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| 品(pin)牌(pai) | NobleRyder/諾博萊德(de) | 貨(huo)號 | M0128 |
|---|---|---|---|
| 規(gui)格(ge) | 5mL/100ml | 供(gong)貨(huo)周期 | 現(xian)貨(huo) |
| 主要(yao)用(yong)途(tu) | 壹(yi)種(zhong)弱陰離子(zi)交(jiao)換(huan)磁珠,具有快(kuai)速的磁響應性(xing)豐(feng)富(fu)的離子(zi)交(jiao)換(huan)能力和ji高(gao)的蛋白(bai)結(jie)合(he)能力 | 應用(yong)領域(yu) | 環保,化工(gong),生物產業(ye),農(nong)林(lin)牧(mu)漁(yu),制藥(yao)/生物制藥(yao) |
NobleRyderM0128 DEAE磁珠 Magrose DEAE
DEAE磁珠 Magrose DEAE 蛋白(bai)純化磁珠
產品貨(huo)號:M0128
產品名稱(cheng):DEAE磁珠 Magrose DEAE
產品規格(ge):5mL/100ml
產品簡介(jie):
具(ju)體(ti)產品的參數以(yi)收(shou)到(dao)產品說(shuo)明(ming)書(shu)的參數為準(zhun)
NobleRyderM0128 DEAE磁珠 Magrose DEAE
NobleRyderM0128 DEAE磁珠 Magrose DEAE是壹(yi)種(zhong)弱陰離子(zi)交(jiao)換(huan)磁珠,具有快(kuai)速的磁響應性(xing)、豐(feng)富(fu)的離子(zi)交(jiao)換(huan)能力和ji高(gao)的蛋白(bai)結(jie)合(he)能力。離子(zi)交(jiao)換(huan)配基為(wei)二乙an乙基(diethylaminoethyl,DEAE),該(gai)配基在(zai) pH3-12的工作(zuo)範(fan)圍(wei)內(nei)仍(reng)然(ran)能夠保持(chi)穩定的高(gao)蛋白(bai)結(jie)合(he)能力。
與(yu)傳統柱層析純化方(fang)式(shi)相(xiang)比(bi),MagroseDEAE 磁珠無需(xu)對(dui)粗蛋白(bai)樣(yang)品(pin)進行(xing)預(yu)處(chu)理(如:反復(fu)繁(fan)瑣(suo)的離心(xin),費(fei)時費(fei)力的過濾操作(zuo)),此(ci)外(wai),無需(xu)控(kong)制流(liu)速(su)及(ji)柱壓,不需要昂(ang)貴(gui)的層析(xi)設(she)備。對(dui)於熟(shu)練的操作(zuo)者(zhe)來(lai)說(shuo),在很(hen)短時間(jian)內就(jiu)能(neng)完(wan)成高(gao)純度目(mu)的蛋白(bai)的提取(qu),且能輕松實(shi)現(xian)多個(ge)樣(yang)品(pin)的平行(xing)處(chu)理,實(shi)現(xian)高(gao)通(tong)量(liang)的蛋白(bai)純化。
產品優勢(shi)
1. 磁響應速度快(kuai),減少(shao)操作(zuo)時間(jian)
2. 磁珠具有良好(hao)的分(fen)散(san)性(xing)和重懸性(xing),提(ti)高(gao)操作(zuo)的便捷(jie)性(xing)
3. 配基具(ju)有良好(hao)的物理化學(xue)穩定性(xing),提(ti)高(gao)了實(shi)驗結(jie)果的可(ke)靠(kao)性(xing)及(ji)可(ke)重復(fu)性(xing)
操作(zuo)流(liu)程(cheng)(以(yi)純(chun)化含(han) BSA 蛋白(bai)樣(yang)品(pin)為(wei)例)
1. 磁珠預處(chu)理(平(ping)衡):將(jiang)MagroseDEAE 磁珠漩(xuan)渦(wo)振蕩(dang) 30s,使磁珠充分(fen)重懸;取壹(yi)定量(liang)的 10%(v/v)磁珠懸液置於 50mL 離心(xin)管中。對(dui)磁珠懸液進行(xing)磁性(xing)分(fen)離,棄(qi)上(shang)清(qing)液(ye),加入(ru) 20mL 平(ping)衡緩沖(chong)液(ye)洗(xi)滌磁珠 3 次(ci),每(mei)次(ci)垂(chui)直(zhi)混(hun)合(he)2min。
註(zhu):為(wei)了獲得目(mu)標(biao)蛋(dan)白(bai)的最(zui)大回(hui)收(shou)率(lv),實(shi)驗者需(xu)要(yao)加入(ru)過量(liang)的MagroseDEAE磁珠,壹(yi)般(ban)大於(yu)蛋白(bai)結(jie)合(he)量(liang)的20%即可(ke)。對(dui)於含較(jiao)低豐(feng)度目(mu)標(biao)蛋(dan)白(bai)的樣(yang)品(pin)中(zhong),磁珠對(dui)目(mu)標(biao)蛋(dan)白(bai)的回(hui)收(shou)率(lv)會(hui)有(you)所(suo)降低,因此(ci)需(xu)要繼(ji)續(xu)增(zeng)大(da)磁珠的用(yong)量(liang);
2. 蛋(dan)白(bai)吸(xi)附(fu):將(jiang)預處(chu)理的磁珠加入(ru)含(han) BSA 蛋白(bai)的樣(yang)品(pin)溶(rong)液中,漩(xuan)渦(wo)振蕩(dang) 30s,置於垂直混(hun)合(he)儀(yi)混勻30~60min,使樣(yang)品(pin)和磁珠充分(fen)接觸並(bing)吸(xi)附(fu),然(ran)後進行(xing)磁性(xing)分(fen)離,移(yi)棄(qi)上(shang)清(qing)液(ye)。
