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        1. 產(chan)品(pin)中心/ PRODUCTS

          我的(de)位置:首頁  >  產品中心  >  分子(zi)生物學(xue)  >  載體構(gou)建  >  C9228OmniMAX2-T1Phage Resistant感受態細胞載體
          OmniMAX2-T1Phage Resistant感受態細胞載體
          • 產品型號:C9228
          • 廠(chang)商性(xing)質(zhi):生產(chan)廠(chang)家(jia)
          • 更(geng)新(xin)時(shi)間(jian):2025-03-17
          • 訪(fang)  問(wen)  量(liang):236
          簡(jian)要描(miao)述:

          是采用大(da)腸桿(gan)菌(jun)OmniMAX2-T1菌(jun)株(zhu)經特(te)殊(shu)工藝處理得到(dao)的(de)感(gan)受態細胞,可(ke)用於(yu)DNA的(de)化學(xue)轉(zhuan)化。
          OmniMAX2-T1Phage Resistant感(gan)受態細胞載體

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          產品(pin)詳(xiang)情(qing)
          品牌(pai)NobleRyder/諾(nuo)博(bo)萊德(de)貨(huo)號C9228
          規格(ge)10*100ul供貨周(zhou)期(qi)現(xian)貨(huo)
          主要用(yong)途(tu)是采用大(da)腸桿(gan)菌(jun)OmniMAX2-T1菌(jun)株(zhu)經特(te)殊(shu)工藝處理得到(dao)的(de)感(gan)受態細胞應用領域環(huan)保,化工(gong),生物產(chan)業,農林(lin)牧(mu)漁,制藥(yao)/生物制(zhi)藥(yao)

          NobleRyder C9228 OmniMAX2-T1 Phage Resistant 感受態細胞

           

          產品(pin)貨(huo)號:C9228

          產品(pin)名稱:OmniMAX2-T1 Phage Resistant 感(gan)受態細胞

          產品(pin)規格(ge):10*100ul

          OmniMAX2-T1Phage Resistant感受態細胞載體

          產品(pin)簡(jian)介(jie):

          儲(chu)存條件(jian):-70℃

           

          具體(ti)產(chan)品的(de)參(can)數(shu)以(yi)收(shou)到(dao)產(chan)品(pin)說明(ming)書的(de)參(can)數(shu)為準

          NobleRyder C9228 OmniMAX2-T1 Phage Resistant 感受態細胞

          是采用大(da)腸桿(gan)菌(jun)OmniMAX2-T1菌(jun)株(zhu)經特(te)殊(shu)工藝處理得到(dao)的(de)感(gan)受態細胞,可(ke)用於(yu)DNA的(de)化學(xue)轉(zhuan)化。使(shi)用pUC19 質(zhi)粒檢測,轉(zhuan)化效(xiao)率(lv)可(ke)達108cfu/µg。

          基因(yin)型(xing):

          F′mcrAΔ(mrr-hsdRMS-mcrBC)φ80(lacZ)ΔM15Δ(lacZYA-ar gF)U169endA1recA1supE44thi-1gyrA96relA1tonApanD

          抗生素(su)耐(nai)藥性(xing):細胞具有(you)四huan素(su)抗性(xing)。

          產品(pin)特(te)點(dian):

          1. 消(xiao)除(chu)了mcrA,mrr,mcrBC和(he)hsdRMS限制系(xi)統,高(gao)效(xiao)克隆甲基(ji)化DNA,可(ke)用於(yu)文(wen)庫(ku)構(gou)建;

          2. 具有(you)T1、T5噬菌(jun)體(ti)抗(kang)性(xing),保(bao)護(hu)樣品(pin)免(mian)受噬菌(jun)體(ti)的(de)汙染(ran);優(you)化的(de)基(ji)因型,避(bi)免(mian)DNA重(zhong)排;

          3. 可(ke)用於(yu)藍、白(bai)斑(ban)篩選(xuan);

          4. 制備(bei)單(dan)鏈DNA。

          操(cao)作(zuo)方法:(以(yi)下操(cao)作(zuo)均按無(wu)菌條件(jian)的(de)標(biao)準進行(xing))

