植(zhi)物(wu)細(xi)胞核和(he)細(xi)胞質提(ti)取(qu)試(shi)劑盒(he)提(ti)供(gong)全套(tao)試(shi)劑，適(shi)用(yong)於(yu)從各(ge)種植(zhi)物(wu)細(xi)胞和(he)各(ge)種實(shi)體植(zhi)物(wu)組織，如葉片、根(gen)、種(zhong)子(zi)等植(zhi)物(wu)組織中提(ti)取(qu)細(xi)胞核和(he)細(xi)胞質。提(ti)取(qu)過程(cheng)簡(jian)單(dan)方便，可(ke)在 1 小(xiao)時內(nei)完(wan)成。制(zhi)備的細(xi)胞核和(he)細(xi)胞質不(bu)僅純度高(gao)，保持(chi)天然活性，而(er)且絕少(shao)交叉(cha)汙(wu)染(ran)。本(ben)試(shi)劑盒(he)采(cai)用(yong)酶法(fa)提(ti)取(qu)，酶法(fa)提(ti)取(qu)制(zhi)備的回(hui)收率(lv)提(ti)高(gao)，純度高(gao)，保持(chi)天然活性，但(dan)是(shi)耗時較(jiao)長(chang)。
植(zhi)物(wu)細(xi)胞核和(he)細(xi)胞質提(ti)取(qu)試(shi)劑盒(he) 蛋(dan)白(bai)提(ti)取(qu)

諾(nuo)博萊(lai)德(de) 植(zhi)物(wu)細(xi)胞核和(he)細(xi)胞質提(ti)取(qu)試(shi)劑盒(he) 蛋(dan)白(bai)提(ti)取(qu)

NobleRyder P5125 植(zhi)物(wu)細(xi)胞核和(he)細(xi)胞質提(ti)取(qu)試(shi)劑盒(he)-酶法(fa)

產品貨號(hao)：P5125

產品名稱：植(zhi)物(wu)細(xi)胞核和(he)細(xi)胞質提(ti)取(qu)試(shi)劑盒(he)-酶法(fa)

產品規格：50T/100T

產品簡(jian)介：

中文(wen)名稱(cheng)：植(zhi)物(wu)細(xi)胞核和(he)細(xi)胞質提(ti)取(qu)試(shi)劑盒(he)-酶法(fa)

規格：100T ; 50T

儲(chu)存(cun)條(tiao)件(jian)：2-8℃，1 year

具(ju)體產品的參(can)數(shu)以(yi)收到產品說明(ming)書(shu)的參(can)數(shu)為準(zhun)

NobleRyder P5125 植(zhi)物(wu)細(xi)胞核和(he)細(xi)胞質提(ti)取(qu)試(shi)劑盒(he)-酶法(fa)

適用(yong)樣本：植(zhi)物(wu)

註：

1. 試(shi)劑盒(he)2-8℃保(bao)存(cun)，開(kai)蓋後(hou)組份按要求(qiu)條件(jian)保(bao)存(cun)。

2. 試(shi)劑拆封後請盡快(kuai)使(shi)用(yong)完(wan)！

產品簡(jian)介：

植(zhi)物(wu)細(xi)胞核和(he)細(xi)胞質提(ti)取(qu)試(shi)劑盒(he)提(ti)供(gong)全套(tao)試(shi)劑，適(shi)用(yong)於(yu)從各(ge)種植(zhi)物(wu)細(xi)胞和(he)各(ge)種實(shi)體植(zhi)物(wu)組織，如葉片、根(gen)、種(zhong)子(zi)等植(zhi)物(wu)組織中提(ti)取(qu)細(xi)胞核和(he)細(xi)胞質。提(ti)取(qu)過程(cheng)簡(jian)單(dan)方便，可(ke)在 1 小(xiao)時內(nei)完(wan)成。制(zhi)備的細(xi)胞核和(he)細(xi)胞質不(bu)僅純度高(gao)，保持(chi)天然活性，而(er)且絕少(shao)交叉(cha)汙(wu)染(ran)。

本試(shi)劑盒(he)采(cai)用(yong)酶法(fa)提(ti)取(qu)，酶法(fa)提(ti)取(qu)制(zhi)備的回(hui)收率(lv)提(ti)高(gao)，純度高(gao)，保持(chi)天然活性，但(dan)是(shi)耗時較(jiao)長(chang)。

非(fei)酶法(fa)的提(ti)取(qu)試(shi)劑盒(he)提(ti)取(qu)過程(cheng)簡(jian)單(dan)方便，速(su)度快(kuai)，可(ke)在1 小(xiao)時內(nei)完(wan)成，而(er)且絕少(shao)交叉(cha)汙(wu)染(ran)，但(dan)是(shi)回(hui)收率(lv)相比酶法(fa)較(jiao)低。如果需要更(geng)加(jia)快(kuai)捷(jie)的提(ti)取(qu)試(shi)劑盒(he)，可(ke)以(yi)選擇(ze)非(fei)酶法(fa)的提(ti)取(qu)試(shi)劑盒(he)，對(dui)提(ti)取(qu)速度沒(mei)有(you)要求(qiu)的話(hua)，可(ke)以(yi)選擇(ze)酶法(fa)提(ti)取(qu)試(shi)劑盒(he)。請根據(ju)實際(ji)需(xu)要選(xuan)擇試(shi)劑盒(he)。

