胞漿(jiang)蛋白(bai)/核(he)蛋白(bai)/組蛋白(bai)提取試劑(ji)盒提供全套試劑(ji)，適用(yong)於從(cong)各(ge)種(zhong)原(yuan)代(dai)或傳(chuan)代(dai)培(pei)養動(dong)物(wu)細(xi)胞和各(ge)種(zhong)動(dong)物(wu)實(shi)體(ti)組(zu)織樣(yang)品中(zhong)提取胞漿(jiang)蛋白(bai)/核(he)蛋白(bai)/組蛋白(bai)。本(ben)試劑(ji)盒含(han)有(you)的(de)獨(du)te配方(fang)能夠(gou)有(you)效(xiao)溶解細胞(bao)膜組(zu)份(fen)。
胞(bao)漿(jiang)蛋白(bai)核(he)蛋白(bai)組蛋白(bai)提取試劑(ji)盒

諾(nuo)博萊(lai)德(de) 胞(bao)漿(jiang)蛋白(bai)/核(he)蛋白(bai)/組蛋白(bai)提取試劑(ji)盒

NobleRyder P4957 胞(bao)漿(jiang)蛋白(bai)/核(he)蛋白(bai)/組蛋白(bai)提取試劑(ji)盒

產(chan)品(pin)貨號：P4957

產(chan)品(pin)名稱：胞(bao)漿(jiang)蛋白(bai)/核(he)蛋白(bai)/組蛋白(bai)提取試劑(ji)盒

產(chan)品(pin)規(gui)格(ge)：50T/100T

胞(bao)漿(jiang)蛋白(bai)核(he)蛋白(bai)組蛋白(bai)提取試劑(ji)盒

產(chan)品(pin)簡(jian)介：

中(zhong)文(wen)名稱：胞(bao)漿(jiang)蛋白(bai)/核(he)蛋白(bai)/組蛋白(bai)提取試劑(ji)盒

規(gui)格(ge)：100T ; 50T

儲(chu)存條(tiao)件：2-8℃，1 year

具(ju)體(ti)產(chan)品的(de)參數以(yi)收(shou)到產(chan)品說明書(shu)的(de)參數為準

胞(bao)漿(jiang)蛋白(bai)/核(he)蛋白(bai)/組蛋白(bai)提取試劑(ji)盒提供全套試劑(ji)，適用(yong)於從(cong)各(ge)種(zhong)原(yuan)代(dai)或傳(chuan)代(dai)培(pei)養動(dong)物(wu)細(xi)胞和各(ge)種(zhong)動(dong)物(wu)實(shi)體(ti)組(zu)織樣(yang)品中(zhong)提取胞漿(jiang)蛋白(bai)/核(he)蛋白(bai)/組蛋白(bai)。本(ben)試劑(ji)盒含(han)有(you)的(de)獨(du)te配方(fang)能夠(gou)有(you)效(xiao)溶解細胞(bao)膜組(zu)份(fen)。本(ben)試劑(ji)盒含(han)有(you)的(de)蛋白(bai)酶抑制劑(ji)混合物(wu)，阻(zu)止了蛋白(bai)酶對(dui)蛋白(bai)的(de)降(jiang)解，為提取高純(chun)度的(de)蛋白(bai)提供了保證(zheng)。本(ben)試劑(ji)盒提取的(de)蛋白(bai)可用(yong)於esternBlotting、蛋白(bai)質電泳、免(mian)疫沈澱、ELISA、轉(zhuan)錄(lu)活性分(fen)析、Gelshift凝(ning)膠阻(zu)滯(zhi)實(shi)驗、酶(mei)活性測(ce)定等下遊蛋白(bai)研究(jiu)實(shi)驗。本(ben)試劑(ji)盒提取的(de)蛋白(bai)為具(ju)有(you)天(tian)然蛋白(bai)構象(xiang)的(de)活(huo)性蛋白(bai)，下遊應(ying)用(yong)範圍(wei)廣，提取液裂(lie)解細胞(bao)的(de)能力(li)較溫(wen)和，需要根據實(shi)際樣(yang)本(ben)情(qing)況優化(hua)裂解時間(jian)。本(ben)試劑(ji)盒中(zhong)不含(han)有(you)EDTA，與(yu)金(jin)屬螯和(he)層析等下遊應(ying)用(yong)兼容。

適(shi)用(yong)樣本(ben)：動(dong)物(wu)細(xi)胞/組織(zhi)

