蛋白質條帶的(de)銀(yin)染是基(ji)於蛋(dan)白質中(zhong)各(ge)種(zhong)基(ji)團（如(ru)琉(liu)基(ji)、碳(tan)基(ji)等）與銀(yin)的(de)結(jie)合(he)，然後(hou)用還原(yuan)劑(ji)如甲(jia)醛(quan)在堿性環境(jing)下(xia)使(shi)Ag+還原(yuan)成(cheng)銀(yin)顆粒，可(ke)把(ba)蛋(dan)白電(dian)泳(yong)帶染成(cheng)黑(hei)褐(he)色。它主(zhu)要用於聚(ju)丙(bing)烯(xi)酰(xian)胺(an)凝膠電(dian)泳(yong)染色。其靈敏(min)度(du)比考馬(ma)斯(si)亮(liang)藍(lan)高，該產(chan)品(pin)整個過程(cheng)操(cao)作(zuo)簡單，靈敏(min)度(du)高，能(neng)檢測(ce)到(dao)10ng以(yi)下的(de)蛋(dan)白條帶。
PAGE凝(ning)膠銀(yin)染試劑(ji)盒 凝膠染色

PAGE凝(ning)膠銀(yin)染試劑(ji)盒 凝膠染色

NobleRyder  G5098  PAGE凝(ning)膠銀(yin)染試劑(ji)盒,蛋白銀染試劑(ji)盒 蛋白快速銀染試劑(ji)盒,PAGE Gel Silver Staining Kit

產(chan)品(pin)貨號：G5098

產(chan)品(pin)名(ming)稱(cheng)：PAGE凝(ning)膠銀(yin)染試劑(ji)盒,蛋白銀染試劑(ji)盒 蛋白快速銀染試劑(ji)盒,PAGE Gel Silver Staining Kit

產(chan)品(pin)規(gui)格(ge)：1L

產(chan)品(pin)簡(jian)介(jie)：

別(bie)名：蛋白銀染試劑(ji)盒 蛋白快速銀染試劑(ji)盒

英(ying)文名(ming)稱(cheng)：PAGE Gel Silver Staining Kit

中(zhong)文名(ming)稱(cheng)：PAGE凝(ning)膠銀(yin)染試劑(ji)盒

規(gui)格(ge)：1L

儲(chu)存條件：RT，avoid light，1 year

具(ju)體(ti)產品(pin)的(de)參(can)數以(yi)收(shou)到(dao)產(chan)品(pin)說(shuo)明(ming)書的(de)參(can)數為(wei)準(zhun)

產(chan)品(pin)介(jie)紹(shao)

 蛋(dan)白質條帶的(de)銀(yin)染是基(ji)於蛋(dan)白質中(zhong)各(ge)種(zhong)基(ji)團（如(ru)琉(liu)基(ji)、碳(tan)基(ji)等）與銀(yin)的(de)結(jie)合(he)，然後(hou)用還原(yuan)劑(ji)如甲(jia)醛(quan)在堿性環境(jing)下(xia)使(shi)Ag+還原(yuan)成(cheng)銀(yin)顆粒，可(ke)把(ba)蛋(dan)白電(dian)泳(yong)帶染成(cheng)黑(hei)褐(he)色。它主(zhu)要用於聚(ju)丙(bing)烯(xi)酰(xian)胺(an)凝膠電(dian)泳(yong)染色。其靈敏(min)度(du)比考馬(ma)斯(si)亮(liang)藍(lan)高，該產(chan)品(pin)整個過程(cheng)操(cao)作(zuo)簡單，靈敏(min)度(du)高，能(neng)檢測(ce)到(dao)10ng以(yi)下的(de)蛋(dan)白條帶。

操(cao)作步(bu)驟(zhou)（僅(jin)供(gong)參(can)考）:

壹(yi)、      染色液配(pei)制(zhi)(無(wu)水(shui)乙醇(chun)自備)

