本試劑盒(he)采(cai)用特殊(shu)的脫蠟(la)液和裂解條件釋提取(qu)石蠟包(bao)埋組織切片中(zhong)的 DNA，克服(fu)了福爾馬(ma)林交聯(lian)造 成的抑制(zhi)效(xiao)應(ying)。該(gai)試(shi)劑盒(he)通過特異(yi)性(xing)結合 DNA 的離(li)心(xin)吸(xi)附(fu)柱(zhu)和du特的(de)緩沖液系(xi)統(tong)，將(jiang)高(gao)品質的(de) DNA 純(chun)化(hua)至小(xiao)洗(xi)脫體(ti)積中。提(ti)取的(de)基(ji)因(yin)組(zu)完(wan)整(zheng)性(xing)好，純度(du)高(gao)，質量(liang)穩(wen)定(ding)可靠。
石蠟包(bao)埋組zhi基(ji)因(yin)組提取(qu)試劑盒(he) 質粒(li)提(ti)取(qu)

石蠟包(bao)埋組zhi基(ji)因(yin)組提取(qu)試劑盒(he) 質粒(li)提(ti)取(qu)

    NobleRyderD9598  石蠟包(bao)埋組zhi基(ji)因(yin)組提取(qu)試劑盒(he)

產(chan)品貨號：D9598                                        

產(chan)品名(ming)稱(cheng)：石蠟包(bao)埋組zhi基(ji)因(yin)組提取(qu)試劑盒(he)

產(chan)品規格(ge)：100T/50T

產(chan)品簡(jian)介(jie)：

儲存條件：Store at 2-8℃，avoid light，1 year.

NobleRyderD9598  石蠟包(bao)埋組zhi基(ji)因(yin)組提取(qu)試劑盒(he)本試劑盒(he)采(cai)用特殊(shu)的脫蠟(la)液和裂解條件釋提取(qu)石蠟包(bao)埋組織切片中(zhong)的 DNA，克服(fu)了福爾馬(ma)林交聯(lian)造 成的抑制(zhi)效(xiao)應(ying)。該(gai)試(shi)劑盒(he)通過特異(yi)性(xing)結合 DNA 的離(li)心(xin)吸(xi)附(fu)柱(zhu)和du特的(de)緩沖液系(xi)統(tong)，將(jiang)高(gao)品質的(de) DNA 純(chun)化(hua)至小(xiao)洗(xi)脫體(ti)積中。提(ti)取的(de)基(ji)因(yin)組(zu)完(wan)整(zheng)性(xing)好，純度(du)高(gao)，質量(liang)穩(wen)定(ding)可靠。

具體(ti)產(chan)品的參數以收(shou)到產(chan)品說(shuo)明(ming)書的(de)參數為(wei)準

操作步(bu)驟：

使用前請先在漂(piao)洗(xi)液中加(jia)入(ru)無(wu)水(shui)乙(yi)醇(chun)，加(jia)入(ru)休積請參照瓶(ping)體上(shang)的標(biao)簽（每(mei)瓶(ping)需要(yao)單獨(du)加(jia)入(ru)45mL無(wu)水(shui)乙(yi)醇(chun)）。所(suo)有(you)離(li)心(xin)步(bu)驟均(jun)為(wei)使用臺(tai)式(shi)離(li)心(xin)機在室(shi)溫(wen)下離(li)心(xin)。

1、樣(yang)本處理(li)  

a. 石蠟切片：取(qu)石蠟切片（5-10 μm厚(hou)，1×1 cm2 大(da)小(xiao)）5-8張(zhang)。

b. 石蠟塊：手shu刀刮取約(yue)30 mg的組織樣本（盡量去除多余的(de)石蠟）。 註意(yi)：如果樣品表面(mian)暴露(lu)於空氣中(zhong)，最初刮(gua)取的(de)2-3片棄(qi)掉(diao)不用。  

c.福爾馬(ma)林等固(gu)定液中的(de)樣(yang)本：取30 mg樣本，用手shu刀切為數塊,置(zhi)於1.5 ml離(li)心(xin)管中,加(jia)入(ru)500μl PBS (0.01M，pH7.4)渦旋振(zhen)蕩(dang)混勻,12,000 rpm室(shi)溫(wen)離(li)心(xin)1 min, 棄(qi)上(shang)清，重復(fu)3次,然後(hou)從(cong)步(bu)驟7開始(shi)操作。

