本產(chan)品利(li)用(yong)RNA在(zai)特(te)定(ding)緩沖體(ti)系下能(neng)夠(gou)高效(xiao)結(jie)合矽(gui)基(ji)質材(cai)料(liao)的(de)原理(li)，采(cai)用(yong)矽(gui)膠膜離(li)心吸(xi)附(fu)柱，適(shi)用(yong)於從(cong)培(pei)養(yang)細(xi)胞和(he)動(dong)物(wu)組(zu)織(zhi)中提取(qu)總RNA，可(ke)以(yi)有(you)效(xiao)提(ti)取(qu)分(fen)子(zi)量(liang)大(da)於200nt的(de)RNA。
柱式超(chao)純(chun)動(dong)物RNA小提(ti)試劑盒(he) 質(zhi)粒(li)提取(qu)

NobleRyder R0898 柱式超(chao)純(chun)動(dong)物RNA小提(ti)試劑盒(he)Spin HiPure Animal RNA Mini Kit

產(chan)品貨(huo)號(hao)：R0898

產(chan)品名稱(cheng)：柱式超(chao)純(chun)動(dong)物RNA小提(ti)試劑盒(he)Spin HiPure Animal RNA Mini Kit

英(ying)文名稱(cheng)：Spin HiPure Animal RNA Mini Kit

產(chan)品規格(ge)：50T

柱式超(chao)純(chun)動(dong)物RNA小提(ti)試劑盒(he) 質(zhi)粒(li)提取(qu)

產(chan)品簡(jian)介：

具體(ti)產(chan)品(pin)的(de)參數以收到產品說(shuo)明書的(de)參數為準(zhun)

NobleRyder R0898柱式超(chao)純(chun)動(dong)物RNA小提(ti)試劑盒(he)Spin HiPure Animal RNA Mini Kit

本(ben)產品(pin)利用(yong)RNA在(zai)特(te)定(ding)緩沖體(ti)系下能(neng)夠(gou)高效(xiao)結(jie)合矽(gui)基(ji)質材(cai)料(liao)的(de)原理(li)，采(cai)用(yong)矽(gui)膠膜離(li)心吸(xi)附(fu)柱，適(shi)用(yong)於從(cong)培(pei)養(yang)細(xi)胞和(he)動(dong)物(wu)組(zu)織(zhi)中提取(qu)總RNA，可(ke)以(yi)有(you)效(xiao)提(ti)取(qu)分(fen)子(zi)量(liang)大(da)於200nt的(de)RNA。提(ti)取(qu)過(guo)程中，無需使(shi)用(yong)苯fen氯(lv)仿等(deng)，采(cai)用(yong)DNase柱上處理(li)，che底去除(chu)基(ji)因組(zu)DNA殘(can)留，提(ti)取(qu)的(de)RNA樣品經PCR檢測(ce)不(bu)含(han)基(ji)因組(zu)DNA，且(qie)極少含蛋(dan)白質和(he)其(qi)它雜(za)質(zhi)的(de)汙(wu)染(ran)。本產品(pin)操作(zuo)簡(jian)單快速，且(qie)提取(qu)的(de)RNA純(chun)度(du)高，可(ke)直(zhi)接(jie)用(yong)於RT-PCR、Northernblot、構建(jian)cDNA文庫(ku)等(deng)各(ge)種(zhong)分(fen)子(zi)生(sheng)物學實(shi)驗(yan)。

註(zhu)意事項(xiang)：

自備(bei)材(cai)料(liao)：β-巰基(ji)乙醇(chun)、無水乙(yi)醇(chun)

1、Buffer RA 可(ke)能(neng)會(hui)形成(cheng)沈(chen)澱(dian)，如果有(you)沈澱(dian)出(chu)現，請(qing)於60℃加(jia)熱溶解，然後(hou)待(dai)恢復(fu)至室溫後(hou)使(shi)用(yong)。

2. 操作(zuo)前請(qing)根據樣品數量(liang)，按(an)照1mlBufferRA中(zhong)加(jia)入10μlβ-巰基(ji)乙醇(chun)的(de)比例，配(pei)制(zhi)裂(lie)解液。建(jian)議該(gai)裂(lie)解(jie)液現用(yong)現配(pei)。若(ruo)配(pei)好的(de)裂(lie)解液沒(mei)有用(yong)完(wan)，可(ke)在(zai)4℃保(bao)存1個(ge)月(yue)。

3. 首(shou)ci使(shi)用(yong)，請(qing)在(zai)BufferRW2中加入48ml無水乙(yi)醇(chun)，並(bing)做好標記。

操作(zuo)步(bu)驟(zhou)（僅供參考）：

1. 細(xi)胞或(huo)組(zu)織(zhi)的(de)裂(lie)解

1) 貼(tie)壁細胞：

che底(di)吸(xi)棄(qi)培(pei)養(yang)液(ye)，按(an)照每(mei)6-10cm2面(mian)積加入600μlBufferRA（使(shi)用(yong)前請(qing)加入β-巰基(ji)乙醇(chun)），用(yong)移液(ye)器(qi)吹打3-5次使(shi)細胞裂解(jie)。少於6-10cm2面(mian)積加入350μlBufferRA。

2) 細(xi)胞懸(xuan)液(ye)：

500×g 離(li)心收(shou)集細胞，che底吸(xi)棄(qi)培(pei)養(yang)液(ye)，每(mei)5×106-1×107細(xi)胞加入600μlBufferRA（使(shi)用(yong)前請(qing)加入β-巰基(ji)乙醇(chun)），用(yong)移液(ye)器(qi)吹3-5次使(shi)細胞裂解(jie)。少於5×106細胞加入350μlBufferRA。

