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| 品牌(pai) | NobleRyder/諾博萊(lai)德 | 貨(huo)號(hao) | R9028 |
|---|---|---|---|
| 規格(ge) | 50T | 供(gong)貨(huo)周(zhou)期(qi) | 現(xian)貨(huo) |
| 主要(yao)用途(tu) | 改良(liang)後(hou)的裂解(jie)液(ye)能(neng)迅速裂解(jie)細(xi)胞,釋放出RNA的同時(shi)滅活RNase | 應(ying)用領域(yu) | 環保,化(hua)工,生物產業,農(nong)林(lin)牧(mu)漁(yu),制藥/生物制藥 |
NobleRyderR9028 柱(zhu)式(shi)法(fa)提(ti)取(qu)組織RNA試(shi)劑(ji)盒 Column extraction of Tissue RNA Kit
產(chan)品(pin)貨(huo)號(hao):R9028
產(chan)品(pin)名(ming)稱(cheng):柱式(shi)法(fa)提(ti)取(qu)組織RNA試(shi)劑(ji)盒 Column extraction of Tissue RNA Kit
英文(wen)名(ming)稱:Column extraction of Tissue RNA Kit
產(chan)品(pin)規格(ge):50T
柱(zhu)式(shi)法(fa)提(ti)取(qu)組織RNA試(shi)劑(ji)盒-常備(bei)現(xian)貨(huo)
產(chan)品(pin)簡(jian)介(jie):
具(ju)體(ti)產品的參數以收到(dao)產品(pin)說明(ming)書(shu)的參數為(wei)準(zhun)
NobleRyderR9028 柱(zhu)式(shi)法(fa)提(ti)取(qu)組織RNA試(shi)劑(ji)盒
該(gai)試(shi)劑(ji)盒對經典的異(yi)硫氰(qing)酸(suan)胍抽(chou)提RNA 的方法(fa)進(jin)行(xing)了(le)改良(liang)。改良(liang)後(hou)的裂解(jie)液(ye)能(neng)迅速裂解(jie)細(xi)胞,釋放出RNA的同時(shi)滅活RNase。RNA在(zai)高(gao)離(li)序(xu)鹽狀態下選(xuan)擇(ze)性吸(xi)附(fu)於(yu)離(li)心(xin)柱(zhu)內矽(gui)基(ji)質(zhi)膜上,再(zai)通過(guo)壹系(xi)列(lie)漂洗(xi)和(he)離(li)心(xin)等(deng)步驟(zhou)進(jin)壹(yi)步將(jiang)蛋(dan)白等(deng)雜質去除(chu),最(zui)後(hou)用(yong) RNase-Free ddH2O將(jiang)RNA從(cong)矽(gui)基(ji)質(zhi)膜上洗(xi)脫。本(ben)試(shi)劑(ji)盒操(cao)作(zuo)快(kuai)速(su)便捷,安全(quan)無需使用(yong)酚(fen)、氯(lv)仿(fang)等(deng)有毒(du)試(shi)劑(ji),操(cao)作(zuo)安全(quan)。
操(cao)作(zuo)步驟(zhou):
1、 稱(cheng)取(qu)25mg左右(you)組織,每(mei)管(guan)加(jia)入600μL裂解(jie)液(ye),使用(yong)兩(liang)顆小鋼(gang)珠(zhu)破碎,破碎後(hou),冰(bing)浴(yu)放置(zhi)5min。
2、 向(xiang)吸(xi)附(fu)柱中加(jia)入步驟(zhou)1破(po)碎後(hou)的混合(he)液(ye),4℃ 13000rpm 離(li)心(xin)3min,倒掉收集(ji)管(guan)中的廢(fei)液(ye),將(jiang)吸(xi)附(fu)柱重新(xin)放回收集(ji)管(guan)中。
3、 向(xiang)吸(xi)附(fu)柱中加(jia)入600μL 洗(xi)滌(di)液(ye)(使用(yong)前(qian)請先(xian)檢查(zha)是否(fou)已加(jia)入無水(shui)乙(yi)醇),4℃ 13000rpm 離心(xin)2min,倒掉收集(ji)管(guan)中的廢(fei)液(ye),將(jiang)吸(xi)附(fu)柱重新(xin)放回收集(ji)管(guan)中。
4、 向(xiang)吸(xi)附(fu)柱中加(jia)入50μL Dnase酶(直(zhi)接加(jia)入至白色柱(zhu)底(di)),靜(jing)置(zhi) 10~15min。
5、 向(xiang)吸(xi)附(fu)柱中加(jia)入600μL 漂洗(xi)液(使用(yong)前(qian)請先(xian)檢查(zha)是否(fou)已加(jia)入無水(shui)乙(yi)醇),4℃ 13000rpm 離心(xin)2min,倒掉收集(ji)管(guan)中的廢(fei)液(ye),將(jiang)吸(xi)附(fu)柱重新(xin)放回收集(ji)管(guan)中。
6、 重復操(cao)作(zuo)步驟(zhou)5。
7、 4℃ 13000rpm空(kong)離(li)2min,將(jiang)吸(xi)附(fu)柱敞(chang)口(kou)室(shi)溫(wen)放置(zhi)3min,以除(chu)去(qu)多(duo)余的乙(yi)醇。
8、 將(jiang)吸(xi)附(fu)柱放到(dao)壹個(ge)幹凈(jing)的離心(xin)管(guan)上(shang),向(xiang)吸(xi)附(fu)柱中加(jia)入30-100μL洗(xi)脫液(ye),室(shi)溫(wen)放置(zhi)2min,4℃,13000rpm離心(xin)1min,得到(dao)RNA溶(rong)液(ye),RNA保(bao)存(cun)於(yu)-80℃。
1、 所(suo)有相(xiang)關器(qi)皿耗材(cai)都(dou)應(ying)為(wei)RNase-free 產(chan)品,操(cao)作(zuo)過(guo)程要(yao)小心(xin),帶口(kou)罩(zhao)、手(shou)套(tao)避免(mian)環境(jing)中 RNA 酶汙染樣(yang)品。
2、 洗(xi)脫液(ye)的體(ti)積(ji)不應少(shao)於(yu)30μL,體(ti)積(ji)過(guo)少(shao)會(hui)影(ying)響提取(qu)效(xiao)率,RNA產物應保(bao)存在(zai)-80℃,以防RNA降解。
3、 RNA 濃(nong)度(du)及純(chun)度(du)檢測(ce):提取(qu)的 RNA 片段(duan)可用(yong)瓊(qiong)脂糖凝膠電泳和(he)紫(zi)外(wai)分(fen)光光度(du)計檢測(ce)濃(nong)度與純(chun)度。OD260/OD280 比(bi)值應(ying)為(wei)2.0-2.2。
柱(zhu)式(shi)法(fa)提(ti)取(qu)組織RNA試(shi)劑(ji)盒-常備(bei)現(xian)貨(huo)
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R9028 柱(zhu)式(shi)法(fa)提(ti)取(qu)組織RNA試(shi)劑(ji)盒 Column extraction of Tissue RNA Kit 50T