          1. 取感(gan)受態細胞置於(yu)冰浴中,如(ru)需分裝可(ke)將剛(gang)融(rong)化細胞懸液分裝到(dao)無(wu)菌預(yu)冷的(de)離(li)心管中,置於(yu)冰浴中。

          2. 向感(gan)受態細胞懸液中加(jia)入目(mu)的(de)DNA,輕(qing)輕(qing)旋(xuan)轉離(li)心管以(yi)混勻(yun)內(nei)容(rong)物,在冰浴中靜置30分鐘(zhong)。

          3. 將離(li)心管置於(yu)42℃水(shui)浴(yu)中放置60秒(miao)鐘(zhong),然(ran)後快速將(jiang)管轉(zhuan)移(yi)到(dao)冰浴中,使(shi)細胞冷卻(que)2分鐘(zhong),該過(guo)程不(bu)要搖(yao)動(dong)離(li)心管。

          4. 向每(mei)個離(li)心管中加(jia)入500μL無(wu)菌的(de)SOC或LB培(pei)養(yang)基(不含抗(kang)生素(su)),混(hun)勻後(hou)置於(yu)37℃150rpm,搖(yao)床振(zhen)蕩(dang)培(pei)養(yang)60分鐘(zhong),目(mu)的(de)是使(shi)質粒上(shang)相關(guan)的(de)抗(kang)性(xing)標(biao)記基(ji)因表達(da),使(shi)菌體(ti)復蘇(su)。

          5. 無(wu)菌條件(jian)下,取適(shi)量(liang)菌(jun)液(ye)加(jia)到(dao)含(han)相應(ying)抗(kang)生素(su)的(de)LB固體(ti)培(pei)養(yang)基平板上(shang),用(yong)無(wu)菌的(de)細菌塗布器(qi)或玻璃珠將(jiang)細胞均勻塗(tu)開。等(deng)平板中的(de)液(ye)體wan全吸收(shou)後,倒(dao)置平板,37℃培(pei)養(yang) 12-16 小時。

          6. 保留(liu)剩(sheng)余(yu)的(de)菌(jun)液於4℃冰箱中,視(shi)平板上(shang)菌(jun)落(luo)生長情(qing)況決(jue)定(ding)去(qu)留(liu)。

          註意事(shi)項:

          1.感受態細胞應保存在-70℃,不可(ke)反復凍(dong)融,否(fou)則其(qi)轉化效(xiao)率(lv)將會(hui)降低。

          2.實(shi)驗(yan)過(guo)程中應嚴(yan)格(ge)無(wu)菌操(cao)作(zuo),防止(zhi)其(qi)它DNA或雜菌(jun)的(de)汙染(ran),避(bi)免(mian)為以(yi)後的(de)篩選(xuan)、鑒(jian)定(ding)帶(dai)來(lai)影(ying)響(xiang)。

          3.轉化時(shi),轉(zhuan)化效(xiao)率(lv)與外源(yuan)DNA的(de)濃(nong)度在壹(yi)定(ding)範(fan)圍(wei)內(nei)成(cheng)正比,但(dan)當加(jia)入的(de)外(wai)源(yuan)DNA量(liang)過(guo)多或體積(ji)過(guo)大(da)反而會(hui)降低轉(zhuan)化效(xiao)率(lv)。轉化時(shi)DNA體(ti)積(ji)要小於感(gan)受態細胞體積(ji)的(de)十(shi)分之(zhi)壹(yi)。

          4.轉化率(lv)的(de)計(ji)算(suan):轉化率(lv)=產(chan)生菌(jun)落(luo)的(de)總(zong)數(shu)/鋪(pu)板(ban)DNA總(zong)量(liang)。

          5.為防止(zhi)轉化實(shi)驗(yan)不(bu)成(cheng)功(gong),可(ke)以(yi)保留(liu)部分連接(jie)產物,以(yi)重(zhong)新(xin)轉(zhuan)化,將(jiang)損(sun)失(shi)降到(dao)最(zui)di。

          OmniMAX2-T1Phage Resistant感受態細胞載體 

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          C9228 OmniMAX2-T1 Phage Resistant 感受態細胞  10*100ul

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