註(zhu)：

1. 蛋白(bai)酶抑制劑(ji)未開(kai)蓋(gai)使用前也可(ke)以(yi)2-8℃儲(chu)存。開(kai)蓋(gai)使用後-20℃儲(chu)存。

2. 蛋白(bai)酶抑制劑(ji)在2-8℃低(di)溫時是(shi)固(gu)體(ti)狀(zhuang)態(tai)，從(cong)冰(bing)箱取出後(hou)恢復(fu)至(zhi)室溫或37℃短(duan)時(shi)間(jian)水(shui)浴，變成(cheng)液體(ti)狀(zhuang)態(tai)後(hou)離心(xin)至(zhi)管底部(bu)再(zai)開(kai)蓋(gai)。

3. 試劑(ji)拆封後請盡快(kuai)使用完！

產(chan)品(pin)簡(jian)介：

胞(bao)漿(jiang)蛋白(bai)/核(he)蛋白(bai)/組蛋白(bai)提取試劑(ji)盒提供全套試劑(ji)，適用(yong)於從(cong)各(ge)種(zhong)原(yuan)代(dai)或傳(chuan)代(dai)培(pei)養動(dong)物(wu)細(xi)胞和各(ge)種(zhong)動(dong)物(wu)實(shi)體(ti)組(zu)織樣(yang)品中(zhong)提取胞漿(jiang)蛋白(bai)/核(he)蛋白(bai)/組蛋白(bai)。本(ben)試劑(ji)盒含(han)有(you)的(de)獨(du)te配方(fang)能夠(gou)有(you)效(xiao)溶解細胞(bao)膜組(zu)份(fen)。

本(ben)試劑(ji)盒含(han)有(you)的(de)蛋白(bai)酶抑制劑(ji)混合物(wu)，阻(zu)止了蛋白(bai)酶對(dui)蛋白(bai)的(de)降(jiang)解，為提取高純(chun)度的(de)蛋白(bai)提供了保證(zheng)。

本(ben)試劑(ji)盒提取的(de)蛋白(bai)可用(yong)於Western Blotting、蛋白(bai)質電泳、免(mian)疫沈澱、ELISA、轉(zhuan)錄(lu)活性分(fen)析、Gel shift 凝(ning)膠阻(zu)滯(zhi)實(shi)驗、酶(mei)活性測(ce)定等下遊蛋白(bai)研究(jiu)實(shi)驗。

本(ben)試劑(ji)盒提取的(de)蛋白(bai)為具(ju)有(you)天(tian)然蛋白(bai)構象(xiang)的(de)活(huo)性蛋白(bai)，下遊應(ying)用(yong)範圍(wei)廣，提取液裂(lie)解細胞(bao)的(de)能力(li)較溫(wen)和，需要根據實(shi)際樣(yang)本(ben)情(qing)況優化(hua)裂解時間(jian)。

本(ben)試劑(ji)盒中(zhong)不含(han)有(you)EDTA，與(yu)金(jin)屬螯和(he)層析等下遊應(ying)用(yong)兼容。

自(zi)備(bei)試劑(ji)和儀器(qi)：

離心(xin)機、振蕩(dang)器(qi)、勻漿(jiang)機/勻漿(jiang)器(qi)、渦(wo)旋(xuan)混勻器(qi)、移(yi)液器(qi)、冰(bing)箱、冰(bing)盒，PBS緩(huan)沖液、蛋白(bai)定量(liang)試劑(ji)盒，離心(xin)管、吸(xi)頭、壹(yi)次性手套

產(chan)品(pin)特點：

1、使用方(fang)便(bian)，從(cong)細(xi)胞(bao)，組織中提取蛋白(bai)不需經(jing)過(guo)研磨(mo)、反復(fu)凍融、超(chao)聲(sheng)破碎(sui)等前處理(li)。

2、提取過程(cheng)簡(jian)單方(fang)便(bian)。

3、含(han)蛋白(bai)穩定劑(ji)，提取的(de)蛋白(bai)穩定。

4、紫(zi)外檢(jian)測(ce)蛋白(bai)濃度(du)時，背(bei)景幹(gan)擾低(di)。

5、蛋白(bai)提取液含(han)多種(zhong)有(you)效(xiao)成(cheng)分(fen)，可(ke)以(yi)充(chong)分釋(shi)放(fang)胞漿(jiang)蛋白(bai)、核(he)蛋白(bai)和膜(mo)蛋白(bai)，又可(ke)結(jie)合釋(shi)出的(de)蛋白(bai)防(fang)止沈澱。

