是(shi)參(can)與細(xi)胞(bao)雕亡(wang)過(guo)程的(de)蛋白(bai)酶家族，包含(han) 10多(duo)個成(cheng)員。Caspase-1是唯(wei)yi可剪(jian)切(qie) Ⅱ-1b 和Ⅱ-18 前體產(chan)生(sheng)活性(xing)細(xi)胞(bao)因子的(de) caspase。Caspase-1通(tong)過剪(jian)切(qie) BcI-XL 調(tiao)節(jie)細(xi)胞(bao)雕亡(wang)，並(bing)通(tong)過對細(xi)胞(bao)因子前體的(de)剪(jian)切(qie)來調(tiao)控(kong)相(xiang)關細(xi)胞(bao)因子介(jie)導(dao)的(de)免(mian)疫炎(yan)性(xing)反應(ying)。
Caspase-1活性(xing)檢(jian)測試(shi)劑盒 細(xi)胞(bao)雕亡(wang)

NobleRyderBC1698 Caspase-1活性(xing)檢(jian)測試(shi)劑盒Caspase-1 Activity Assay Kit

產品(pin)貨號：BC1698

產品(pin)名(ming)稱(cheng)：Caspase-1活性(xing)檢(jian)測試(shi)劑盒Caspase-1 Activity Assay Kit

英文名(ming)稱(cheng)：Caspase-1 Activity Assay Kit

產品(pin)規格：50T/100T/20T

Caspase-1活性(xing)檢(jian)測試(shi)劑盒 細(xi)胞(bao)雕亡(wang)

產品(pin)簡介：

檢(jian)測方(fang)法(fa)：比(bi)色(se)法(fa) Colorimetric

儲(chu)存條件：Store at -20℃，6 months

具體產(chan)品(pin)的(de)參數(shu)以(yi)收(shou)到(dao)產品(pin)說(shuo)明(ming)書(shu)的(de)參數(shu)為(wei)準(zhun)

NobleRyderBC1698 Caspase-1活性(xing)檢(jian)測試(shi)劑盒Caspase-1 Activity Assay Kit是參與細(xi)胞(bao)雕亡(wang)過(guo)程的(de)蛋白(bai)酶家族，包含(han) 10多(duo)個成(cheng)員。Caspase-1是唯(wei) yi可剪(jian)切(qie) Ⅱ-1b 和Ⅱ-18 前體產(chan)生(sheng)活性(xing)細(xi)胞(bao)因子的(de) caspase。Caspase-1通(tong)過剪(jian)切(qie) BcI-XL 調(tiao)節(jie)細(xi)胞(bao)雕亡(wang)，並(bing)通(tong)過對細(xi)胞(bao)因子前體的(de)剪(jian)切(qie)來調(tiao)控(kong)相(xiang)關細(xi)胞(bao)因子介(jie)導(dao)的(de)免(mian)疫炎(yan)性(xing)反應(ying)。

基於 Caspase-1 特異(yi)水解多(duo)肽(tai)底物Tyr-Val-Ala-Asp-3-nitroanilide (YVAD-pNA)，釋放的(de)遊(you)離(li)xiao基(ji)苯胺pNA 在(zai)405nm 有(you)最大(da)吸收(shou)峰(feng)。采(cai)用可(ke)見(jian)光光(guang)度比(bi)色(se)法(fa)測定(ding)pNA而(er)得到(dao)Caspase 活性(xing)。適用於檢(jian)測哺(bu)乳動物組(zu)織、細(xi)胞(bao)Caspase-1活性(xing)。

需自備的(de)儀器(qi)和用品(pin):

可見(jian)分光(guang)光(guang)度計(ji)/酶標儀、100mL 玻(bo)璃比(bi)色(se)皿(min)/96孔(kong)板(ban)、臺(tai)式離心(xin)機、水浴鍋/恒溫培(pei)養箱(xiang)、可調(tiao)式(shi)移液(ye)器(qi)、研(yan)缽/勻(yun)漿器、冰(bing)和(he)蒸餾(liu)水。

操作(zuo)步(bu)驟(zhou):

壹(yi)、樣(yang)本(ben)處理(可適當(dang)調(tiao)整待(dai)測樣(yang)本(ben)量，具體比(bi)例可(ke)以參(can)考文獻)

