YBR Green I是高靈(ling)敏的(de)DNA熒(ying)光染料(liao)，適(shi)用(yong)於(yu)各種(zhong)電泳(yong)分析，操(cao)作(zuo)簡(jian)單(dan)：無須脫色(se)或沖(chong)洗。
SYBR Green I(10000×) 核(he)酸電泳(yong)

SYBR Green I(10000×)電泳(yong)用(yong) 

SYBR Green I是高靈(ling)敏的(de)DNA熒(ying)光染料(liao)，適(shi)用(yong)於(yu)各種(zhong)電泳(yong)分析，操(cao)作(zuo)簡(jian)單(dan)：無須脫色(se)或沖(chong)洗。SYBR Green I 與(yu)dsDNA結合(he)熒(ying)光信(xin)號(hao)會增(zeng)強800-1000倍，用(yong)SYBR Green I染色(se)的(de)凝(ning)膠樣品熒光信(xin)號(hao)強，背(bei)景信(xin)號(hao)低。可適(shi)用(yong)於(yu)多種(zhong)電泳(yong)分析。（SYBR GreenⅠ的(de)最di檢出(chu)限：20pg DNA(254nm);60pg DNA(300nm 紫外透(tou)射(she))；此(ci)外(wai)，SYBR®GreenⅠ還可以(yi)用(yong)於(yu)檢測寡(gua)核(he)苷(gan)酸(1-2ng,300nm 紫外(wai)透(tou)射(she))，比EB靈(ling)敏20至(zhi)100倍。）SYBR Green I適(shi)合(he)於(yu)多種(zhong)凝(ning)膠電泳(yong)方(fang)法(fa)：瓊(qiong)脂(zhi)糖凝(ning)膠，聚丙(bing)烯(xi)酰胺(an)凝(ning)膠電泳(yong)，脈(mai)沖(chong)電場(chang)凝(ning)膠電泳(yong)，和毛(mao)細管(guan)電泳(yong)等(deng)。SYBR Green I與(yu)雙鏈DNA的(de)親(qin)和力(li)非(fei)常高，因此(ci)可以(yi)用(yong)做電泳(yong)前(qian)染色(se)，對分子(zi)生物學中(zhong)常(chang)用的(de)酶(mei)（如(ru)：Taq酶、逆(ni)轉錄(lu)酶、內切(qie)酶、T4連(lian)接(jie)酶(mei)等(deng)）沒(mei)有抑(yi)制作(zuo)用(yong)。另外(wai)，SYBR Green I與(yu)EB相比，誘變能(neng)力(li)大(da)大(da)降(jiang)低。

SYBR Green I核(he)酸染料(liao)特(te)點

SYBR Green I(10000×) 核(he)酸電泳(yong)

高靈(ling)敏：至(zhi)少可檢出(chu)20pg DNA，高於(yu)EB染色(se)法25-100倍(bei)。

信(xin)噪比(bi)高：樣品熒光信(xin)號(hao)強，背(bei)景信(xin)號(hao)低。

操(cao)作(zuo)簡(jian)單(dan)：無須脫色(se)或沖(chong)洗。

適(shi)用(yong)範(fan)圍(wei)廣：可適(shi)用(yong)於(yu)多種(zhong)電泳(yong)分析。

使(shi)用(yong)方便：不影響(xiang)其(qi)它修(xiu)飾(shi)酶作(zuo)用(yong)。

安(an)全(quan)性(xing)高：分子(zi)克隆(long)上明(ming)確誘變(bian)能(neng)力(li)很(hen)低

具(ju)體(ti)產(chan)品的(de)參數(shu)以收(shou)到產(chan)品說明書的(de)參數(shu)為準(zhun)

使(shi)用(yong)方法

SYBR Green I預染方(fang)法(fa)

1.該(gai)方法適(shi)於(yu)瓊(qiong)脂(zhi)糖(tang)凝(ning)膠電泳(yong)和PAGE凝(ning)膠電泳(yong)

2.工(gong)作(zuo)液(ye)的(de)配(pei)制：用電泳(yong)緩(huan)沖(chong)液(ye)將10000×的(de)SYBR GreenⅠ稀(xi)釋(shi)100倍，即為SYBR GreenⅠ工作(zuo)液(ye)。SYBR GreenⅠ工作(zuo)液(ye)可以(yi)置2-8℃冷(leng)藏(zang)壹(yi)個(ge)月(yue)以(yi)上(shang)。

