SP 試劑盒(he)是(shi)專為免疫組(zu)化和其(qi)他免疫檢(jian)測(ce)而(er)設(she)計的(de)，用以(yi)顯示組(zu)織(zhi)和細(xi)胞(bao)中抗(kang)原(yuan)分布(bu)。鏈黴(mei)親(qin)和素(StreptAvidin)是(shi)壹種從(cong)鏈(lian)黴(mei)菌中提(ti)取的(de)蛋白質，同親(qin)和素壹(yi)樣(yang)，對(dui)生(sheng)wu素有極(ji)gao的(de)親(qin)和力，親(qin)和素是(shi)壹個(ge)堿(jian)性蛋白質(zhi)（PI=10），經改(gai)造(zao)後可(ke)以(yi)轉(zhuan)變(bian)成中性蛋白質(zhi)。鏈黴(mei)親(qin)和素等電點接(jie)近(jin)中性，對組(zu)織(zhi)和細(xi)胞(bao)的(de)非特(te)異(yi)吸附很低(di)，因此(ci)基(ji)於鏈(lian)黴(mei)親(qin)和素的(de)免疫組(zu)化方(fang)法(fa)背(bei)景(jing)很低(di)。
兔SP檢(jian)測試劑盒(he) SP法(fa)

諾(nuo)博(bo)萊(lai)德 兔(tu)SP檢測(ce)試劑盒(he) SP法(fa)

NobleRyder SP8809 兔(tu)SP檢測(ce)試劑盒(he)SP Kit(Rabbit)

產(chan)品貨(huo)號(hao)：SP8809

產(chan)品名稱：兔SP檢測試劑盒(he)SP Kit(Rabbit)

英(ying)文名稱：SP Kit(Rabbit)

產(chan)品規(gui)格(ge)：3ml ; 6ml ; 18ml ; 110ml

產(chan)品簡介(jie)：

別名：兔SP試劑盒(he)/兔(tu)SP免疫組(zu)織(zhi)化學試劑盒(he)/兔(tu)SP超(chao)敏(min)免疫組(zu)化試劑盒(he)

儲(chu)存條件(jian)：-20℃，avoid light，1 year

具(ju)體(ti)產(chan)品的(de)參數以(yi)收(shou)到(dao)產(chan)品說(shuo)明(ming)書的(de)參數為準(zhun)

NobleRyder SP8809 兔(tu)SP檢測(ce)試劑盒(he)SP Kit(Rabbit)適合(he)於壹(yi)抗為(wei)兔(tu)IgG的(de)免疫組(zu)化實驗(yan)DAB顯色(se)。

SP 試劑盒(he)是(shi)專為免疫組(zu)化和其(qi)他免疫檢(jian)測(ce)而(er)設(she)計的(de)，用以(yi)顯示組(zu)織(zhi)和細(xi)胞(bao)中抗(kang)原(yuan)分布(bu)。鏈黴(mei)親(qin)和素(StreptAvidin)是(shi)壹種從(cong)鏈(lian)黴(mei)菌中提(ti)取的(de)蛋白質，同親(qin)和素壹(yi)樣(yang)，對(dui)生(sheng)wu素有極(ji)gao的(de)親(qin)和力，親(qin)和素是(shi)壹個(ge)堿(jian)性蛋白質(zhi)（PI=10），經改(gai)造(zao)後可(ke)以(yi)轉(zhuan)變(bian)成中性蛋白質(zhi)。鏈黴(mei)親(qin)和素等電點接(jie)近(jin)中性，對組(zu)織(zhi)和細(xi)胞(bao)的(de)非特(te)異(yi)吸附很低(di)，因此(ci)基(ji)於鏈(lian)黴(mei)親(qin)和素的(de)免疫組(zu)化方(fang)法(fa)背(bei)景(jing)很低(di)。

操作(zuo)步(bu)驟(zhou):（以(yi)石蠟切片為(wei)例）

1. 切(qie)片常(chang)規脫蠟至水(三次(ci)二甲(jia)苯(ben)，三(san)次乙醇)。

2. 3% H2O2 室(shi)溫(wen)處(chu)理(li)5-10分(fen)鐘以(yi)滅活內源(yuan)性酶。蒸餾水洗3次。

3.可(ke)選(xuan)步(bu)聚：

a、熱(re)修復(fu)抗原(yuan)，將(jiang)切(qie)片浸(jin)入0.01M檸(ning)檬酸(suan)鈉緩沖(chong)液(ye)（PH6.0），電爐(lu)或(huo)微(wei)波(bo)爐加熱(re)至沸騰後(hou)斷(duan)電，間(jian)隔5-10分鐘後，反(fan)復1-2次。冷(leng)卻(que)後(hou)PBS（pH7.2-7.6）洗滌(di)1-2次。