6、蛋白(bai)酶抑制劑(ji)抑制了蛋白(bai)的(de)降(jiang)解，蛋白(bai)酶抑制劑(ji)配方(fang)優化(hua)。蛋白(bai)酶抑制劑(ji)混合物(wu)包含 6 種(zhong)獨(du)立的(de)蛋白(bai)酶抑制劑(ji)，每壹種(zhong)抑制劑(ji)可特(te)異(yi)性抑制某(mou)壹(yi)種(zhong)或幾(ji)種(zhong)蛋白(bai)酶活(huo)性。該(gai)混合物(wu)優化(hua)的(de)組(zu)成(cheng)使其(qi)可以(yi)抑制幾(ji)乎所有(you)重要的(de)蛋白(bai)酶活(huo)性，包括(kuo)si氨酸(suan)蛋白(bai)酶、半(ban)guang氨酸(suan)蛋白(bai)酶、天(tian)冬(dong)氨(an)酸(suan)蛋白(bai)酶、丙(bing)氨酰(xian)-氨(an)基(ji)肽(tai)酶等。

使用方(fang)法：

壹(yi)、使用註意(yi)事項(xiang)：

1. 正式實(shi)驗前請選取幾(ji)個樣本(ben)做預實(shi)驗，以(yi)優化(hua)實(shi)驗條(tiao)件，取得(de)優良(liang)實(shi)驗效(xiao)果(guo)

2. 螺旋蓋(gai)微量(liang)試劑(ji)管裝的(de)試劑(ji)在開(kai)蓋(gai)前請短(duan)暫離心(xin)，將蓋(gai)和(he)管內(nei)壁(bi)上(shang)的(de)液體(ti)離心(xin)至(zhi)管底，避免(mian)開(kai)蓋(gai)時(shi)試劑(ji)損失(shi)。

3. 實(shi)驗過(guo)程(cheng)中(zhong)的(de)所(suo)有(you)試劑(ji)須預冷(leng)；所有(you)器(qi)具(ju)須放-20℃冰(bing)箱預冷(leng)。整(zheng)個(ge)過程(cheng)須保持(chi)樣(yang)品處於低(di)溫。

4. 蛋白(bai)酶抑制劑(ji)儲存期間(jian)溶液如(ru)果(guo)出現(xian)沈澱，不影(ying)響使用，溶解後正常使用。

5. 如(ru)果(guo)試劑(ji)盒不能短(duan)時(shi)間(jian)內(nei)用(yong)完，蛋白(bai)酶抑制劑(ji)混合物(wu)不可(ke)以壹次(ci)全(quan)部(bu)加入提取液。

6. 可(ke)以(yi)根據自(zi)己實(shi)驗需要加入其(qi)它蛋白(bai)酶抑制劑(ji)單品(pin)。

7. 下遊實(shi)驗如(ru)果(guo)是(shi)進行(xing)特定蛋白(bai)酶或磷(lin)酸(suan)酶(mei)的(de)酶(mei)活性檢(jian)測(ce)，提取液可(ke)以不加蛋白(bai)酶抑制劑(ji)或磷(lin)酸(suan)酶(mei)抑制劑(ji)，註意(yi)提取過程(cheng)保(bao)持(chi)低(di)溫操作，縮短(duan)離心(xin)時間(jian)。

8. 禁(jin)止(zhi)與(yu)其(qi)他品牌(pai)的(de)試劑(ji)混用，否(fou)則(ze)會影(ying)響使用效(xiao)果(guo)。

9. 樣(yang)品(pin)或試劑(ji)被細(xi)菌(jun)或真菌(jun)汙(wu)染(ran)或試劑(ji)交叉汙(wu)染(ran)可能會導致錯誤的(de)結(jie)果(guo)。

二(er)、細胞蛋白(bai)提取

1. 提取液制(zhi)備：

每 200μl 蛋白(bai)提取液 A 中(zhong)加入 1μl 蛋白(bai)酶抑制劑(ji)混合物(wu)，混勻後置(zhi)冰(bing)上備用。

每 200μl 蛋白(bai)提取液 B 中(zhong)加入 1μl 蛋白(bai)酶抑制劑(ji)混合物(wu)，混勻後置(zhi)冰(bing)上備用。

2. 取5-10×10⁶個細(xi)胞，在4℃，1000×g 條(tiao)件下離心(xin)5分鐘(zhong)，小(xiao)心吸(xi)取培(pei)養基(ji)，盡可能吸(xi)幹(gan)，收(shou)集細胞。

