高(gao)等植物中有(you)兩類(lei)核(he)糖(tang)體(ti)：壹(yi)類存在(zai)於(yu)細胞(bao)質中，沈降系(xi)數(shu)為(wei)80S；另壹(yi)類存在(zai)於(yu)線粒體中。沈降(jiang)系(xi)數(shu)為(wei)55S。不同生物的(de)線粒體核(he)糖(tang)體(ti)在(zai)組成(cheng)與(yu)物(wu)理(li)化學(xue)性質(zhi)等方面(mian)的差(cha)異(yi)均(jun)比細(xi)胞(bao)質(zhi)核(he)糖(tang)體(ti)的(de)大。核(he)糖(tang)體(ti)是(shi)細胞(bao)進行蛋白質生(sheng)物合(he)成(cheng)的(de)部位(wei)，同時又與(yu)生(sheng)物(wu)體(ti)的(de)若幹性(xing)狀(zhuang)，如(ru)抗(kang)性突變(bian)有(you)關(guan)。
線粒體核(he)糖(tang)體(ti)提(ti)取試劑(ji)盒 蛋白提取(qu)

諾(nuo)博(bo)萊(lai)德 線粒體核(he)糖(tang)體(ti)提(ti)取試劑(ji)盒 蛋白提取(qu)

   NobleRyder P5113 線粒體核(he)糖(tang)體(ti)提(ti)取試劑(ji)盒

產品(pin)貨(huo)號：P5113

產品(pin)名稱(cheng)：線粒體核(he)糖(tang)體(ti)提(ti)取試劑(ji)盒

產品(pin)規格(ge)：50T/100T

產品(pin)簡介(jie)：

中文名稱：線粒體核(he)糖(tang)體(ti)提(ti)取試劑(ji)盒

規格：100T ; 50T

儲存條件：2-8℃，1 year

具(ju)體(ti)產品(pin)的參(can)數以(yi)收(shou)到產(chan)品(pin)說明(ming)書的(de)參(can)數為(wei)準

NobleRyder P5113 線粒體核(he)糖(tang)體(ti)提(ti)取試劑(ji)盒

適(shi)用樣本(ben)：動物細胞/組織(zhi)

註(zhu)：

1. 試劑盒2-8℃保存，開蓋(gai)後組份按要(yao)求(qiu)條件保(bao)存(cun)。

2. 試劑拆封後請(qing)盡(jin)快使(shi)用完！

產品(pin)簡介(jie)：

高(gao)等植物中有(you)兩類(lei)核(he)糖(tang)體(ti)：壹(yi)類存在(zai)於(yu)細胞(bao)質中，沈降系(xi)數(shu)為(wei)80S；另壹(yi)類存在(zai)於(yu)線粒體中。沈降(jiang)系(xi)數(shu)為(wei)55S。不同生物的(de)線粒體核(he)糖(tang)體(ti)在(zai)組成(cheng)與(yu)物(wu)理(li)化學(xue)性質(zhi)等方面(mian)的差(cha)異(yi)均(jun)比細(xi)胞(bao)質(zhi)核(he)糖(tang)體(ti)的(de)大。核(he)糖(tang)體(ti)是(shi)細胞(bao)進行蛋白質生(sheng)物合(he)成(cheng)的(de)部位(wei)，同時又與(yu)生(sheng)物(wu)體(ti)的(de)若幹性(xing)狀(zhuang)，如(ru)抗(kang)性突變(bian)有(you)關(guan)。

本試劑盒用簡便(bian)快速的方法即可(ke)快(kuai)速提取得到線粒體核(he)糖(tang)體(ti)。

本試劑盒適(shi)用於(yu)提取(qu)新鮮(xian)細(xi)胞(bao)和(he)組織(zhi)樣本的(de)線粒體核(he)糖(tang)體(ti)，用於(yu)凍存(cun)樣本的提取時由於(yu)凍存(cun)過(guo)程中(zhong)大部分(fen)線粒體可能會(hui)被破(po)壞，線粒體核(he)糖(tang)體(ti)回收(shou)率較(jiao)低。

本試劑盒提取的線粒體核(he)糖(tang)體(ti)具(ju)有(you)生物(wu)活(huo)性(xing)，可(ke)以(yi)用於(yu)線粒體核(he)糖(tang)體(ti)功能研(yan)究、蛋(dan)白提取(qu)等各種下遊(you)應用。

本試劑盒需要(yao)使(shi)用170000×g的離(li)心(xin)力(li)，沒有(you)相(xiang)應離(li)心(xin)機的(de)話(hua)可以(yi)選擇(ze)低速離心(xin)法的試(shi)劑盒，低速離心(xin)法試劑(ji)盒只需要(yao)達(da)到20000×g以(yi)內的(de)離心(xin)力(li)即可(ke)提(ti)取(qu)內質(zhi)網，壹般(ban)的(de)常規臺式(shi)離心(xin)機均(jun)可以(yi)滿(man)足使用要(yao)求(qiu)。低速離心(xin)法試劑(ji)盒提取得到的(de)線粒體核(he)糖(tang)體(ti)純度相(xiang)對(dui)於(yu)高(gao)速離心(xin)法的較(jiao)低，回收(shou)率相(xiang)當(dang)。