b、酶(mei)消化，滴(di)加消化液，37℃10分鐘，PBS（pH7.2-7.4）洗滌(di)2-3次。

c、跳(tiao)過(guo)此(ci)步(bu)，直接(jie)進入下(xia)壹(yi)步(bu)。

4.  滴(di)加封(feng)閉液(ye)，室(shi)溫(wen)20分鐘。甩(shuai)去(qu)多(duo)余液(ye)體(ti)，免洗。

5.  用(yong)稀(xi)釋(shi)液將(jiang)壹(yi)抗按壹定比例稀(xi)釋(shi)（稀(xi)釋(shi)後的(de)壹抗4℃可(ke)保(bao)存壹周(zhou)），也(ye)可(ke)另(ling)行(xing)購買抗(kang)體(ti)稀(xi)釋(shi)液。滴(di)加稀(xi)釋(shi)的(de)壹抗37℃ 孵(fu)育1小(xiao)時左(zuo)右或(huo)20℃ 2小(xiao)時左(zuo)右，也(ye)可(ke)4℃過(guo)夜。PBS（pH7.2-7.4）洗滌(di)3次，每(mei)次 2 分(fen)鐘。（壹抗(kang)的(de)稀(xi)釋(shi)度(du)、孵(fu)育時間和溫(wen)度(du)與(yu)染色(se)強(qiang)度(du)、背(bei)景(jing)有直接(jie)關(guan)系(xi)。壹(yi)般(ban)來說(shuo)，陽(yang)性染色(se)強(qiang)度(du)不(bu)夠(gou)時，可(ke)提(ti)高壹抗(kang)濃度(du)和延長孵(fu)育時間；背(bei)景(jing)過(guo)高時，可(ke)降(jiang)低(di)壹抗(kang)濃度(du)和縮短孵(fu)育時間。）

6． 根據(ju)用量，用(yong)稀(xi)釋(shi)液將(jiang)Bio-羊抗兔(tu)IgG濃縮液(ye)按1:100稀(xi)釋(shi)成工(gong)作(zuo)液(1ml稀(xi)釋(shi)液加(jia)入10ul Bio-羊抗兔(tu)IgG濃縮液(ye)混勻(yun)，此(ci)工作(zuo)液4℃可(ke)保(bao)存壹周(zhou))。滴(di)加Bio-羊抗兔(tu)IgG工(gong)作液，20-37℃ 孵(fu)育30分鐘。PBS（pH7.2-7.4）洗滌(di)3次，每(mei)次2分(fen)鐘。

7．根據(ju)使用(yong)量，用(yong)稀(xi)釋(shi)液將(jiang)鏈(lian)酶親(qin)和素-POD 濃縮液(ye)按 1:100 稀(xi)釋(shi)成工(gong)作(zuo)液(1ml 稀(xi)釋(shi)液加(jia)入 10ul

鏈(lian)酶親(qin)和素-POD濃縮液(ye)混勻(yun)，此(ci)工作(zuo)液4℃可(ke)保(bao)存壹周(zhou))。滴(di)加鏈酶親(qin)和素-POD工(gong)作液(ye)，20-37℃，

30 分(fen)鐘。PBS （pH7.2-7.4）洗滌(di)4次，每(mei)次5分(fen)鐘。

8．DAB顯(xian)色(se)：根據(ju)用量，用(yong)PBS（pH7.2-7.4）配(pei)制(zhi)，按1ml PBS加入50ul 20×DAB顯(xian)色(se)液(ye)A，加入50ul 20×DAB 顯(xian)色(se)液(ye)B 。充(chong)分(fen)混(hun)勻(yun)後滴(di)加到切片上(shang)。室(shi)溫(wen)顯色(se)，鏡(jing)下控制(zhi)反應時間，壹般(ban)在(zai)5-30分(fen)鐘之間(jian)。蒸餾水洗滌(di)終止反(fan)應(ying)。

9．蘇(su)木素(su)輕(qing)度(du)復(fu)染。脫水，透(tou)明(ming)，封(feng)片。顯(xian)微鏡(jing)觀察。

對(dui)於細(xi)胞(bao)爬(pa)片，固(gu)定(ding)後，PBS漂洗兩(liang)次，再用0.5% Triton X-100室(shi)溫(wen)孵(fu)育20分鐘，PBS漂洗兩(liang)次，3% H2O2處(chu)理(li)15分(fen)鐘；PBS漂洗兩(liang)次，接上(shang)述第(di)4步(bu)。

對(dui)於冰(bing)凍(dong)切片(pian)，固(gu)定(ding)後，PBS漂洗兩(liang)次，接上(shang)述第(di)二步(bu)。

註(zhu)意(yi)事項：

如(ru)果染(ran)色(se)背(bei)景(jing)過(guo)高，在(zai)SP反(fan)應(ying)之後(hou)，DAB顯(xian)色(se)之前(qian)，用(yong)加(jia)有0.01—0.02% TWEEN-20的(de)PBST（pH7.2-7.4）洗滌(di)切片(pian)4次，PBS洗2次，然(ran)後DAB顯(xian)色(se)。

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