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| 品(pin)牌(pai) | NobleRyder/諾(nuo)博(bo)萊(lai)德 | 貨號 | SR2998 |
|---|---|---|---|
| 規格 | 50ul/100ul/1ml | 供貨(huo)周期(qi) | 現貨 |
| 主(zhu)要(yao)用途(tu) | 壹種(zhong)直(zhi)接(jie)與(yu)雙(shuang)鏈 DNA (dsDNA) 結(jie)合(he)的熒光染(ran)料(liao) | 應(ying)用領(ling)域(yu) | 環(huan)保(bao),化工(gong),生物(wu)產(chan)業(ye),農林牧(mu)漁,制(zhi)藥/生物(wu)制藥 |
NobleRyder SR2998 SYBR Green I (PCR級 10000X)
產(chan)品貨號:SR2998
產(chan)品名(ming)稱(cheng):SYBR Green I (PCR級,10000X)
產(chan)品規格:50ul/100ul/1ml
SYBR Green I (PCR級 10000X)核(he)酸檢測
產(chan)品簡(jian)介:
外觀(guan)(性(xing)狀(zhuang)):液體
儲存條件(jian):-20℃避(bi)光保(bao)存,有效期(qi)至少(shao)壹年(nian)。
具體產(chan)品的參(can)數(shu)以(yi)收(shou)到產(chan)品說明(ming)書(shu)的參(can)數(shu)為(wei)準(zhun)
NobleRyder SR2998 SYBR Green I (PCR級,10000X)SYBR Green I 染料(liao)是(shi)壹種(zhong)直(zhi)接(jie)與(yu)雙(shuang)鏈 DNA (dsDNA) 結(jie)合(he)的熒光染(ran)料(liao),是(shi)熒(ying)光定(ding)量PCR 最(zui)chang用的DNA結(jie)合(he)染料(liao)。在定量 PCR中(zhong),SYBR Green I可與(yu)雙(shuang)鏈DNA(dsDNA)非(fei)特異性(xing)結(jie)合(he)後發出熒光,則(ze)可以(yi)通(tong)過檢測(ce)反應(ying)體系中的SYBR Green I 熒光強(qiang)度,達到檢(jian)測PCR 產(chan)物(wu)擴增(zeng)量的目(mu)的。遊離狀(zhuang)態下(xia),SYBR Green I發出微(wei)弱(ruo)的熒光,壹旦(dan)與(yu)dsDNA結(jie)合(he),其熒光增(zeng)加(jia)1000倍(bei),壹個反(fan)應(ying)發出的全(quan)部(bu)熒光信(xin)號與(yu)出現(xian)的dsDNA量成比(bi)例,且(qie)會隨(sui)擴增(zeng)產(chan)物(wu)的增(zeng)加(jia)而(er)增(zeng)加(jia);所(suo)以(yi)通(tong)過檢測(ce)PCR 反應(ying)液中(zhong)的熒光信(xin)號強(qiang)度,可以(yi)對(dui)目(mu)的基(ji)因進(jin)行(xing)準(zhun)確(que)定量,同時(shi)還(hai)可以(yi)測(ce)定擴增(zeng)的目(mu)的DNA片段(duan)的熔(rong)解(jie)溫度。
使(shi)用說(shuo)明(ming):
使(shi)用時(shi),配置PCR反應(ying)混合(he)液,將10000×SYBR Green I濃(nong)縮液加(jia)入(ru)到(dao)PCR反(fan)應(ying)體系,使(shi)終(zhong)濃(nong)度為(wei)0.5× (0.2×到(dao)1×之(zhi)間調整(zheng))。以(yi)上(shang)操(cao)作(zuo)建(jian)議(yi)在冰上進(jin)行(xing)。
註:① 反應(ying)液配制(zhi)方(fang)法和(he)PCR 擴增(zeng)條件(jian)請參(can)照(zhao)DNA聚(ju)合酶使(shi)用說(shuo)明(ming)。
② Realtime PCR 擴增(zeng)儀(yi)的使(shi)用方(fang)法,請參(can)照(zhao)各(ge)儀(yi)器(qi)說(shuo)明(ming)書(shu)。
註意事(shi)項(xiang):
使(shi)用濃(nong)度對(dui)熒光PCR結(jie)果的影響(xiang)
SYBR Green I的使(shi)用濃(nong)度是保(bao)證熒(ying)光定(ding)量PCR實(shi)驗(yan)成功非(fei)常關(guan)鍵(jian)的因素(su)。如果SYBR Green I的濃(nong)度過低(di)會使(shi)熒(ying)光信(xin)號的變(bian)化降低(di),這(zhe)就(jiu)意味著低拷(kao)貝(bei)的樣品(pin)可能無(wu)法(fa)檢出(chu);而在高(gao)濃(nong)度時,將會抑制(zhi)PCR反應(ying),降低(di)PCR反(fan)應(ying)效率(lv)。所以(yi)壹般(ban)在使(shi)用SYBR Green I時(shi)應(ying)根(gen)據(ju)實際(ji)情(qing)況(kuang)優(you)化使(shi)用濃(nong)度,反應(ying)的終濃(nong)度為(wei)0.2×到(dao)1×之(zhi)間。
鎂離子濃(nong)度的影響(xiang)
提(ti)高(gao)鎂離子濃(nong)度可以(yi)降低(di)SYBR Green I對(dui)PCR反應(ying)的抑制(zhi)作(zuo)用。我們建(jian)議(yi)在用SYBR Green I進(jin)行(xing)熒(ying)光PCR反(fan)應(ying)時,鎂(mei)離子濃(nong)度比(bi)無SYBR Green I 的普(pu)通(tong) PCR 反(fan)應(ying)高(gao)出0.5~3mM。
SYBR Green I (PCR級 10000X)核(he)酸檢測
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SR2998 SYBR Green I (PCR級,10000X) 50ul/100ul/1ml