2. 脫蠟(la)（二(er)選壹）

a. 脫蠟(la)液脫蠟(la)

加(jia)入(ru)l mL脫蠟(la)液，充分(fen)振蕩(dang)，65℃水(shui)浴(yu)30 min，再(zai)次充分(fen)振蕩(dang)，4℃下15000 rpm離(li)心(xin)1 5 min，棄(qi)上(shang)清再(zai)加(jia)1 mL 脫蠟(la)液，重復(fu)3遍。然後(hou)從(cong)步(bu)驟7開始(shi)操作。

b. 二甲(jia)苯脫蠟(la)

將(jiang)石蠟切片或石蠟塊樣(yang)本裝於1.5 ml無(wu)菌(jun)離(li)心(xin)管中，加(jia)入(ru)1 ml二(er)甲(jia)苯，劇烈渦旋10 -15s。然後(hou)從(cong)步(bu)驟3開始(shi)操作（二甲(jia)苯需要(yao)客戶自(zi)備(bei)）。

3、12000 rpm 室溫(wen)離(li)心(xin)2 min，棄(qi)上(shang)清。註(zhu)意(yi)：不要(yao)倒掉(diao)沈(chen)澱。

4、 在上(shang)述(shu)管中加(jia)入(ru)1 ml無(wu)水(shui)乙(yi)醇(chun)，渦旋混勻10s。  

5、12,000 rpm(~13,400×g )室(shi)溫(wen)離(li)心(xin) 2 min，棄(qi)上(shang)清。註(zhu)意(yi)：不要(yao)倒掉(diao)沈(chen)澱。  

6、室溫(wen)放置5-10 min，充分(fen)揮(hui)發乙(yi)醇(chun)。

7、向(xiang)沈(chen)澱中加(jia)入(ru)200 μl緩(huan)沖液A和20μl蛋(dan)白(bai)酶(mei)K、2μl RNase A，充分(fen)混勻，56℃水(shui)浴(yu)消(xiao)化(hua)1h-3h直(zhi)至樣(yang)本wan全裂解。消化期間(jian)可(ke)顛(dian)倒(dao)離(li)心(xin)管混勻數次，直(zhi)至樣(yang)品消化wan全為止。消化wan全的(de)指(zhi)標(biao)是(shi)：液體清(qing)亮(liang)及粘稠(chou)。

8、加(jia)入(ru)200ul 體(ti)積溶液B，充分(fen)顛(dian)倒(dao)混勻，如出(chu)現(xian)白(bai)色沈澱，可放置(zhi)於75℃ 15-30min，沈(chen)澱即會消(xiao)失，不影響(xiang)後續(xu)實(shi)驗(yan)。如溶液未變清亮(liang)，說(shuo)明(ming)樣品消化不che底，可(ke)能導(dao)致(zhi)提(ti)取(qu)的 DNA 量(liang)少(shao)及不純，還(hai)有可(ke)能(neng)導(dao)致(zhi)堵(du)塞吸附(fu)柱(zhu)。

9、加(jia)入(ru)200ul無(wu)水(shui)乙(yi)醇(chun)，充分(fen)混勻，此時可能(neng)會(hui)出現(xian)絮(xu)狀(zhuang)沈(chen)澱，不影響(xiang)DNA的提(ti)取(qu)，可(ke)將(jiang)溶液和絮(xu)狀(zhuang)沈(chen)澱都加(jia)入(ru)吸(xi)附(fu)柱(zhu)中。

10、12000rpm 離(li)心(xin)1min，棄(qi)廢液，將吸(xi)附(fu)柱(zhu)放入(ru)收(shou)集管中。

11、向(xiang)吸(xi)附(fu)柱(zhu)中加(jia)入(ru)600ul漂(piao)洗(xi)液(使用前請先檢查(zha)是(shi)否(fou)已加(jia)入(ru)無(wu)水(shui)乙(yi)醇(chun))，12000rpm離(li)心(xin)1min，棄(qi)廢液，將吸(xi)附(fu)柱(zhu)放入(ru)收(shou)集管中。