註(zhu):為(wei)了更(geng)有(you)效(xiao)率(lv)的吸(xi)附(fu)結(jie)合(he)物質(zhi),平(ping)衡緩沖(chong)液(ye)最(zui)好(hao)含(han)有較(jiao)低的離子(zi)強度,選擇(ze)的 pH 值(zhi)應(ying)該(gai)至少(shao)與(yu)目(mu)標(biao)蛋(dan)白(bai)的等電點(dian)相差(cha)壹(yi)個 pH 單位,選(xuan)定的鹽緩沖(chong)液(ye) pH 波(bo)動在(zai) 0.5pH 以(yi)內(nei)。目(mu)標(biao)蛋(dan)白(bai)與(yu)磁珠的吸(xi)附(fu)時間(jian)與(yu)蛋白(bai)的本(ben)身屬(shu)性(xing)有(you)關(guan)
3.磁珠洗(xi)滌:加入(ru) 20mL 的平衡緩沖(chong)液(ye),漩(xuan)渦(wo)振蕩(dang)重懸磁珠 30s 後進行(xing)磁性(xing)分(fen)離,移(yi)棄(qi)上(shang)清(qing)液(ye);
該(gai)操作(zuo)重復(fu) 3 次(ci)。
4.蛋(dan)白(bai)洗(xi)脫:在(zai)上(shang)述完(wan)成磁珠洗(xi)滌的離心(xin)管中加入(ru)適(shi)量(liang)的洗(xi)脫液(ye)進行(xing)蛋(dan)白(bai)洗(xi)脫。用(yong)移(yi)液(ye)器(qi)吹(chui)打或者渦(wo)旋(xuan)振蕩(dang)下(xia)迅(xun)速(su)重懸,然(ran)後將(jiang)離心(xin)管置於垂直混(hun)合(he)儀(yi)混勻 10~15min 後進行(xing)磁性(xing)分(fen)離,收(shou)集(ji)上(shang)清(qing)液(ye)至(zhi)新(xin)的離心(xin)管中。洗(xi)脫方(fang)式(shi)主(zhu)要(yao)有(you)高(gao)鹽濃(nong)度洗(xi)脫(含(han)1-2M的NaCl的平衡緩沖(chong)液(ye))和低(di)pH 洗(xi)脫(選(xuan)擇(ze)低(di)於目(mu)標(biao)蛋(dan)白(bai)等電點(dian)的pH範(fan)圍(wei)即(ji)可(ke))兩(liang)種(zhong)。
5. 磁珠再生:壹(yi)般(ban)采用(yong)2MNaCl溶(rong)液(ye)洗(xi)滌3~5 次(ci),然(ran)後用(yong)平(ping)衡緩沖(chong)液(ye)進行(xing)再平(ping)衡處(chu)理。磁珠多次(ci)使用(yong)後會(hui)有沈(chen)澱(dian)蛋白(bai)、強疏(shu)水性(xing)蛋(dan)白(bai)、脂(zhi)蛋白(bai)等雜(za)質(zhi)非(fei)特(te)異性(xing)吸(xi)附(fu)到(dao)磁珠上(shang),為(wei)了(le)保(bao)證磁珠的使用(yong)效(xiao)率(lv),建議(yi)進行(xing)在(zai)位(wei)清(qing)洗(xi)(CIP)。
6. 在(zai)位(wei)清(qing)洗(xi)(CIP):依次(ci)采(cai)用(yong)1.0MNaOH、70%乙(yi)醇(chun)或 30%異丙醇(chun)、純化水洗(xi)滌磁珠2次(ci);最(zui)後加入(ru)20%乙(yi)醇重懸磁珠,置於2~8℃保存(cun)。
註(zhu)意(yi)事(shi)項
1. 本(ben)產品不宜冷(leng)凍、幹(gan)燥(zao)或離心(xin)操作(zuo)。冷(leng)凍、幹(gan)燥(zao)和離心(xin)等(deng)操作(zuo)會(hui)引(yin)起(qi)磁珠團聚,不易(yi)於(yu)重懸和
分(fen)散(san),並(bing)且影(ying)響磁珠表面功(gong)能基團(tuan)的化學(xue)活性(xing)。
2. 在(zai)使用(yong)本(ben)產品前,請務必(bi)充分(fen)振蕩(dang)或超聲使磁珠保持均(jun)勻的懸浮(fu)狀(zhuang)態。
3. 使用(yong)過程中可(ke)根(gen)據需(xu)求,用(yong)純(chun)化水或緩沖(chong)液(ye)磁吸(xi)洗(xi)滌磁珠2~3 次(ci),以(yi)去(qu)除(chu)保存(cun)液中(zhong)乙醇。
4. 本(ben)產品需與(yu)磁性(xing)分(fen)離設(she)備配套(tao)使用(yong)。
5. 鹽濃(nong)度與(yu)pH值(zhi)均(jun)會(hui)影(ying)響特(te)異性(xing)蛋(dan)白(bai)的結(jie)合(he)與(yu)洗(xi)脫,客(ke)戶(hu)需自(zi)行(xing)摸(mo)索(suo)不同蛋白(bai)的結(jie)合(he)和洗(xi)脫條件(jian),以(yi)保(bao)證(zheng)蛋(dan)白(bai)純化量(liang)和純(chun)度。
6. 本(ben)產品僅供研(yan)究(jiu)使用(yong)。
DEAE磁珠 Magrose DEAE 蛋白(bai)純化磁珠
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M0128 DEAE磁珠 Magrose DEAE 5mL/100ml