖(yao)床(chuang)上緩(huan)慢(man)搖(yao)動(dong)，室溫染色(se)1h或(huo)更長(chang)時(shi)間。具體的(de)染色(se)時(shi)間取決(jue)於(yu)凝膠的(de)厚(hou)度和(he)染色(se)時(shi)的(de)溫度。凝膠較(jiao)厚(hou)，溫度較(jiao)低(di)，則染色(se)時(shi)間宜適當(dang)延(yan)長(chang)。凝膠較(jiao)薄(bo)，溫度較(jiao)高(gao)，則染色(se)時(shi)間可(ke)以適當縮短。通常染色(se)至(zhi)凝膠的(de)顏色和(he)染色(se)液(ye)的(de)顏色非(fei)常接近，在(zai)染色(se)液(ye)中(zhong)幾乎看不清凝膠時(shi)，可(ke)以認為(wei)已染色(se)充(chong)分(fen)。染色(se)2～4h或(huo)更長(chang)時(shi)間不會對最(zui)終(zhong)的(de)染色(se)效果(guo)產(chan)生(sheng)負(fu)面(mian)影(ying)響(xiang)。

3、倒出(chu)染色(se)液(ye)，該染色(se)液(ye)可(ke)以回收重復(fu)使(shi)用2～3次(ci)。

4、加(jia)入適(shi)量(liang)Commassie Blue脫(tuo)色液(ye)，確保脫(tuo)色液(ye)可(ke)以充分覆(fu)蓋(gai)凝膠。

5、置(zhi)於(yu)水平(ping)搖(yao)床(chuang)或(huo)側(ce)擺(bai)搖(yao)床(chuang)上緩(huan)慢(man)搖(yao)動(dong)，室溫脫色(se)4～24h。期間更換脫(tuo)色液(ye)2～4次，直至(zhi)藍(lan)色(se)背(bei)景基(ji)本(ben)上全部被脫去(qu)，並且蛋(dan)白條帶(dai)染色(se)效果(guo)達(da)到(dao)預期。通常蛋(dan)白條帶(dai)在(zai)脫(tuo)色(se)1～2h後(hou)即可(ke)出(chu)現(xian)。脫色(se)期間可(ke)以在脫色液(ye)中(zhong)加(jia)入壹(yi)片(pian)吸(xi)水(shui)紙，可(ke)以使(shi)部分(fen)染料(liao)吸(xi)附在吸(xi)水(shui)紙上，加(jia)快(kuai)脫色。脫色(se)時(shi)間過長(chang)也會導致蛋(dan)白條帶(dai)的(de)顏色變(bian)淺。

6、完(wan)成(cheng)脫(tuo)色(se)後(hou)把凝膠保存(cun)在水中(zhong)，用於(yu)後(hou)續的(de)拍(pai)照等(deng)。保存(cun)在水中(zhong)的(de)凝膠會(hui)發(fa)生溶(rong)漲(zhang)。如(ru)需避免(mian)溶漲，可(ke)以把膠保存(cun)在含20%甘油水溶液(ye)中(zhong)，長期保存(cun)可(ke)以制備幹膠(jiao)。

(二)快(kuai)速染色(se)脫(tuo)色(se)方(fang)法(fa)

1、PAGE電(dian)泳(yong)結束(shu)後(hou)取膠(jiao)放入Commassie Blue stain中(zhong)，微(wei)波(bo)爐(lu)加(jia)熱至(zhi)接近(jin)沸騰或(huo)剛(gang)剛沸騰，立(li)即(ji)停(ting)止加(jia)熱。通常對於(yu)膠濃(nong)度(du)大(da)於(yu)10％的(de)膠(jiao)比(bi)較堅韌，在(zai)發(fa)生煮(zhu)沸(fei)時(shi)不(bu)易(yi)破(po)損(sun)；對於(yu)膠濃(nong)度(du)小(xiao)於(yu)10%的(de)膠(jiao)，宜盡量(liang)避(bi)免(mian)煮沸，以免(mian)出(chu)現(xian)膠碎(sui)裂(lie)的(de)情況(kuang)。

2、隨(sui)後(hou)在染色(se)液(ye)溫度較(jiao)高(gao)的(de)情況(kuang)下，在(zai)室(shi)溫搖(yao)床(chuang)上搖(yao)動(dong)5～10min。

3、倒出(chu)染色(se)液(ye)，染色(se)液(ye)可(ke)以回收重復(fu)使(shi)用2～3次(ci)。

4、加(jia)入適(shi)量(liang)Commassie Blue脫(tuo)色液(ye)，確保脫(tuo)色液(ye)可(ke)以充分覆(fu)蓋(gai)凝膠。

5、微(wei)波(bo)爐(lu)加(jia)熱至(zhi)接近(jin)沸騰或(huo)剛(gang)剛沸騰，立(li)即(ji)停(ting)止加(jia)熱。