12、向(xiang)吸(xi)附(fu)柱(zhu)中加(jia)入(ru)600ul漂(piao)洗(xi)液，12000rpm離(li)心(xin)1min，棄(qi)廢液，將吸(xi)附(fu)柱(zhu)放入(ru)收(shou)集管中。

13、12000rpm 離(li)心(xin) 2min，將(jiang)吸(xi)附(fu)柱(zhu)敞口置於室(shi)溫(wen)或50℃溫(wen)箱(xiang)放(fang)置(zhi)數分(fen)鐘，目(mu)的是(shi)將(jiang)吸附(fu)柱(zhu)中殘(can)余(yu)的(de)漂(piao)洗(xi)液去除，否則(ze)漂(piao)洗(xi)液中的(de)乙(yi)醇(chun)會(hui)影響後續(xu)的(de)實驗(yan)，如酶(mei)切、PCR等。

14、將吸附(fu)柱(zhu)放入(ru)壹個(ge)幹凈(jing)的離(li)心(xin)管中，向(xiang)吸(xi)附(fu)膜中央(yang)懸空滴加(jia)50-200ul經(jing)65℃水(shui)浴(yu)預(yu)熱(re)的(de)洗(xi)脫液，室溫(wen)放置5min，12000rpm離(li)心(xin)2min。

15、可(ke)將(jiang)離(li)心(xin)所(suo)得(de)洗(xi)脫液再(zai)加(jia)入(ru)吸(xi)附(fu)柱(zhu)中，12000rpm離(li)心(xin)2min，即可得(de)到高(gao)質量(liang)的(de)基(ji)因組DNA。

註意(yi)事項(xiang):

1、試劑盒(he)拆封後，RNase A和蛋白(bai)酶(mei)K需放(fang)置(zhi)-20℃保存(cun)。

2、樣品應(ying)避(bi)免反(fan)復凍(dong)融(rong)，否(fou)則(ze)會(hui)導(dao)致提(ti)取(qu)的(de)DNA片段較(jiao)小(xiao)且提取(qu)量(liang)也下降(jiang)。

3、如果試劑盒(he)中的(de)溶液出現(xian)沈(chen)澱，可在65℃水(shui)浴(yu)中(zhong)重新溶解(jie)後再(zai)使用，不影響(xiang)效(xiao)果。

4、洗(xi)脫緩(huan)沖液的體(ti)積最好不少(shao)於50ul，體(ti)積過小(xiao)會影響(xiang)回(hui)收(shou)效(xiao)率(lv)：洗(xi)脫液的pH值(zhi)對(dui)洗(xi)脫效(xiao)率(lv)也有影(ying)響，若(ruo)需(xu)要(yao)用水(shui)做(zuo)洗(xi)脫液應(ying)保(bao)證其pH值(zhi)在(zai)8.0左(zuo)右(you)(可用NaOH將(jiang)水(shui)的(de)pH值(zhi)調(tiao)至(zhi)此範圍)，pH 值(zhi)低於7.0會(hui)降(jiang)低洗(xi)脫效(xiao)率(lv)。

5、本產(chan)品所(suo)提(ti)DNA的完(wan)整(zheng)性(xing)依賴(lai)於樣(yang)本類型、儲存時間(jian)以及固定(ding)條件。如果甲(jia)醛固(gu)定時間(jian)過長(chang)（超(chao)過24h）或樣本存放時間(jian)過久(jiu)（＞1年(nian)）則(ze)易(yi)導(dao)致DNA完(wan)整(zheng)性(xing)受(shou)損，無法(fa)擴出長片段。

石蠟包(bao)埋組zhi基(ji)因(yin)組提取(qu)試劑盒(he) 質粒(li)提(ti)取(qu)

產(chan)品訂購(gou)信(xin)息

D9598  石蠟包(bao)埋組zhi基(ji)因(yin)組提取(qu)試劑盒(he)  100T

D9598  石蠟包(bao)埋組zhi基(ji)因(yin)組提取(qu)試劑盒(he)   50T