自備試(shi)劑和(he)儀(yi)器：

離心(xin)機、振(zhen)蕩器、渦(wo)旋混勻器、Dounce勻漿(jiang)器、移液(ye)器、冰箱(xiang)、冰盒(he)，PBS緩(huan)沖液(ye)、離(li)心管(guan)、吸(xi)頭(tou)、細(xi)胞篩(shai)（100um）、壹(yi)次(ci)性手(shou)套(tao)

使(shi)用(yong)方法(fa)：

壹(yi)、使(shi)用(yong)註意事項：

1、旋帽離心(xin)管(guan)裝(zhuang)的試(shi)劑在(zai)開(kai)蓋前請短(duan)暫離心(xin)，將蓋內(nei)壁(bi)上的液(ye)體甩至(zhi)管(guan)底(di)，避(bi)免(mian)開蓋時液(ye)體灑落。

2、實驗(yan)過程(cheng)中的所(suo)有(you)試(shi)劑須(xu)預(yu)冷(leng)；所(suo)有器具(ju)須(xu)放-20℃冰箱(xiang)預(yu)冷(leng)。整(zheng)個過程(cheng)須(xu)保(bao)持(chi)樣品處於(yu)低溫(wen)。

3、可(ke)以(yi)根據(ju)自己實驗(yan)需要加(jia)入其它蛋(dan)白(bai)酶抑(yi)制(zhi)劑。

二、操作步(bu)驟

1、取(qu)洗凈(jing)擦幹後(hou)並(bing)去(qu)除(chu)葉梗和(he)粗脈的 100-200mg 植(zhi)物(wu)組織樣本用(yong)shou術剪刀(dao)盡可(ke)能剪碎(sui)（也可(ke)用(yong)鋒利(li)的刀(dao)片劃(hua)成盡可(ke)能小(xiao)的碎(sui)片）。

2、加入(ru)500ul 洗滌(di)液(ye)A 充(chong)分混勻。

3、在 30℃條(tiao)件(jian)下(xia)靜(jing)置(zhi) 15 分鐘(zhong)。

4、在2000×g 條(tiao)件(jian)下(xia)離(li)心10 分(fen)鐘(zhong)，棄上清，收集沈澱。

5、在沈(chen)澱中(zhong)加入500ul 提(ti)取(qu)液(ye)B，充(chong)分混勻。

【註】：

①培養(yang)細(xi)胞1000×g 條(tiao)件(jian)下(xia)離(li)心5 分(fen)鐘(zhong)，小(xiao)心(xin)吸(xi)取(qu)培養(yang)基(ji)，盡可(ke)能吸(xi)幹，收集細(xi)胞後(hou)用(yong)PBS洗滌(di)2 次(ci)，然後(hou)直(zhi)接加入(ru)提(ti)取(qu)液(ye)B 重(zhong)懸(xuan)。

②大約每300ul 細(xi)胞壓(ya)積(ji)中加入1ml 提(ti)取(qu)液(ye)B。

③根據(ju)實際(ji)樣本體積(ji)調(tiao)整(zheng)提(ti)取(qu)液(ye)用(yong)量(liang)，壹(yi)般試(shi)劑是(shi)樣本體積(ji)的2-3 倍(bei)，充分(fen)淹沒(mei)樣本即(ji)可(ke)。

6、將提(ti)取(qu)液(ye)B 樣本懸(xuan)液(ye)置(zhi)振蕩(dang)器上37℃-45℃或室(shi)溫(wen)振蕩(dang)24-72 小(xiao)時。

【註】：

①使(shi)用(yong)振蕩(dang)器/搖床(chuang)的較(jiao)低轉速(su)，提(ti)取(qu)液(ye)能輕微晃動即(ji)可(ke)。沒(mei)有(you)振(zhen)蕩(dang)條(tiao)件(jian)也可(ke)以(yi)不(bu)振蕩(dang)，中(zhong)間每隔(ge)幾(ji)小時用(yong)移液(ye)器吹打(da)混勻即可(ke)。

②根據(ju)下遊(you)核和(he)胞質的應用(yong)選擇(ze)合適(shi)的溫(wen)度，最高(gao)溫(wen)度為55℃時制(zhi)備速度最快(kuai)。但(dan)是(shi)溫(wen)度過高(gao)會影響樣本活性，請根據(ju)下遊(you)應用(yong)選擇(ze)溫(wen)度。

