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| 品(pin)牌 | NobleRyder/諾(nuo)博(bo)萊(lai)德(de) | 貨號 | CA9921 |
|---|---|---|---|
| 規格(ge) | 10ml | 供貨周(zhou)期(qi) | 現貨 |
| 主要(yao)用(yong)途 | 可(ke)以(yi)標記(ji)DNA、RNA,屬於異染性(xing)熒(ying)光染料(liao)。該染料(liao)具(ju)有(you)膜通透(tou)性(xing),能(neng)透(tou)過細(xi)胞(bao)膜 | 應用(yong)領域 | 環(huan)保(bao),化工,生物(wu)產(chan)業(ye),農林牧(mu)漁(yu),制(zhi)藥(yao)/生(sheng)物制藥 |
NobleRyderCA9921 AO染色液(1mg/ml)AO Stain Solution
產(chan)品貨號:CA9921
產(chan)品名(ming)稱:AO染色液(1mg/ml)AO Stain Solution
英文(wen)名(ming)稱:AO Stain Solution
產(chan)品規格(ge):10ml
AO染色液1mg/ml 細(xi)胞(bao)雕(diao)亡
產(chan)品簡(jian)介:
儲存條(tiao)件(jian):2-8℃,避(bi)光,有(you)效(xiao)期(qi)6個月。
具(ju)體(ti)產(chan)品的(de)參數以(yi)收到產(chan)品說明(ming)書的(de)參數為準(zhun)
NobleRyderCA9921 AO染色液(1mg/ml)AO Stain Solution屬於三環(huan)雜(za)芳香燃料(liao),可以(yi)標記(ji)DNA、RNA,屬於異染性(xing)熒(ying)光染料(liao)。該染料(liao)具(ju)有(you)膜通透(tou)性(xing),能(neng)透(tou)過細(xi)胞(bao)膜,使核DNA和(he)RNA染色。因(yin)此AOchang用(yong)於細(xi)胞(bao)內DNA和(he)RNA進行(xing)檢測(ce)。AO與核酸(suan)結合方式主要(yao)有(you):1、插(cha)入性(xing)結合,AO嵌入核酸(suan)雙鏈(lian)的(de)堿基對(dui)之(zhi)間,這種(zhong)結合方式主要(yao)為AO與DNA的(de)結合,其熒(ying)光發(fa)射(she)峰為530nm,激發後(hou)呈(cheng)綠色(se)熒(ying)光;2、靜電吸引(yin),帶正(zheng)電荷的(de)AO與單(dan)鏈核酸(suan)的(de)磷(lin)酸(suan)根(帶負電荷)產(chan)生靜電間的(de)吸引(yin)結合,這種(zhong)結合方式主要(yao)為AO與RNA的(de)結合,其熒(ying)光
發射峰為640nm,激發後(hou)呈(cheng)紅色熒(ying)光,少量結合會呈(cheng)桔黃色或(huo)桔(ju)紅色(se)熒(ying)光。因(yin)此,AO嵌(qian)合到雙鏈(lian)DNA分(fen)子(zi)中顯(xian)綠色(se),與DNA單(dan)鏈或(huo)RNA結合時發(fa)桔黃色或(huo)橙紅(hong)色(se)熒(ying)光。
AO染色液(1mg/ml)為儲存液,使用時(shi)應稀(xi)釋(shi)到合適(shi)濃度(du)後(hou)使用。染色後(hou)在(zai)熒(ying)光顯(xian)微(wei)鏡(jing)下(xia)觀(guan)察,AO可(ke)透(tou)過正(zheng)常(chang)細(xi)胞(bao)膜,使細(xi)胞(bao)核呈(cheng)綠色(se)或黃綠色(se)均(jun)勻(yun)熒(ying)光;而(er)在(zai)雕亡細(xi)胞(bao)中(zhong),因(yin)染色質固縮(suo)或(huo)斷裂(lie)為大小不(bu)等的(de)片斷(duan),形成雕(diao)亡(wang)小體(ti)。