需(xu)要配(pei)制(zhi)的(de)染色液體(ti)積根(gen)據(ju) PAGE 膠的(de)大小(xiao)而定(ding)，壹(yi)般(ban)的(de) mini-PAGE 膠需(xu)要(yao) 20-30mL。配(pei)制(zhi)用 的(de)器(qi)皿(min)清洗(xi)幹凈(jing)後(hou)用去離子水(shui)涮(shuan)洗(xi)，染色液須(xu)用去離子水(shui)配(pei)制(zhi)，現(xian)用現(xian)配(pei)。如(ru)果(guo)配(pei)制(zhi)的(de)溶(rong)液體(ti)積不(bu) 是 100mL，可(ke)以按比例改變各(ge)成(cheng)分用量。

1. 固(gu)定(ding)液：取 40mL 無(wu)水(shui)乙醇(chun)，10mL 染色液 A 加去離子水(shui)至 100mL，混勻(yun)；

2. 敏(min)化(hua)液： 取 30mL 無(wu)水(shui)乙醇(chun)，10mL 染色液 C 加去離子水(shui)至 100mL，混勻(yun)；

3. 銀(yin)染液：稱(cheng)取(qu) 0.12g 試劑(ji) E，用 50mL 去離子水(shui)溶(rong)解，加入 10ul 染色液 B 混勻(yun)，加去離子水(shui) 至 100mL 現(xian)用現(xian)配(pei)。

4. 顯(xian)色液：10mL 顯色液 D 和(he) 30μL 染色液 B 加入去離子水(shui)至 100mL，混勻(yun)，現(xian)用現(xian)配(pei)。

5. 終(zhong)止液：取 5mL 染色液 A 加去離子水(shui)稀(xi)釋(shi)至 100mL，現(xian)用現(xian)配(pei)。

二、染色：

1. PAGE 電(dian)泳(yong)結(jie)束後(hou)，將(jiang) PAGE 蛋白膠轉(zhuan)移(yi)至玻(bo)璃(li)平皿或搪瓷(ci)盤中(zhong)，用固(gu)定(ding)液固(gu)定(ding) 30min。

2. 將(jiang) PAGE 膠轉(zhuan)移(yi)至敏(min)化(hua)液中(zhong)，使(shi)染液沒過 PAGE 膠，室溫(wen)作(zuo)用 30min。可置(zhi)於(yu)搖床上(shang)緩慢搖晃

3. 棄(qi)去敏(min)化(hua)液，用去離子水(shui)漂(piao)洗(xi)三次，每次 10min。

4. 將(jiang) PAGE 膠轉(zhuan)移(yi)至銀染液中(zhong)，使(shi)染液沒過 PAGE 膠，室溫(wen)搖晃 40min。

5. 將(jiang) PAGE 膠轉(zhuan)移(yi)至顯色液中(zhong)，使(shi)顯(xian)色液沒過 PAGE 膠，室溫(wen)搖晃，該顯(xian)色壹(yi)般(ban)在 10min右。

6. 再(zai)選擇合(he)適(shi)的(de)時間進行終(zhong)止，棄(qi)去顯色液，加入終(zhong)止液即可。最(zui)後(hou)可(ke)進行信號收(shou)集保(bao)存。

註(zhu)意事項：

1. 銀(yin)染主(zhu)要出(chu)現(xian)在 PAGE 膠的(de)表(biao)面，使(shi)用薄(bo)膠（0.5-0.75mm）可(ke)以(yi)提(ti)高(gao)靈敏(min)度(du)。

2. 對於考馬(ma)斯(si)亮(liang)藍(lan)染色的(de) SDS-PAGE 膠，可(ke)用甲(jia)醇(chun)將(jiang)膠漂(piao)洗(xi)後(hou)，繼(ji)續進行銀(yin)染。考染過程(cheng)中(zhong) 的(de)乙酸會(hui)幹擾(rao)銀(yin)染，因此(ci)要確(que)保(bao)將(jiang) PAGE 凝膠中(zhong)殘留(liu)的(de)乙酸che底洗(xi)凈。

