乙醇福(fu)爾(er)馬林(lin)固定液(ye)使用(yong)中的常(chang)見問(wen)題(ti)及解決(jue)方(fang)法(fa)

　　在(zai)組織學(xue)制(zhi)片(pian)和病理(li)標(biao)本保存(cun)領(ling)域，乙醇福(fu)爾(er)馬林(lin)固定液(ye)因(yin)其(qi)穿(chuan)透力強、形(xing)態保(bao)持好(hao)的特(te)點被(bei)廣泛(fan)使用(yong)。然而(er)實(shi)際操作(zuo)中(zhong)常(chang)常(chang)遇(yu)到(dao)各(ge)種技術(shu)難題(ti)，影(ying)響(xiang)樣本質(zhi)量(liang)和實(shi)驗(yan)結果。本文系(xi)統梳理(li)了(le)該(gai)試劑在(zai)使用(yong)過程(cheng)中的典型(xing)問(wen)題(ti)，並(bing)結(jie)合實(shi)踐經(jing)驗(yan)提供(gong)切實(shi)可(ke)行的解決(jue)方(fang)案，助(zhu)力實(shi)驗(yan)室(shi)技術(shu)人員(yuan)提升(sheng)制(zhi)片(pian)質(zhi)量(liang)。
 

　　濃(nong)度(du)配(pei)比(bi)失(shi)準(zhun)是乙(yi)醇福(fu)爾(er)馬林(lin)固定液(ye)首要挑(tiao)戰(zhan)。不(bu)同實(shi)驗(yan)室(shi)由(you)於測量工(gong)具精度(du)差(cha)異(yi)或(huo)揮發損耗(hao)等(deng)因(yin)素(su)，容(rong)易(yi)出現(xian)實(shi)際濃度(du)偏離理(li)論值的情況(kuang)。建(jian)議采用(yong)密度(du)計(ji)法(fa)進(jin)行(xing)定期(qi)校(xiao)驗(yan)：取100ml混合液(ye)置(zhi)於(yu)量(liang)筒中(zhong)，加(jia)入(ru)過量氯化鈉充(chong)分(fen)溶(rong)解(jie)後觀察分(fen)層(ceng)界(jie)面，通過(guo)鹽析(xi)效應可(ke)準(zhun)確(que)判斷(duan)兩(liang)種成(cheng)分(fen)的比(bi)例(li)關(guan)系(xi)。日(ri)常(chang)儲存(cun)時(shi)應使用(yong)棕色(se)磨(mo)口(kou)瓶塞(sai)緊密封，減(jian)少(shao)揮(hui)發造(zao)成(cheng)的濃度(du)變化。
 

　　組織硬(ying)化過度(du)現(xian)象(xiang)多發生於大塊(kuai)樣本處(chu)理(li)時(shi)。肌肉(rou)、脂(zhi)肪(fang)等致(zhi)密組織長(chang)時(shi)間浸(jin)泡後常(chang)出現(xian)刀切困(kun)難的問題(ti)。針對(dui)這種(zhong)情況(kuang)可(ke)采取分(fen)級固定策(ce)略：先(xian)將新鮮取材的組織塊(kuai)在低(di)溫環(huan)境(jing)下(xia)預(yu)固定壹(yi)定時(shi)間，再(zai)用(yong)梯(ti)度(du)濃(nong)度(du)溶(rong)液(ye)逐步(bu)過(guo)渡。例(li)如(ru)從(cong)較低(di)濃(nong)度(du)開(kai)始，每(mei)天(tian)降(jiang)低(di)壹定百(bai)分(fen)比(bi)直(zhi)至(zhi)達(da)到(dao)工(gong)作(zuo)濃(nong)度(du)。對(dui)於特(te)別堅硬的骨組織樣本，建議先(xian)用(yong)脫鈣(gai)液(ye)預處(chu)理(li)後再(zai)行(xing)常(chang)規固定流(liu)程(cheng)。
 

　　色素沈積(ji)幹擾(rao)觀察視野(ye)的情況(kuang)屢見(jian)不(bu)鮮。血(xue)液(ye)中的血(xue)紅(hong)蛋(dan)白(bai)及其(qi)分(fen)解(jie)產物會(hui)在(zai)組織間(jian)隙形(xing)成(cheng)棕黃色沈澱物。對(dui)此(ci)可(ke)采用(yong)漂白(bai)劑輔(fu)助(zhu)處(chu)理(li)：將(jiang)已(yi)固定的標(biao)本短(duan)暫浸(jin)泡於(yu)過氧(yang)化氫溶液(ye)中，利(li)用(yong)其(qi)氧(yang)化還原反(fan)應去除(chu)色素(su)幹擾(rao)。需(xu)要註意(yi)的是，這(zhe)種(zhong)處(chu)理(li)方(fang)式(shi)可(ke)能影(ying)響(xiang)某些(xie)特(te)殊染(ran)色的效果，因(yin)此(ci)需(xu)要根據(ju)後續實(shi)驗(yan)目的謹(jin)慎(shen)選(xuan)擇(ze)。另外(wai)，在(zai)固定初(chu)期(qi)加(jia)入(ru)少量尿素(su)可(ke)以競(jing)爭(zheng)性抑(yi)制黑(hei)色(se)素(su)的結合位點(dian)，從(cong)源(yuan)頭減(jian)少(shao)色(se)素(su)沈著(zhe)。
 