3. 用(yong)冷(leng) PBS 洗滌(di)細胞兩(liang)次(ci)，每次洗滌(di)後(hou)盡(jin)可(ke)能吸(xi)幹(gan)上(shang)清(qing)。

4. 每 5-10×106個(ge)細(xi)胞中加入 400μl 冷(leng)的(de)提取液 A，高(gao)速渦旋振蕩(dang) 15 秒(miao)或吹(chui)打混勻，置(zhi) 2- 8℃條(tiao)件振蕩(dang) 20-30 分鐘(zhong)。

5. 然(ran)後(hou)在 4℃，5000×g 條(tiao)件下離心(xin) 10 分鐘(zhong)。

6. 將(jiang)上(shang)清(qing)吸(xi)入(ru)另(ling)壹(yi)預冷(leng)的(de)幹(gan)凈(jing)離心(xin)管，即(ji)可得(de)到(dao)胞漿(jiang)蛋白(bai)，請置(zhi)於冰(bing)上(shang)或-80℃冰(bing)箱保(bao)存備(bei)用(yong)。

7. 沈澱用(yong) 200μl PBS 洗(xi)滌壹次(ci)，在 4℃，5000×g 條(tiao)件下離心(xin) 5 分鐘(zhong)，棄(qi)上清(qing)。

8. 在沈澱中(zhong)加入 100μl 冷(leng)的(de)提取液 B，高(gao)速渦旋振蕩(dang) 5 秒(miao)。

9. 置(zhi) 2-8℃條(tiao)件振蕩(dang) 20 分鐘(zhong)。

10. 在 4℃，16000×g 條(tiao)件下離心(xin) 15 分鐘(zhong)。

11. 將(jiang)上(shang)清(qing)吸(xi)入(ru)另(ling)壹(yi)預冷(leng)的(de)幹(gan)凈(jing)離心(xin)管，即(ji)可得(de)到(dao)核(he)蛋白(bai)。留沈澱用(yong)於下步(bu)的(de)組(zu)蛋白(bai)/染色(se)質相關(guan)蛋白(bai)提取。

12. 在沈澱中(zhong)加入 100μl 組(zu)蛋白(bai)提取液 C，充(chong)分混勻。

13. 用(yong) 200μl 槍(qiang)頭反(fan)復(fu)吹打混勻或充(chong)分渦旋(xuan)振蕩(dang)混勻，置(zhi) 4℃冰(bing)箱過(guo)夜存放(fang)。

14. 在 12000×g 條(tiao)件下離心(xin) 10 分鐘(zhong)，收(shou)集上清(qing)。

15. 在上清(qing)中(zhong)加入 10-20μl 試劑(ji) D 充(chong)分混勻，即(ji)得(de)到(dao)組蛋白(bai)。

16. 在組蛋白(bai)樣品(pin)中加入上(shang)樣緩沖液混勻後煮沸(fei)，分(fen)裝於-80℃冰(bing)箱保(bao)存備(bei)用(yong)或直(zhi)接(jie)用於下遊實(shi)驗。

三(san)、組(zu)織蛋白(bai)提取

1. 提取液制(zhi)備：

每 200μl 蛋白(bai)提取液 A 中(zhong)加入 1μl 蛋白(bai)酶抑制劑(ji)混合物(wu)，混勻後置(zhi)冰(bing)上備用。

每 200μl 蛋白(bai)提取液 B 中(zhong)加入 1μl 蛋白(bai)酶抑制劑(ji)混合物(wu)，混勻後置(zhi)冰(bing)上備用。

2. 取適量(liang)組織(zhi)樣(yang)本(ben)，用(yong)手術(shu)jian刀(dao)盡可(ke)能剪(jian)碎(sui)，加冷(leng) PBS，用組(zu)織勻漿(jiang)機/勻漿(jiang)器(qi)勻漿(jiang)至(zhi)無明顯(xian)肉眼可見(jian)固(gu)體(ti)，冰(bing)上靜(jing)置(zhi) 5 分(fen)鐘(zhong)，小(xiao)心將(jiang)上(shang)清(qing)吸(xi)入(ru)另(ling)壹(yi)預冷(leng)的(de)幹(gan)凈(jing)離心(xin)管。