6、隨(sui)後(hou)在脫(tuo)色液(ye)溫度較(jiao)高(gao)的(de)情況(kuang)下，在(zai)搖(yao)床(chuang)上搖(yao)動(dong)5～10min。此(ci)時通常可(ke)以觀(guan)察(cha)到比(bi)較清楚(chu)的(de)蛋(dan)白條帶(dai)。

7、更換新(xin)鮮的(de)脫(tuo)色(se)液(ye)，重復(fu)步(bu)驟5和(he)步(bu)驟6，直至(zhi)藍(lan)色(se)背(bei)景基(ji)本(ben)上全部被脫去(qu)，蛋(dan)白條帶(dai)染色(se)效果(guo)達(da)到(dao)預期。

8、完(wan)成(cheng)脫(tuo)色(se)後(hou)，把凝膠保存(cun)在水中(zhong)，用於(yu)後(hou)續的(de)拍(pai)照等(deng)。保存(cun)在水中(zhong)的(de)凝膠會(hui)發(fa)生溶(rong)漲(zhang)。如(ru)需避免(mian)溶漲，可(ke)以把膠保存(cun)在含20%甘油水溶液(ye)中(zhong)，長期保存(cun)可(ke)以制備幹膠(jiao)。

註(zhu)意事項：

1.染色(se)時(shi)如(ru)果(guo)把(ba)凝膠和(he)染色(se)液(ye)壹(yi)起(qi)放置(zhi)在微(wei)波(bo)爐(lu)中(zhong)適當加(jia)熱，可(ke)以大大加(jia)快(kuai)染色(se)速(su)度(du)。但加(jia)熱時(shi)宜盡量(liang)避(bi)免(mian)沸騰，以免(mian)出(chu)現(xian)因暴(bao)沸而(er)導致的(de)凝膠碎(sui)裂(lie)。

2.如(ru)果(guo)希望(wang)染色(se)的(de)背(bei)景更低(di)，希望(wang)獲(huo)得更加(jia)清晰(xi)的(de)蛋(dan)白條帶(dai)，可(ke)以加(jia)入適(shi)量(liang)的(de)室(shi)溫蒸餾(liu)水(shui)進(jin)行洗(xi)滌(di)。通過蒸(zheng)餾(liu)水洗滌(di)可(ke)以進(jin)壹(yi)步(bu)降(jiang)低(di)背(bei)景。在(zai)4℃蒸餾水中(zhong)浸(jin)泡(pao)過夜可(ke)以獲(huo)得背(bei)景更低(di)，條(tiao)帶(dai)更清晰(xi)的(de)條(tiao)帶(dai)。在(zai)次(ci)日(ri)對4℃蒸餾(liu)水(shui)浸(jin)泡(pao)過夜的(de)已(yi)經(jing)進(jin)行了(le)染色(se)的(de)凝膠再(zai)同(tong)前壹(yi)天(tian)壹(yi)樣(yang)進(jin)行染色(se)和(he)洗(xi)滌可(ke)以進(jin)壹(yi)步(bu)改(gai)善(shan)染色(se)效果(guo)，獲(huo)得更好(hao)的(de)考染蛋(dan)白條帶(dai)。

3.常規染色(se)脫(tuo)色(se)方(fang)法(fa)耗(hao)時(shi)較(jiao)長，但檢測(ce)靈(ling)敏(min)度(du)更高(gao)，染色(se)效果(guo)更加(jia)穩(wen)定。快(kuai)速染色(se)脫(tuo)色(se)方(fang)法(fa)通常檢測(ce)靈(ling)敏(min)度(du)略(lve)低，並且在(zai)微(wei)波(bo)爐(lu)加(jia)熱的(de)過程(cheng)中(zhong)有時會出(chu)現(xian)暴(bao)沸導致凝膠碎(sui)裂(lie)的(de)情況(kuang)，需特別(bie)註(zhu)意。另(ling)外(wai)微(wei)波(bo)爐(lu)加(jia)熱導致的(de)高(gao)溫會引起(qi)染色(se)液(ye)和(he)脫(tuo)色液(ye)中(zhong)的(de)乙(yi)酸的(de)揮(hui)發(fa)。

4.本(ben)染色(se)液(ye)呈酸性(xing)，有輕(qing)微(wei)腐(fu)蝕(shi)性(xing)，使(shi)用時(shi)請(qing)作必要防護(hu)。

5.為(wei)了(le)您(nin)的(de)安(an)全和(he)健(jian)康，請(qing)穿實驗服(fu)並戴壹(yi)次(ci)性(xing)手(shou)套操作。

有效期： 12個(ge)月(yue)有效。

常規考馬(ma)斯(si)亮(liang)藍(lan)染色(se)試劑(ji)盒 凝膠染色(se)