菌(jun)株(zhu)來(lai)源於大(da)腸桿(gan)菌(jun)K-12，生長(chang)速(su)度快，主(zhu)要用(yong)於噬(shi)菌(jun)體展示(shi)（PhageDisplay），也可(ke)進(jin)行M13噬菌(jun)體相關的(de)實(shi)驗，也可(ke)用(yong)於普(pu)通質(zhi)粒的(de)克隆(long)構(gou)建(jian)及(ji)提(ti)取(qu)。
TG1感受態(tai)細(xi)胞 載體構建(jian)

NobleRyder C9958 TG1感受態(tai)細(xi)胞

產品(pin)貨號(hao)：C9958

產品(pin)名稱(cheng)：TG1感受態(tai)細(xi)胞

產品(pin)規格(ge)：10*100ul

TG1感受態(tai)細(xi)胞 載體構建(jian)

產品(pin)簡(jian)介(jie)：

儲存(cun)條(tiao)件(jian)：-70℃

具體(ti)產品(pin)的參數(shu)以(yi)收(shou)到(dao)產(chan)品(pin)說明書(shu)的(de)參(can)數(shu)為準(zhun)

NobleRyder C9958 TG1感受態(tai)細(xi)胞TG1 菌(jun)株(zhu)來(lai)源於大(da)腸桿(gan)菌(jun)K-12，生長(chang)速(su)度快，主(zhu)要用(yong)於噬(shi)菌(jun)體展示(shi)（PhageDisplay），也可(ke)進(jin)行M13噬菌(jun)體相關的(de)實(shi)驗，也可(ke)用(yong)於普(pu)通質(zhi)粒的(de)克隆(long)構(gou)建(jian)及(ji)提(ti)取(qu)。lacZΔM15的存在可(ke)進(jin)行α互補原(yuan)理(li)上(shang)的藍(lan)白斑篩(shai)選(xuan)實(shi)驗。由於該(gai)菌(jun)株(zhu)不含(han)核(he)酸(suan)酶endA1 突(tu)變，提(ti)取(qu)的質(zhi)粒中核酸(suan)酶含(han)量較高(gao)，需用(yong)去蛋白液(ye)處(chu)理(li)。TG1感(gan)受態(tai)細(xi)胞由特殊工(gong)藝(yi)制(zhi)成，經 pUC19 質(zhi)粒檢測轉(zhuan)化(hua)效(xiao)率(lv)高達108cfu/μgDNA。

基因(yin)型：supEthi-1 _(lac-proAB) _(mcrB-hsdSM)5(rK– mK–) [F´ traD36 proAB lacIqZ _M15]

菌(jun)株(zhu)抗(kang)性(xing): 對(dui)氨芐青mei素、卡(ka)na黴(mei)素、壯(zhuang)guan黴(mei)素、博(bo)lai黴(mei)素、慶(qing)da黴(mei)素、氯(lv)mei素和(he)四(si)huan素敏(min)感(gan)。

操(cao)作方法：（以(yi)下(xia)操(cao)作均按(an)無(wu)菌(jun)條件(jian)的(de)標準(zhun)進(jin)行）

（以(yi)氨芐青mei素抗(kang)性(xing)的(de)pUC19質(zhi)粒為例(li)）

1. 將感(gan)受態(tai)細(xi)胞置(zhi)於冰(bing)水浴(yu)中化凍。待(dai)細胞(bao)剛化(hua)凍後(hou)，加入(ru)1-5μL含(han)有(you)1-100ng的質(zhi)粒DNA 到(dao)細(xi)胞(bao)中，用(yong)手(shou)指

撥da管底(di)，輕(qing)輕(qing)混勻(yun)。

2. 冰水(shui)浴(yu)中放置30分(fen)鐘(zhong)，不要晃(huang)動。

3. 42℃熱擊(ji)60秒(miao)鐘(zhong)，不要晃(huang)動。

4. 冰水(shui)浴(yu)中放置2分(fen)鐘(zhong)，不要晃(huang)動。

5. 加入(ru)500μL的室(shi)溫的 SOC或(huo)LB培(pei)養(yang)基。

6. 置於37℃搖床中，150-200rpm，復蘇培(pei)養(yang)60分(fen)鐘(zhong)。

7. 取50-100μL 菌(jun)液(ye)塗布在含(han)有(you)氨芐青mei素抗(kang)性(xing)的(de)LB平(ping)板(ban)上(shang)。待液(ye)體(ti)吸幹後(hou)，倒置平(ping)板(ban) 37℃培養(yang) 12-24 小時。

（平(ping)板(ban)劃線(xian)分(fen)離(li)法(fa)：復蘇培(pei)養(yang)結(jie)束(shu)後(hou)，12000rpm 離心30秒(miao)鐘(zhong)，棄(qi)掉上(shang)清，留100μL左(zuo)右(you)的液(ye)體(ti)，用(yong)200μL吸(xi)頭輕(qing)輕(qing)吹打散(san)菌(jun)塊， 取10μL重懸(xuan)的菌(jun)液(ye)分(fen)多(duo)點(dian)滴(di)在平(ping)板(ban)上(shang)，傾斜(xie)吸頭，用(yong)吸(xi)頭頭部的側面將(jiang)滴(di)在平(ping)板(ban)上(shang)的液(ye)體(ti)來(lai)回(hui)劃(hua)線(xian)。這(zhe)個(ge)方法可(ke)以(yi)獲(huo)得更(geng)大(da)的(de)單克隆(long)菌(jun)落。）

註(zhu)意事項：

1．感受態(tai)細(xi)胞應(ying)保存在(zai)-70℃，不可(ke)反(fan)復(fu)凍融，否則其轉(zhuan)化(hua)效(xiao)率(lv)將會降低(di)。

2．實(shi)驗過程(cheng)中應(ying)嚴格(ge)無(wu)菌(jun)操(cao)作，防(fang)止其它(ta)DNA或(huo)雜(za)菌(jun)的汙染(ran)，避免(mian)為以(yi)後(hou)的篩(shai)選(xuan)、鑒定(ding)帶來(lai)影響(xiang)。

3．轉(zhuan)化(hua)時，轉(zhuan)化(hua)效(xiao)率(lv)與外(wai)源DNA的濃(nong)度在壹定範圍內(nei)成正(zheng)比(bi)，但(dan)當加入(ru)的外(wai)源DNA量過多(duo)或(huo)體(ti)積(ji)過大(da)反(fan)而會降低(di)轉(zhuan)化(hua)效(xiao)率(lv)。轉(zhuan)化(hua)時DNA體積要小(xiao)於感(gan)受態(tai)細(xi)胞體(ti)積的十(shi)分(fen)之(zhi)壹。

4．轉(zhuan)化(hua)率(lv)的計(ji)算(suan)：轉(zhuan)化(hua)率(lv)＝產生(sheng)菌(jun)落的總(zong)數(shu)/鋪(pu)板(ban)DNA總量。

5．為防(fang)止轉(zhuan)化(hua)實(shi)驗不成功(gong)，可以(yi)保留部(bu)分(fen)連接產(chan)物(wu)，以(yi)重新(xin)轉(zhuan)化(hua)，將(jiang)損(sun)失降(jiang)到(dao)最di。

TG1感受態(tai)細(xi)胞 載體構建(jian) 

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C9958  TG1感受態(tai)細(xi)胞  10*100ul