③不(bu)同類(lei)型的植(zhi)物(wu)樣本需(xu)要處理的時間(jian)差(cha)異較(jiao)大。擬南(nan)芥較易處理，鮮嫩葉(ye)片較(jiao)易(yi)處理，年齡(ling)小的樣本處理時間(jian)短(duan)。部(bu)分(fen)細(xi)胞壁(bi)較厚(hou)的植(zhi)物(wu)類(lei)型可(ke)能需(xu)要處理更(geng)長(chang)時間(jian)。可(ke)以(yi)延長至(zhi) 72 小(xiao)時以(yi)上處理以(yi)提(ti)高(gao)得率(lv)。

7、在2000×g 離(li)心5 分(fen)鐘(zhong)，棄上清，收集沈澱。

【註】：

①有條(tiao)件(jian)的話(hua)最好用(yong)100um 細(xi)胞篩(shai)網過濾(lv)提(ti)取(qu)液(ye) B 處理液(ye)後(hou)，收集濾液(ye)再(zai)離(li)心(xin)。

②沒(mei)有(you)細(xi)胞篩(shai)可(ke)以(yi)不(bu)過濾(lv)。

8、用(yong)PBS 洗滌(di)沈(chen)澱壹(yi)次(ci)。（在2000×g 離心 5 分(fen)鐘(zhong)）

9、在沈(chen)澱中(zhong)加入500ul 試(shi)劑C 重(zhong)懸(xuan)沈澱，充(chong)分混勻。用(yong)勻漿(jiang)機/勻漿(jiang)器勻漿(jiang)。

10、置(zhi) 4℃振蕩(dang)20-30 分(fen)鐘(zhong)。

①使(shi)用(yong)振蕩(dang)器/搖床(chuang)的較(jiao)低轉速(su)，提(ti)取(qu)液(ye)能輕微晃動即(ji)可(ke)。

②沒(mei)有(you)振(zhen)蕩(dang)條(tiao)件(jian)也可(ke)以(yi)不(bu)振蕩(dang)，在(zai) 2-8℃靜置(zhi)，稍(shao)微(wei)延長處理時間(jian)，中(zhong)間每隔(ge)幾(ji)小時用(yong)移液(ye)器吹打(da)混勻即可(ke)。

11、在 4℃，800×g 力(li)條件(jian)下(xia)離(li)心5 分(fen)鐘(zhong)。

12、移除(chu)上清至(zhi)另(ling)壹(yi)幹凈(jing)離(li)心管(guan)。上清為(wei)細(xi)胞質部分(fen)，沈澱為(wei)細(xi)胞核。

13、用(yong)相應的緩(huan)沖液(ye)重(zhong)懸(xuan)細(xi)胞核沈澱，將兩個樣本置(zhi)冰箱(xiang)備用(yong)或直(zhi)接用(yong)於(yu)下(xia)遊(you)實驗。

註意事項：

1. 正(zheng)式(shi)實驗前請選取(qu)幾個樣本做預(yu)實驗(yan)，以(yi)優(you)化實(shi)驗(yan)條件(jian)，取(qu)得優(you)良實(shi)驗效果(guo)。

2. 螺旋(xuan)蓋微(wei)量(liang)試(shi)劑管(guan)裝(zhuang)的試(shi)劑在(zai)開(kai)蓋前請短(duan)暫離心(xin)，將蓋和(he)管(guan)內(nei)壁(bi)上的液(ye)體離心(xin)至管(guan)底(di)，避(bi)免(mian)開蓋時試(shi)劑損失。

3. 禁止(zhi)與(yu)其他品牌的試(shi)劑混用(yong)，否則會影響使(shi)用(yong)效果(guo)。

4. 樣品或試(shi)劑被(bei)細(xi)菌(jun)或真(zhen)菌(jun)汙(wu)染(ran)或試(shi)劑交(jiao)叉(cha)汙(wu)染(ran)可(ke)能會(hui)導(dao)致錯(cuo)誤的結果。

5. 最好使(shi)用(yong)壹(yi)次(ci)性吸頭(tou)、管(guan)、瓶或玻(bo)璃器皿，可(ke)重(zhong)復(fu)使(shi)用(yong)的玻(bo)璃器皿必(bi)須(xu)在(zai)使(shi)用(yong)前清洗並(bing)徹(che)di清除(chu)殘(can)留清潔(jie)劑。

6. 實驗(yan)後完(wan)成後(hou)所有樣品及(ji)接觸過的器皿應按照(zhao)規(gui)定(ding)程(cheng)序處理。

 植(zhi)物(wu)細(xi)胞核和(he)細(xi)胞質提(ti)取(qu)試(shi)劑盒(he) 蛋(dan)白(bai)提(ti)取(qu)

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P5125  植(zhi)物(wu)細(xi)胞核和(he)細(xi)胞質提(ti)取(qu)試(shi)劑盒(he)-酶法(fa)  50T/100T