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選(xuan)擇合適的克隆(long)位(wei)點(dian),並(bing)對(dui)載(zai)體(ti)進(jin)行(xing)線性化。盡(jin)量選(xuan)擇無重復(fu)序列(lie)且(qie)載體克(ke)隆(long)位(wei)點(dian)上下(xia)遊20bp區(qu)域(yu)內(nei)GC含量(liang)在(zai)40%-60%之間(jian)的位(wei)點(dian)進行(xing)克隆(long)。載(zai)體(ti)線(xian)性(xing)化方式有(you)限(xian)制(zhi)性(xing)內(nei)切酶酶(mei)切消化(hua)和(he)反(fan)向PCR擴(kuo)增(zeng)。1)酶切制備(bei)線性(xing)化載體時,推薦使用(yong)雙(shuang)酶(mei)切線性(xing)化(hua),線(xian)性化wqn全(quan)5.1 制備(bei)線性(xing)化載體 壹(yi)步(bu)克隆(long)試(shi)劑盒(he) 克(ke)隆(long)系(xi)列(lie)