AO使其染上致(zhi)密(mi)濃染的(de)黃綠色(se)熒(ying)光或(huo)黃綠色(se)碎片(pian)顆粒;而(er)壞(huai)死細(xi)胞(bao)黃熒(ying)光減(jian)弱(ruo)甚至(zhi)消(xiao)失(shi)。AO染色常(chang)與(yu)EB染色合用雙染,因(yin)EB只(zhi)染死細(xi)胞(bao)使之(zhi)產(chan)生桔黃色熒(ying)光,由(you)此(ci)可區(qu)分(fen)出正(zheng)常(chang)細(xi)胞(bao)、雕(diao)亡細(xi)胞(bao)及壞(huai)死細(xi)胞(bao)。
自備材(cai)料(liao):
1、熒(ying)光顯(xian)微(wei)鏡(jing)
2、低(di)速(su)離(li)心(xin)機
3、PBS
4、細(xi)胞(bao)計(ji)數板
5、載玻片、蓋(gai)玻(bo)片
操作(zuo)步(bu)驟(zhou)(僅(jin)供參考(kao)):
1、收集細(xi)胞(bao)(采(cai)用流式(shi)細(xi)胞(bao)儀(yi)檢測時,應(ying)先(xian)固(gu)定細(xi)胞(bao)),用(yong)PBS清洗(xi)細(xi)胞(bao)1次(ci),計數(shu)並(bing)調節(jie)細(xi)胞(bao)濃度(du)至(zhi)106/ml。
2、取適(shi)量的(de)細(xi)胞(bao)懸(xuan)液,加入AcridineOrangeStain(1mg/ml),使AO終濃度(du)為8.5~17μg/ml,輕輕(qing)混(hun)勻。
3、室(shi)溫避(bi)光染色15~20min,滴(di)加於載玻片上(shang)並(bing)加蓋(gai)玻(bo)片或上流式(shi)細(xi)胞(bao)儀(yi)分(fen)析(xi)。
4、熒(ying)光顯(xian)微(wei)鏡(jing)下(xia)觀(guan)察(激發濾(lv)光片(pian)波(bo)長(chang)488nm,阻(zu)斷濾(lv)光片(pian)波(bo)長(chang)515nm),計(ji)數(shu)並(bing)拍(pai)照(zhao)。
染色結果(guo)
正(zheng)常(chang)細(xi)胞(bao):細(xi)胞(bao)被均(jun)勻(yun)染成黃綠色(se)熒(ying)光
雕亡細(xi)胞(bao):染色質濃縮(suo),細(xi)胞(bao)核碎(sui)裂(lie)成點狀(zhuang),被染成大小不(bu)壹(yi)、致(zhi)密(mi)濃染的(de)綠色(se)顆粒
註意(yi)事(shi)項(xiang):
1、Acridine Orange Stain(1mg/ml)不含破(po)膜劑,較少單(dan)獨使用。
2、AO常與EB染色合用,可(ke)區(qu)分(fen)出正(zheng)常(chang)細(xi)胞(bao)、雕(diao)亡細(xi)胞(bao)及壞(huai)死細(xi)胞(bao)。
3、如(ru)有(you)低(di)溫離(li)心(xin)機進行(xing)離(li)心(xin)效(xiao)果(guo)更(geng)佳(jia)。
4、操作(zuo)過(guo)程中應註意(yi)減(jian)少試劑暴(bao)露於強光下(xia)的(de)時間。
5、試劑有(you)壹(yi)定毒(du)性(xing),請(qing)小(xiao)心(xin)操作(zuo)。
6、為了您的(de)安全(quan)和健(jian)康,請穿實(shi)驗服並(bing)戴(dai)壹(yi)次(ci)性(xing)手套操作(zuo)。
AO染色液1mg/ml 細(xi)胞(bao)雕(diao)亡
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CA9921 AO染色液(1mg/ml)AO Stain Solution 10ml