1、培養細(xi)胞(bao):先收(shou)集(ji)細(xi)胞(bao)到(dao)離心(xin)管(guan)，離心(xin)後(hou)棄(qi)上清;按照(zhao)細(xi)胞(bao)數量(liang)(約(yue)106個)加(jia)100L試劑二(er)(若(ruo)裂(lie)解不(bu)充分可(ke)提(ti)高至 150-200L),震蕩(dang)重懸(xuan)沈澱，置冰(bing)上靜置15 min,15000g4℃離(li)心(xin)10-15min,取(qu)上清置冰(bing)上待(dai)測。

2、組織:按照(zhao)組(zu)織質(zhi)量(g)：試(shi)劑二(er)體積(ji)(mL)為1:5-10的(de)比(bi)例(建(jian)議(yi)稱(cheng)取(qu)約(yue) 0.1g組織，加(jia)入1mL 試劑二(er))，冰浴研磨(mo)或充分剪(jian)碎(sui)，置冰(bing)上靜置15min，4℃，15000g離(li)心(xin)10-15min，取(qu)上清置冰(bing)上待(dai)測。

測定(ding)步(bu)驟

1、可見(jian)分光(guang)光(guang)度計(ji)/酶標儀預(yu)熱(re) 30 min 以上，調(tiao)節(jie)波(bo)長至(zhi) 405 nm，分光(guang)光(guang)度計(ji)蒸餾(liu)水調(tiao)零(ling)。

2、標準(zhun)溶液(ye)的(de)稀釋:將5mmolpNA 標準(zhun)品(pin)用(yong)標準(zhun)品(pin)稀釋液(ye)稀釋至(zhi) 200、100、50、25、12.5、0umol 的(de)標準(zhun)溶液(ye)備(bei)用(yong)。

註(zhu)意(yi)事(shi)項(xiang):

1、由於試劑二(er)中(zhong)含(han)有(you)還(hai)原(yuan)劑(DTT)，建議(yi)將樣品(pin)用(yong)水稀釋2倍(bei)後(hou)，用(yong)Bradford 法(fa)測定(ding)蛋(dan)白(bai)濃度，以(yi)降低 DTT對蛋白(bai)濃度測定(ding)的(de)幹擾(rao)。不(bu)建議(yi)使(shi)用BCA法(fa)測定(ding)蛋(dan)白(bai)濃度。

2、Caspase 活性(xing)測定(ding)值(zhi)低最常見(jian)的(de)原(yuan)因是細(xi)胞(bao)未發生雕亡(wang)或細(xi)胞(bao)量太少(shao)，其次(ci)是觀(guan)測時間不(bu)恰(qia)當(dang)。誘(you)導(dao)雕亡(wang)時，並(bing)非劑量越(yue)大(da)時間越(yue)長 Caspase 活(huo)性(xing)就(jiu)越高。建議(yi)設(she)置不(bu)同(tong)劑量和(he)時間點(dian)如(ru) 0、2、4、8、16、24小時，以檢(jian)測優良的(de)觀察(cha)點(dian)。

3、所測樣(yang)本(ben)的(de)值(zhi)高於標準(zhun)曲線(xian)上限shi，可用(yong)試(shi)劑二(er)稀釋樣(yang)本(ben)後(hou)重新(xin)測定(ding)。

4、蓋緊 96孔板(ban)蓋(gai)子並(bing)用封(feng)口(kou)膜密(mi)封(feng)。37℃孵(fu)育，肉眼可(ke)見(jian)顏色(se)變(bian)黃(huang)時的(de) OD405值(zhi)約為0.2，此時即可(ke)測定(ding)。顏(yan)色(se)變(bian)化不(bu)明(ming)顯(xian)可延長反應(ying)或過夜，但酶活(huo)性(xing)較強時，孵(fu)育時間過(guo)長將導(dao)致(zhi)反應(ying)失(shi)去線(xian)性(xing)關系。

Caspase-1活性(xing)檢(jian)測試(shi)劑盒 細(xi)胞(bao)雕亡(wang) 

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BC1698 Caspase-1活性(xing)檢(jian)測試(shi)劑盒Caspase-1 Activity Assay Kit  50T/100T/20T