　　異(yi)味擴散(san)問(wen)題(ti)不(bu)僅影(ying)響(xiang)工作(zuo)環(huan)境舒適度(du)，還(hai)可(ke)能危(wei)害操(cao)作(zuo)人員(yuan)健(jian)康(kang)。傳(chuan)統通風(feng)櫥雖(sui)能提(ti)供基(ji)礎防(fang)護(hu)，但(dan)效果有(you)限。改進(jin)方(fang)案(an)包(bao)括(kuo)：①在(zai)操(cao)作(zuo)臺(tai)上方(fang)設置(zhi)微(wei)型(xing)抽(chou)風(feng)裝置(zhi)實(shi)現(xian)局(ju)部(bu)負(fu)壓(ya)；②配(pei)制(zhi)時(shi)加入(ru)活性炭吸(xi)附(fu)顆粒減(jian)少(shao)揮(hui)發；③采用(yong)冷(leng)熱交(jiao)替(ti)循(xun)環儲(chu)存(cun)法(fa)降低(di)氣(qi)體(ti)逸出速率(lv)。
 

　　pH值(zhi)漂移對(dui)酶活(huo)性保護(hu)構成(cheng)潛(qian)在威(wei)脅(xie)。市售分(fen)析(xi)純試劑本身含有(you)微量雜(za)質(zhi)離(li)子(zi)，長(chang)期(qi)存(cun)放(fang)後可(ke)能發生水解(jie)反(fan)應導(dao)致(zhi)酸性增強。定期(qi)用(yong)精密pH試紙檢測至關(guan)重(zhong)要，若(ruo)發現(xian)偏酸趨勢應(ying)及時(shi)添加(jia)磷酸鹽緩(huan)沖液(ye)校正(zheng)。值(zhi)得(de)註(zhu)意(yi)的是，某些(xie)特(te)殊染(ran)色要求嚴(yan)格(ge)的酸堿(jian)環境(jing)，此(ci)時(shi)需(xu)要單獨(du)配置(zhi)專(zhuan)用(yong)固定液(ye)體(ti)系。
 

　　安全(quan)防(fang)護(hu)措(cuo)施(shi)必(bi)須貫(guan)穿(chuan)整個(ge)操作(zuo)流(liu)程(cheng)。個人防(fang)護(hu)裝(zhuang)備(bei)(PPE)應包(bao)括(kuo)防(fang)腐蝕手(shou)套(tao)、護(hu)目鏡和實(shi)驗(yan)服；應(ying)急(ji)沖洗(xi)設(she)施(shi)需(xu)保持在位可(ke)用(yong)狀態；廢(fei)棄(qi)液(ye)處(chu)置(zhi)要嚴格(ge)遵守危(wei)化品(pin)管(guan)理(li)條(tiao)例(li)。
 

　　隨著(zhe)分(fen)子(zi)生(sheng)物學(xue)技術(shu)的發展，傳統固定方(fang)法(fa)正在(zai)面臨新的挑(tiao)戰(zhan)。低(di)溫速(su)凍(dong)結(jie)合冷(leng)凍(dong)替(ti)代(dai)技術(shu)逐(zhu)漸(jian)興(xing)起，但(dan)在(zai)常(chang)規石(shi)蠟(la)切片領(ling)域，乙醇福(fu)爾(er)馬林(lin)固定液(ye)仍保持著(zhe)不(bu)可(ke)替(ti)代(dai)的地位(wei)。通過(guo)標(biao)準(zhun)化操作(zuo)流(liu)程(cheng)、精細(xi)化參數控(kong)制(zhi)和智能化設備升(sheng)級，我們能夠克(ke)服現(xian)有(you)技術(shu)局(ju)限，讓經(jing)典(dian)方法(fa)煥(huan)發新的生命力(li)。每(mei)壹次成(cheng)功(gong)的組織制(zhi)片(pian)都(dou)是科學(xue)與藝(yi)術(shu)的結合，而(er)精準(zhun)掌控(kong)固定液(ye)特(te)性正是打開(kai)微(wei)觀世界大門的鑰匙(chi)。