是采(cai)用大(da)腸(chang)桿(gan)菌(jun)XL10菌(jun)株經特(te)殊(shu)工藝(yi)處理得到的(de)感受(shou)態(tai)細(xi)胞，可用於(yu)DNA的(de)化學(xue)轉(zhuan)化。
XL10-Gold 感受(shou)態(tai)細(xi)胞 載(zai)體(ti)構建

NobleRyder C9238 XL10-Gold 感受(shou)態(tai)細(xi)胞

產(chan)品貨(huo)號(hao)：C9238

產(chan)品名稱：XL10-Gold 感受(shou)態(tai)細(xi)胞

產(chan)品規格(ge)：20*100ul

XL10-Gold 感受(shou)態(tai)細(xi)胞 載(zai)體(ti)構建

產(chan)品簡(jian)介(jie)：

儲(chu)存條件(jian)：-70℃

具(ju)體(ti)產(chan)品的(de)參數以收到(dao)產(chan)品說明書(shu)的(de)參數為準(zhun)

NobleRyder C9238 XL10-Gold 感受(shou)態(tai)細(xi)胞

是采(cai)用大(da)腸(chang)桿(gan)菌(jun)XL10菌(jun)株經特(te)殊(shu)工藝(yi)處理得到的(de)感受(shou)態(tai)細(xi)胞，可用於(yu)DNA的(de)化學(xue)轉(zhuan)化。適用於(yu)高(gao)效的DNA克隆(long)和(he)質粒擴(kuo)增(zeng)。能保(bao)證(zheng)高(gao)拷(kao)貝質粒的(de)穩(wen)定(ding)復制(zhi)。適合非(fei)甲(jia)基(ji)化DNA的轉(zhuan)化。使(shi)用pUC19質(zhi)粒檢(jian)測(ce)，轉(zhuan)化效率可達108cfu/µg。

基(ji)因型:

TetrΔ(mcrA)183Δ(mcrCB-hsdSMR-mrr)173endA1supE44thi-1recA1gyrA96relA1lacHte[F′proABlacIqZΔM15Tn1 0(Tetr) AmyCamr]

抗(kang)生素(su)耐(nai)藥性(xing)：細(xi)胞具(ju)有四huan素(su)和(he)氯黴(mei)su抗(kang)性(xing)。

操(cao)作方(fang)法：（以(yi)下操作均(jun)按(an)無菌(jun)條件(jian)的標(biao)準(zhun)進(jin)行(xing)）

1. 取(qu)感受(shou)態(tai)細(xi)胞置(zhi)於冰(bing)浴(yu)中(zhong)。

2. 向(xiang)感受(shou)態(tai)細(xi)胞懸(xuan)液(ye)中加入(ru)目的DNA(100μl 的感受(shou)態(tai)細(xi)胞能(neng)夠被1ng超螺(luo)旋質(zhi)粒DNA所(suo)飽(bao)和(he)），輕輕(qing)旋(xuan)轉(zhuan)離心管(guan)以(yi)混勻內(nei)容(rong)物(wu)，在冰(bing)浴(yu)中(zhong)靜置(zhi)30分鐘。

3. 將(jiang)離心管(guan)置(zhi)於42℃水浴中(zhong)放置(zhi)60秒鐘，然後快速(su)將(jiang)管(guan)轉(zhuan)移(yi)到(dao)冰(bing)浴(yu)中(zhong)，使(shi)細(xi)胞冷(leng)卻2分(fen)鐘，該(gai)過(guo)程不(bu)要(yao)搖動(dong)離心管(guan)。

4. 向(xiang)每(mei)個(ge)離心管(guan)中(zhong)加入(ru)500μL無菌(jun)的(de)SOC或LB培養基（不(bu)含(han)抗生素(su)），混勻後(hou)置(zhi)於37℃150rpm，搖床振蕩(dang)培養60分鐘，目的是使(shi)質粒上(shang)相關的(de)抗性(xing)標(biao)記基因表(biao)達(da)，使(shi)菌體(ti)復蘇(su)。

5. 無菌(jun)條件(jian)下，取(qu)適量(liang)菌(jun)液(ye)加到含(han)相應抗(kang)生素(su)的(de)LB固體(ti)培養基平(ping)板上(shang)，用(yong)無菌(jun)的(de)細(xi)菌塗(tu)布(bu)器或玻璃(li)珠將(jiang)細(xi)胞均(jun)勻塗(tu)開。等(deng)平(ping)板中(zhong)的(de)液(ye)體(ti)wan全吸收後(hou)，倒(dao)置(zhi)平板，37℃培養 12-16 小時(shi)。

6. 保(bao)留(liu)剩(sheng)余的菌液(ye)於4℃冰(bing)箱(xiang)中，視平板上(shang)菌(jun)落生長(chang)情況決(jue)定去(qu)留(liu)。

註(zhu)意(yi)事項(xiang)：

1．感受(shou)態(tai)細(xi)胞應(ying)保(bao)存(cun)在(zai)-70℃，不(bu)可反復(fu)凍(dong)融(rong)，否則其轉(zhuan)化效率將(jiang)會降低(di)。

2．實(shi)驗過(guo)程中應(ying)嚴(yan)格(ge)無菌(jun)操(cao)作，防(fang)止(zhi)其它(ta)DNA或雜(za)菌(jun)的(de)汙染(ran)，避免為以後的篩選(xuan)、鑒定帶來(lai)影(ying)響。

3．轉(zhuan)化時，轉(zhuan)化效率與外(wai)源(yuan)DNA的(de)濃(nong)度(du)在壹(yi)定範圍(wei)內(nei)成(cheng)正比(bi)，但當(dang)加入(ru)的外源(yuan)DNA量(liang)過(guo)多(duo)或(huo)體(ti)積(ji)過(guo)大(da)反而(er)會降低(di)轉(zhuan)化效率。轉(zhuan)化時DNA體(ti)積(ji)要小於感受(shou)態(tai)細(xi)胞體(ti)積(ji)的十分之壹(yi)。

4．轉(zhuan)化率的計算(suan)：轉(zhuan)化率＝產(chan)生菌(jun)落的(de)總(zong)數(shu)/鋪(pu)板DNA總(zong)量(liang)。

5．為防(fang)止(zhi)轉(zhuan)化實(shi)驗不(bu)成(cheng)功，可以保(bao)留(liu)部(bu)分(fen)連(lian)接(jie)產(chan)物(wu)，以重(zhong)新轉(zhuan)化，將(jiang)損失(shi)降到最(zui)di。

XL10-Gold 感受(shou)態(tai)細(xi)胞 載(zai)體(ti)構建 

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C9238  XL10-Gold 感受(shou)態(tai)細(xi)胞  20*100ul