3. 在 4℃，500×g 條(tiao)件下離心(xin) 5 分鐘(zhong)，棄(qi)上清(qing)。

4. 每 20-30μl 細胞沈澱體(ti)積(ji)（20mg 組織(zhi)）中加入 200μl 冷(leng)的(de)提取液 A，高(gao)速渦旋振蕩(dang) 15 秒(miao)或吹(chui)打混勻，置(zhi) 2-8℃條(tiao)件振蕩(dang) 20-30 分鐘(zhong)。

5. 然(ran)後(hou)在 4℃，5000×g 條(tiao)件下離心(xin) 10 分鐘(zhong)。

6. 將(jiang)上(shang)清(qing)吸(xi)入(ru)另(ling)壹(yi)預冷(leng)的(de)幹(gan)凈(jing)離心(xin)管，即(ji)可得(de)到(dao)胞漿(jiang)蛋白(bai)，請置(zhi)於冰(bing)上(shang)或-80℃冰(bing)箱保(bao)存備(bei)用(yong)。

7. 沈澱用(yong) PBS 洗(xi)滌壹次(ci)，在 4℃，5000×g 條(tiao)件下離心(xin) 5 分鐘(zhong)，棄(qi)上清(qing)。

8. 在沈澱中(zhong)加入 100-200μl 冷(leng)的(de)提取液 B，高(gao)速渦旋振蕩(dang) 5 秒(miao)。

9. 置(zhi) 2-8℃條(tiao)件振蕩(dang) 30 分鐘(zhong)。

10. 在 4℃，16000×g 條(tiao)件下離心(xin) 10-15 分鐘(zhong)。

11. 將(jiang)上(shang)清(qing)吸(xi)入(ru)另(ling)壹(yi)預冷(leng)的(de)幹(gan)凈(jing)離心(xin)管，即(ji)可得(de)到(dao)核(he)蛋白(bai)。留沈澱用(yong)於下步(bu)的(de)組(zu)蛋白(bai)/染色(se)質相關(guan)蛋白(bai)提取。

12. 在沈澱中(zhong)加入 100μl 組(zu)蛋白(bai)提取液 C，充(chong)分混勻。

13. 用(yong) 200μl 槍(qiang)頭反(fan)復(fu)吹打混勻或充(chong)分渦旋(xuan)振蕩(dang)混勻，置(zhi) 4℃冰(bing)箱過(guo)夜存放(fang)。

14. 在 12000×g 條(tiao)件下離心(xin) 10 分鐘(zhong)，收(shou)集上清(qing)。

15. 在上清(qing)中(zhong)加入 10-20μl 試劑(ji) D 充(chong)分混勻，即(ji)得(de)到(dao)組蛋白(bai)。

16. 在組蛋白(bai)樣品(pin)中加入上(shang)樣緩沖液混勻後煮沸(fei)，分(fen)裝於-80℃冰(bing)箱保(bao)存備(bei)用(yong)或直(zhi)接(jie)用於下遊實(shi)驗。

註(zhu)意(yi)事項(xiang)：

1. 本(ben)試劑(ji)盒僅供科(ke)學(xue)研究(jiu)使用，不可(ke)用於診斷或治療(liao)。

2. 最好使用壹次(ci)性(xing)吸(xi)頭、管、瓶(ping)或玻(bo)璃器(qi)皿(min)，可(ke)重(zhong)復(fu)使用的(de)玻(bo)璃器(qi)皿(min)必(bi)須在使用前清(qing)洗(xi)並徹di清(qing)除殘留清(qing)潔劑(ji)。

3. 實(shi)驗後(hou)完成(cheng)後(hou)所(suo)有(you)樣品及接(jie)觸過(guo)的(de)器(qi)皿(min)應(ying)按(an)照規(gui)定程(cheng)序(xu)處理(li)。

4. 避(bi)免(mian)皮膚或粘(zhan)膜(mo)與(yu)試劑(ji)接(jie)觸。

5. 如(ru)果(guo)試劑(ji)不小(xiao)心接(jie)觸皮膚或眼睛(jing)，應(ying)立(li)即(ji)用水(shui)沖洗(xi)。

胞(bao)漿(jiang)蛋白(bai)核(he)蛋白(bai)組蛋白(bai)提取試劑(ji)盒

產(chan)品(pin)訂購信(xin)息(xi)：

P4957  胞(bao)漿(jiang)蛋白(bai)/核(he)蛋白(bai)/組蛋白(bai)提取試劑(ji)盒  50T/100T