3.制膠：按常規(gui)方(fang)法(fa)制膠，不含(han)任(ren)何染料(liao)。

4.樣品染色(se)：向(xiang)分析樣品中加入SYBR GreenⅠ工(gong)作(zuo)液(ye)和載(zai)樣緩沖(chong)液(ye)，室(shi)溫(wen)放(fang)置10分鐘(zhong)，使SYBR GreenⅠ與(yu)樣品中DNA充分結(jie)合(he)。SYBR GreenⅠ工(gong)作(zuo)液(ye)加入量為總上樣量的(de)1/10。

5.DNA Marker染色(se)：將5μL DNA Marker和1μLSYBR GreenⅠ工(gong)作(zuo)液(ye)混(hun)勻(yun)，室(shi)溫(wen)放(fang)置5分鐘(zhong)，使SYBR GreenⅠ與(yu)DNA充分結(jie)合(he)。（商(shang)品Marker最好(hao)稀釋(shi)2-5倍後再電泳(yong)，否(fou)則(ze)電泳(yong)條(tiao)帶(dai)會變(bian)形，特別(bie)是大(da)片段(duan)。）

6.上(shang)樣、電泳(yong)：按(an)常(chang)規(gui)操(cao)作(zuo)。

SYBR Green I後(hou)染方(fang)法(fa)

1.按(an)照(zhao)常規(gui)方(fang)法(fa)進(jin)行(xing)電泳(yong)。

2.用(yong)PH=7.0-8.5的(de)緩(huan)沖(chong)液(ye)（如：TAE，TBE或(huo)TE），按(an)照(zhao)10000：1的(de)比(bi)例(li)稀釋(shi)SYBR GreenⅠ濃(nong)縮(suo)液(ye)，混(hun)勻(yun)，制成染色(se)溶液(ye)。

3.將(jiang)染色(se)溶液(ye)倒入合(he)適(shi)的(de)聚(ju)丙(bing)烯(xi)容器中，放(fang)入凝(ning)膠，用鋁箔(bo)等(deng)蓋(gai)住(zhu)容(rong)器使染料(liao)避光。室(shi)溫(wen)振蕩染色(se)10-30分鐘(zhong)，染色(se)時間(jian)因凝(ning)膠濃(nong)度(du)和厚(hou)度(du)而(er)定。聚(ju)丙(bing)烯(xi)酰胺(an)凝(ning)膠直接(jie)在(zai)玻(bo)璃(li)平(ping)皿上(shang)染色(se)，將配(pei)好(hao)的(de)工(gong)作(zuo)溶(rong)液(ye)輕輕(qing)地(di)倒在膠板上，讓工作(zuo)液(ye)均勻(yun)地(di)覆蓋整個(ge)膠板，並染色(se)30分鐘(zhong)。玻璃(li)平(ping)皿必須預先(xian)經過矽(gui)烷化(hua)溶(rong)液(ye)處理(li)（避免染料(liao)吸(xi)附在(zai)玻(bo)璃(li)表面上）。

4.用(yong)紫(zi)外儀觀(guan)測。

SYBR Green I使(shi)用(yong)註(zhu)意(yi)事(shi)項(xiang)

1.在(zai)"SYBR GreenⅠ預染色(se)方法(fa)"中(zhong)，電泳(yong)時(shi)間(jian)不要超(chao)過2小時(shi)，否(fou)則SYBR GreenⅠ會從DNA上分離出(chu)來(lai)，會產(chan)生彌(mi)散(san)狀條帶(dai)。

2.在(zai)常(chang)規(gui)用(yong)酒(jiu)精沈澱(dian)核(he)酸的(de)過程中(zhong)，SYBR Green I可以(yi)全(quan)部從雙鏈核酸上去(qu)掉(diao)。

3.如(ru)果想對用(yong) SYBR Green I 染過的(de)膠進(jin)行(xing)Southern blots，建(jian)議(yi)在(zai)預雜化(hua)和雜(za)化(hua)溶液(ye)中加入0.1%- 0.3%的(de)SDS。

4.在(zai)紫(zi)外照射(she)透(tou)視(shi)下(xia)，與(yu)雙鏈DNA接(jie)合(he)的(de)SYBR Green I呈(cheng)現(xian)綠(lv)色(se)熒光。如果膠中含(han)有(you)單(dan)鏈DNA則顏色(se)為橘(ju)黃(huang)而(er)不(bu)是綠(lv)色(se)。

5.SYBR Green對(dui)玻(bo)璃(li)和非(fei)聚(ju)丙(bing)烯(xi)材料(liao)具(ju)有(you)壹(yi)定親(qin)合(he)力(li)。建(jian)議(yi)在(zai)稀(xi)釋(shi)、貯存、染色(se)等(deng)使(shi)用(yong)過程中(zhong)用(yong)聚丙(bing)烯(xi)類容(rong)器。

SYBR Green I(10000×) 核(he)酸電泳(yong) 

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D0028  SYBR Green I(10000×)  100ul