3) 動(dong)物組(zu)織：

取(qu)600μl Buffer RA（使(shi)用(yong)前請(qing)先檢(jian)查(zha)是(shi)否已加入β-巰基(ji)乙醇(chun)）加(jia)入到1.5ml離(li)心管中(zhong)。組(zu)織(zhi)樣品經液氮(dan)研磨後(hou)，將研磨成粉末狀(zhuang)的(de)樣品（20-30mg）加入到上述1.5ml離(li)心管中(zhong)，劇(ju)烈(lie)震(zhen)蕩混(hun)勻直(zhi)至裂解液中(zhong)無明顯沈澱(dian)。若(ruo)組織(zhi)樣本低於20mg，則加(jia)入350μlBufferRA。

2. 向上述組織(zhi)裂解(jie)混(hun)合物(wu)中(zhong)加入590μlNuclease-freeWater(DEPC-treated)和(he) 10μlProteinase K，混(hun)勻後(hou)56℃孵(fu)育10-20min。

3. 12,000 rpm 離(li)心 2min，小(xiao)心吸(xi)取(qu)管中(zhong)的(de)上清液(ye)轉移至新的(de)1.5ml離(li)心管中(zhong)，盡(jin)量(liang)避免(mian)觸及管中(zhong)的(de)細(xi)胞碎片(pian)沈澱(dian)。

4. 緩(huan)慢加(jia)入0.5倍(bei)上清液(ye)體(ti)積的(de)無水乙(yi)醇(chun)，混(hun)勻（此(ci)時可(ke)能(neng)會(hui)出(chu)現沈(chen)澱(dian)），將得到(dao)的(de)溶(rong)液和(he)沈(chen)澱(dian)壹起轉(zhuan)入SpinColumnswith Collection Tubes-RC（吸(xi)附(fu)柱放(fang)在(zai)收集管中(zhong)），12,000rpm離(li)心30s，棄(qi)除收集(ji)管中(zhong)的(de)廢(fei)液，將吸(xi)附(fu)柱放(fang)回(hui)收(shou)集(ji)管中(zhong)。

5. 向吸(xi)附(fu)柱中(zhong)加350μlBufferRW1，12,000rpm離(li)心30s，棄(qi)除收集(ji)管中(zhong)的(de)廢(fei)液，將吸(xi)附(fu)柱放(fang)回(hui)收(shou)集(ji)管中(zhong)。

6. 配(pei)制(zhi)RNase-free DNase 工(gong)作(zuo)液：取(qu)10μlRNase-free DNase，加(jia)入至新的(de)RNase-free 離(li)心管中(zhong)，加(jia)70μl Buffer DB，混(hun)合均(jun)勻(yun)，配(pei)制(zhi)成(cheng)終(zhong)體(ti)積為80μl的(de)RNase-freeDNase工(gong)作(zuo)液。

7. 向吸(xi)附(fu)柱中(zhong)央加入80μlRNase-freeDNase工(gong)作(zuo)液，室溫放(fang)置(zhi)15min。

8. 向吸(xi)附(fu)柱中(zhong)加入350μlBufferRW1，12,000rpm離(li)心30s，棄(qi)除收集(ji)管中(zhong)的(de)廢(fei)液，將吸(xi)附(fu)柱放(fang)回(hui)收(shou)集(ji)管中(zhong)。

9. 向吸(xi)附(fu)柱中(zhong)加入500μlBufferRW2（使(shi)用(yong)前請(qing)先檢(jian)查(zha)是(shi)否已加入無水乙(yi)醇(chun)），12,000rpm離(li)心30s，棄(qi)除收集(ji)管中(zhong)的(de)廢(fei)液，將吸(xi)附(fu)柱放(fang)回(hui)收(shou)集(ji)管中(zhong)。

10. 重復(fu)操作(zuo)步(bu)驟(zhou)9壹(yi)次。

11. 將吸(xi)附(fu)柱放(fang)回(hui)收(shou)集(ji)管中(zhong)，室溫12,000rpm離(li)心3min。

註(zhu)：此(ci)步(bu)驟(zhou)十分(fen)重要，否則BufferRW2中殘(can)留的(de)乙(yi)醇(chun)會(hui)影響(xiang)後(hou)續(xu)實(shi)驗(yan)。

12. 將吸(xi)附(fu)柱放(fang)入壹個(ge)新的(de)1.5ml 離(li)心管（DNase/RNase-free），加(jia)入50-100μlBufferTB，室溫放(fang)置(zhi)1-2min，12,000 rpm 離(li)心1min，得(de)到RN溶液(ye)。所(suo)得的(de)RNA應(ying)立即使(shi)用(yong)或(huo)適(shi)量(liang)分(fen)裝(zhuang)後(hou)-80℃保(bao)存，避(bi)免(mian)反復(fu)凍(dong)融。

註(zhu)意事項(xiang)：

1． 本(ben)產品(pin)僅供科研使(shi)用(yong)。請(qing)勿用(yong)於醫(yi)藥、臨床診(zhen)斷(duan)或(huo)治(zhi)療(liao)，食品及化(hua)妝(zhuang)品等用(yong)途。請(qing)勿存放(fang)於(yu)普(pu)通(tong)住宅(zhai)區。

2． 為了您(nin)的(de)安全和(he)健康，請(qing)穿(chuan)好實(shi)驗(yan)服(fu)並佩(pei)戴(dai)壹(yi)次性手套和(he)口(kou)罩操作(zuo)。

柱式超(chao)純(chun)動(dong)物RNA小提(ti)試劑盒(he) 質(zhi)粒(li)提取(qu) 

產(chan)品訂(ding)購信息：

R0898 柱式超(chao)純(chun)動(dong)物RNA小提(ti)試劑盒(he)Spin HiPure Animal RNA Mini Kit  50T