主要用於清(qing)除(chu)DNA、蛋白質(zhi)或其(qi)他液(ye)體樣(yang)品中的內毒(du)素。在(zai)特(te)定的pH值、鹽濃度和溫(wen)度條(tiao)件下，內毒(du)素清(qing)除(chu)劑(ji)能(neng)與 DNA、重組(zu)蛋白以(yi)及液(ye)體樣(yang)品中的內毒(du)素特(te)異性(xing)結(jie)合(he)。
內毒(du)素清(qing)除(chu)劑(ji) 輔助試(shi)劑(ji)

NobleRyder E9828 內毒(du)素清(qing)除(chu)劑(ji)Endotoxin Erasol(for DNA solution)

產品貨(huo)號：E9828

產品名(ming)稱：內(nei)毒(du)素清(qing)除(chu)劑(ji)Endotoxin Erasol(for DNA solution)

英文(wen)名(ming)稱：Endotoxin Erasol(for DNA solution)

產品規(gui)格(ge)：20ml/100ml

內毒(du)素清(qing)除(chu)劑(ji) 輔助試(shi)劑(ji)

產品簡(jian)介(jie)：

儲存條(tiao)件：RT，有效(xiao)期(qi)1年(nian)

具體產(chan)品的參數以(yi)收到產品說明(ming)書(shu)的參數為準(zhun)

NobleRyder E9828 內毒(du)素清(qing)除(chu)劑(ji)Endotoxin Erasol(for DNA solution)

主要用於清(qing)除(chu)DNA、蛋白質(zhi)或其(qi)他液(ye)體樣(yang)品中的內毒(du)素。在(zai)特(te)定的pH值、鹽濃度和溫(wen)度條(tiao)件下，內毒(du)素清(qing)除(chu)劑(ji)能(neng)與 DNA、重組(zu)蛋白以(yi)及液(ye)體樣(yang)品中的內毒(du)素特(te)異性(xing)結(jie)合(he)，經過室溫(wen)高(gao)速離(li)心後，DNA 或蛋白質(zhi)等保(bao)留在水相(xiang)，而內(nei)毒(du)素則(ze)被(bei)濃縮到極(ji)小(xiao)體積的下層(ceng)相(xiang)而被(bei)清除(chu)。經過 3次以(yi)上重復(fu)抽(chou)提(ti)後(hou)可(ke)將(jiang)活(huo)性(xing)為5000～50000 EU/mL的內毒(du)素水平降(jiang)低(di)到5～0.5 EU/mL以(yi)下，即(ji)降低(di)1000～10000 倍。

操作步驟：

1. 提取(qu)前(qian)請(qing)將內毒(du)素清(qing)除(chu)劑(ji)放(fang)在(zai)冰上冰浴(yu)5min，期(qi)間翻(fan)轉瓶(ping)子(zi)數次使(shi)試劑(ji)均勻(yun)預(yu)冷(leng)。

(1) 已(yi)純(chun)化的質(zhi)粒DNA內(nei)毒(du)素清(qing)除(chu)：吸取500μL DNA溶液(ye)於微型(xing)離(li)心管，加(jia)入(ru)1/10體積3M NaAc pH5.2 或1/20體積5M NaCl溶液(ye)，冰(bing)浴(yu)5min。

(2) 在提(ti)取質(zhi)粒 DNA 過程中清(qing)除(chu)內毒(du)素：以(yi)堿裂(lie)解(jie)法提(ti)取質(zhi)粒為例(li)，在(zai)加(jia)入(ru)裂(lie)解(jie)液(ye)和中和液(ye)並(bing)離(li)心去除(chu)碎片之後，吸取含質(zhi)粒DNA的上清(qing)於新離(li)心管中，冰(bing)浴(yu)5min。

2. 加(jia)入(ru)1/5體積預(yu)冷(leng)的內毒(du)素清(qing)除(chu)劑(ji)，振蕩混(hun)勻(yun)，溶液(ye)變(bian)渾(hun)濁(zhuo)。

3. 冰浴(yu)5min，溶液(ye)應(ying)變清(qing)亮(liang)。

4. 37℃水浴5min，不時(shi)振蕩，溶(rong)液(ye)又(you)變(bian)渾(hun)濁(zhuo)。

5. 12000rpm 室溫(wen)離(li)心5min，溶液(ye)應(ying)分為兩(liang)相(xiang)，上層(ceng)水相(xiang)含DNA，下(xia)層油(you)狀(zhuang)相(xiang)含內(nei)毒(du)素。

6. 將含(han)DNA的上層(ceng)水相(xiang)轉移(yi)到新管，棄(qi)油狀(zhuang)相(xiang)，重復(fu)抽(chou)提(ti)三(san)次，即重復(fu)步驟2-6三次。

7. 加(jia)入(ru)2.5 體積無水乙醇(chun)，-20℃沈(chen)澱(dian)30min或過夜；12000rpm離(li)心10min，棄上(shang)清；加(jia)入(ru)70％乙醇(chun)洗滌沈(chen)澱(dian)，12000rpm離(li)心5min棄上(shang)清；空(kong)氣(qi)幹燥(zao)沈(chen)澱(dian)，加(jia)入(ru)100～200μL無(wu)內(nei)毒(du)素的高(gao)純(chun)水或TE溶(rong)解(jie)沈(chen)澱(dian)。

8. 用內毒(du)素檢(jian)測試(shi)劑(ji)測(ce)定樣品中內(nei)毒(du)素活(huo)性(xing)，並(bing)與初始(shi)樣(yang)品比(bi)較。

 註意(yi)事項：

1. DNA濃度>1mg/mL時(shi)清除(chu)內毒(du)素效(xiao)率(lv)降低(di)。由(you)於DNA和蛋白質(zhi)本身(shen)的性(xing)質(zhi)，清除(chu)程序(xu)可(ke)導致(zhi)10-20％的DNA丟失(shi)，所(suo)幸的是與清除(chu)內毒(du)素的艱難(nan)相(xiang)比DNA更(geng)容易提取(qu)制(zhi)備。

2. 所有(you)溶液(ye)應(ying)用無內(nei)毒(du)素的高(gao)純(chun)水配制，所有(you)器(qi)械材(cai)料均應(ying)不含(han)內毒(du)素，玻(bo)璃器皿(min)可(ke)高(gao)溫(wen)烘(hong)烤(kao)，非(fei)揮發(fa)性(xing)水溶液(ye)可(ke)高(gao)壓(ya)120℃高(gao)溫(wen)處(chu)理(li)。

內毒(du)素清(qing)除(chu)劑(ji) 輔助試(shi)劑(ji)

產品訂購信息(xi)：

E9828  內毒(du)素清(qing)除(chu)劑(ji)Endotoxin Erasol(for DNA solution)  20ml/100ml