自備試劑和(he)儀(yi)器：

離心(xin)機、振蕩(dang)器、渦旋混勻器、勻漿(jiang)器、移(yi)液(ye)器、冰箱(xiang)、冰盒，PBS緩沖液(ye)、離心(xin)管、吸頭(tou)、壹次(ci)性手(shou)套

使用方法：

壹、使用註(zhu)意事項：

1、旋帽(mao)離(li)心(xin)管裝(zhuang)的試(shi)劑在(zai)開蓋(gai)前請(qing)短暫離(li)心(xin)，將蓋(gai)內壁(bi)上的液(ye)體甩(shuai)至管底(di)，避免(mian)開(kai)蓋(gai)時液(ye)體灑(sa)落。

2、實驗過(guo)程中(zhong)的(de)所(suo)有(you)試劑(ji)須預冷；所(suo)有(you)器具(ju)須放-20℃冰箱(xiang)預冷。整(zheng)個過(guo)程須保持(chi)樣(yang)品(pin)處(chu)於(yu)低溫。

二、操作(zuo)步(bu)驟(zhou)

1、取1-2×10

7個細胞，在(zai)4℃，500×g條件下離心(xin)2-3min，小(xiao)心(xin)吸取(qu)培養基(ji)，盡可(ke)能吸幹(gan)，收(shou)集細(xi)胞(bao)。

【註(zhu)】：

①組織(zhi)樣本，取(qu)50-100mg新(xin)鮮(xian)動(dong)物(wu)組織(zhi)樣本，用PBS洗滌幹(gan)凈(jing)，用shou術(shu)剪刀(dao)盡可能剪(jian)碎。

2、用冷PBS洗(xi)滌兩(liang)次(ci)，每次(ci)洗滌後盡(jin)可(ke)能吸幹(gan)上(shang)清(qing)。

【註(zhu)】：

①在(zai)1000×g條件下離心(xin)5分(fen)鐘(zhong)

3、在(zai)沈澱(dian)中加(jia)入(ru)500μl-1ml冷的(de)試(shi)劑(ji)A重(zhong)懸，置冰上(shang)5min

4、將Dounce勻漿(jiang)液(ye)勻漿(jiang)30-40下，然(ran)後在(zai)4℃，500×g條件下離心(xin)5min

【註(zhu)】：

①先(xian)用Dounce勻漿(jiang)液(ye)的松(song)型(xing)槌初(chu)步(bu)勻漿(jiang)10-20次(ci)，再(zai)用緊型槌勻漿(jiang)20-30次(ci)

②每上(shang)下壹個來回為(wei)壹次(ci)。

5、將上清(qing)液(ye)在(zai)1000×g條件下離心(xin)5分(fen)鐘(zhong)，棄(qi)沈(chen)澱(dian)，收(shou)集上(shang)清(qing)

6、將上清(qing)液(ye)在(zai)2000×g條件下離心(xin)5分(fen)鐘(zhong)，棄(qi)上(shang)清(qing)，收(shou)集沈(chen)澱(dian)。

7、將上清(qing)液(ye)在(zai)11000×g條件下離心(xin)15分(fen)鐘(zhong)，棄(qi)上(shang)清(qing)，收(shou)集沈(chen)澱(dian)。

8、在(zai)沈澱(dian)中加(jia)入(ru)0.5ml提取(qu)液(ye)B，充分(fen)混勻

9、置振蕩(dang)器振蕩(dang)20min。

【註(zhu)】：

①使用振蕩(dang)器/搖(yao)床的較(jiao)低轉(zhuan)速，提取液(ye)能輕(qing)微(wei)晃動(dong)即可(ke)。

②沒有(you)振蕩(dang)條件也(ye)可(ke)以不振蕩(dang)，稍(shao)微(wei)延長提取(qu)液(ye)的處(chu)理(li)時間，中(zhong)間(jian)每隔(ge)幾(ji)小(xiao)時用移(yi)液(ye)器吹(chui)打混勻即可(ke)。

10、在(zai)200×g條件下離心(xin)2分(fen)鐘(zhong)，棄(qi)沈(chen)澱(dian)，收(shou)集上(shang)清(qing)。

11、在(zai)1000×g條件下離心(xin)2分(fen)鐘(zhong)，棄(qi)沈(chen)澱(dian)，收(shou)集上(shang)清(qing)。

12、將上清(qing)液(ye)在(zai)11000×g條件下離心(xin)15分(fen)鐘(zhong)，棄(qi)上(shang)清(qing)，收(shou)集沈(chen)澱(dian)。