3. 不(bu)同蛋(dan)白質對銀染的(de)反應(ying)是(shi)不(bu)壹(yi)樣(yang)的(de)，尤(you)其(qi)是(shi)堿性蛋白染色效果(guo)差(cha)。因此，不宜用銀染測(ce) 定(ding)不同蛋(dan)白的(de)比(bi)例。

4. 染色過程(cheng)中(zhong)，緩慢(man)的(de)振蕩是必(bi)要的(de)，壹(yi)般(ban)選擇 40-60 rpm.

5. 凝(ning)膠表(biao)面的(de)裂紋(wen)多(duo)是(shi)由(you)於(yu)壓力、手印及(ji)表(biao)面幹燥(zao)所(suo)致，所(suo)以全(quan)程中(zhong)都(dou)應(ying)帶手(shou)套(tao)操作(zuo)。

6. PAGE 凝(ning)膠背(bei)景呈(cheng)均壹(yi)的(de)黑(hei)色多(duo)是(shi)水(shui)中(zhong)的(de)雜(za)質(zhi)引(yin)起的(de)，所(suo)以溶(rong)液的(de)配(pei)制(zhi)應(ying)使(shi)用電(dian)導(dao)率(lv)小於 1 μS 的(de)去離子水(shui)。

7. 如(ru)果(guo)染色後(hou)有(you)呈灰(hui)塵或(huo)煙霧狀(zhuang)灰(hui)色或棕色的(de)沈(chen)澱(dian)出(chu)現(xian)在凝膠表(biao)面，可能(neng)是(shi)在(zai)幾(ji)步(bu)漂洗(xi)過程(cheng) 中(zhong)洗(xi)得不夠(gou)che底，或是(shi)染色過程(cheng)時溫(wen)度(du)太低(di)。

8. 較(jiao)深(shen)的(de)銀(yin)染背景多(duo)是(shi)丙(bing)烯(xi)酰(xian)胺(an)中(zhong)的(de)雜(za)質(zhi)所(suo)致。

9. PAGE 膠中(zhong)的(de)甘(gan)油、尿(niao)素(su)、gan氨(an)酸、Triton X-100 和(he)兩性電(dian)解(jie)質(zhi)這些(xie)物質會(hui)幹擾(rao)銀(yin)染。

10. 室溫(wen)操(cao)作(zuo)時，溫(wen)度(du)的(de)波(bo)動往往會(hui)幹擾(rao)銀(yin)染的(de)效(xiao)果(guo)，恒溫(wen)水(shui)浴(yu)可以(yi)解(jie)決這個問題(ti)。

11. 憑借戊(wu)二醛(quan)預處(chu)理可(ke)以使(shi)各(ge)種(zhong)蛋(dan)白質的(de)染色提(ti)高(gao) 40 倍(bei)。

12. 染色使(shi)用的(de)玻(bo)璃(li)器(qi)皿(min)必須(xu)非(fei)常(chang)幹凈(jing)，用酸浸(jin)泡(pao)可以(yi)滿(man)足(zu)要求(qiu)。

13. 銀(yin)染應盡(jin)快照相，隨著(zhe)時間延長(chang)，蛋(dan)白條帶會(hui)變淺，而(er)背(bei)景會(hui)加深(shen)。

14. 銀(yin)染容器(qi)zui理xiang的(de)是(shi)玻(bo)璃(li)平皿，其次是搪瓷(ci)盤和(he)密(mi)胺(an)塑料(liao)盤等。

15. 試劑(ji)如有沈(chen)澱(dian)析(xi)出(chu)，混勻(yun)溶(rong)解（可(ke)加熱）後(hou)室溫(wen)使(shi)用。

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