13、在(zai)沈澱(dian)中加(jia)入(ru)500μl提取(qu)液(ye)C，充分(fen)混勻。

14、在(zai)2-8℃振蕩(dang)15分(fen)鐘(zhong)。

【註(zhu)】：

①使用振蕩(dang)器/搖(yao)床的較(jiao)低轉(zhuan)速，提取液(ye)能輕(qing)微(wei)晃動(dong)即可(ke)。

②沒有(you)振蕩(dang)條件也(ye)可(ke)以不振蕩(dang)，置(zhi)2-8℃靜置(zhi)，稍(shao)微(wei)延長提取(qu)液(ye)的處(chu)理(li)時間，中(zhong)間(jian)每隔(ge)幾(ji)小(xiao)時用移(yi)

液(ye)器吹(chui)打混勻即可(ke)

15、在(zai)3000×g力(li)離心(xin)5分(fen)鐘(zhong)。棄(qi)沈(chen)澱(dian)，取上(shang)清(qing)。

16、在(zai)10000×g力(li)離心(xin)10分(fen)鐘(zhong)。棄(qi)沈(chen)澱(dian)，取上(shang)清(qing)。

17、將上清(qing)在(zai)4℃，170000×g力(li)條件下離心(xin)60分(fen)鐘(zhong)。棄(qi)上(shang)清(qing)，沈(chen)澱(dian)即為(wei)線粒體核(he)糖(tang)體(ti)。

【註(zhu)】：

①如果(guo)條件允(yun)許，可將離心(xin)時間延(yan)長到2-24小(xiao)時。

②液(ye)體量較(jiao)少沒有(you)合(he)適(shi)轉(zhuan)頭(tou)時，可以(yi)將小(xiao)離心(xin)管套入(ru)大離心(xin)管進行離心(xin)；或者用PBS補充(chong)液(ye)體量後用合(he)適(shi)的(de)離心(xin)管離心(xin)。

18、用100-400μl線粒體核(he)糖(tang)體(ti)保(bao)存液(ye)或其他相(xiang)應的(de)緩(huan)沖(chong)液(ye)重(zhong)懸沈澱(dian)，置冰箱(xiang)備用或直(zhi)接(jie)用於(yu)下遊(you)實(shi)驗。

【註(zhu)】：

①可以不使(shi)用試劑(ji)盒中的保存(cun)液(ye)，根(gen)據需要(yao)使(shi)用下遊(you)試(shi)驗的(de)緩(huan)沖液(ye)置-80℃保存(cun)。

②保存液(ye)中保存(cun)的(de)樣本(ben)需要(yao)重(zhong)新回收(shou)的話(hua)，可(ke)以(yi)采用170000×g條件下離心(xin)60min收(shou)集沈(chen)澱(dian)。

註(zhu)意事項：

1. 正式實(shi)驗前請(qing)選取幾(ji)個樣(yang)本(ben)做預實驗，以(yi)優(you)化實(shi)驗條件，取(qu)得(de)優良實(shi)驗效(xiao)果(guo)。

2. 螺旋蓋(gai)微(wei)量試(shi)劑管(guan)裝(zhuang)的試(shi)劑在(zai)開蓋(gai)前請(qing)短暫離(li)心(xin)，將蓋(gai)和(he)管(guan)內壁(bi)上的液(ye)體離心(xin)至管底(di)，避免(mian)開(kai)蓋(gai)時試劑(ji)損失。

3. 禁(jin)止與(yu)其(qi)他品(pin)牌的(de)試(shi)劑(ji)混用，否則(ze)會影(ying)響使(shi)用效果(guo)。

4. 樣品(pin)或試(shi)劑(ji)被細(xi)菌(jun)或(huo)真(zhen)菌(jun)汙(wu)染(ran)或試(shi)劑(ji)交(jiao)叉汙(wu)染(ran)可能會(hui)導致錯(cuo)誤的結(jie)果(guo)。

5. 最(zui)好使(shi)用壹次(ci)性吸頭(tou)、管、瓶或(huo)玻璃器皿，可(ke)重(zhong)復使(shi)用的玻璃器皿必(bi)須在(zai)使用前清(qing)洗(xi)並(bing)徹di清(qing)除(chu)殘(can)留(liu)清(qing)潔(jie)劑(ji)。

6. 實驗後完(wan)成(cheng)後所(suo)有(you)樣品(pin)及接(jie)觸(chu)過(guo)的器皿應按(an)照(zhao)規(gui)定程序(xu)處(chu)理(li)。

 線粒體核(he)糖(tang)體(ti)提(ti)取試劑(ji)盒 蛋白提取(qu)

產品(pin)訂(ding)購信(xin)息(xi)：

P5113  線粒體核(he)糖(tang)體(ti)提(ti)取試劑(ji)盒  50T/100T