潮黴素B（Hygromycin B）是由(you)吸(xi)水鏈(lian)黴菌(jun)（Streptomyces hygroscopicus）代(dai)謝產(chan)生(sheng)的(de)壹(yi)種氨(an)基糖苷(gan)類(lei)抗(kang)生(sheng)素(su)，通(tong)過幹擾70S核糖體易位和誘(you)導對mRNA模(mo)板(ban)的(de)錯讀(du)而(er)抑制(zhi)蛋(dan)白合(he)成(cheng)，從(cong)而(er)殺(sha)死(si)原核（如(ru)細菌(jun)）、真(zhen)核（如(ru)酵(jiao)母菌(jun)，真(zhen)菌(jun)）和(he)高(gao)等(deng)哺乳動(dong)物(wu)真(zhen)核細胞(bao)。
潮黴素B液體(ti) 農(nong)桿(gan)菌(jun)培(pei)養(yang)

NobleRyder H6868 潮黴素B（液體(ti)）；Hygromix ； O-6-Amino-6-deoxy-L-glycero-D-galactoh e p t o p y r a n o s y l i d e ne-(1-2-3)-O-β-Dtalopyranosyl- (1-5)-2-deoxy -N3-methyl-D-streptamine，潮(chao)黴素B溶液(ye) 潮(chao)黴素B85+% 潮黴素B98+% 濕黴素乙 效(xiao)高(gao)素(su)；Hygromycin B

產品貨(huo)號：H6868

產品名(ming)稱：潮(chao)黴素B（液體(ti)）；Hygromix ； O-6-Amino-6-deoxy-L-glycero-D-galactoh e p t o p y r a n o s y l i d e ne-(1-2-3)-O-β-Dtalopyranosyl- (1-5)-2-deoxy -N3-methyl-D-streptamine，潮(chao)黴素B溶液(ye) 潮(chao)黴素B85+% 潮黴素B98+% 濕黴素乙 效(xiao)高(gao)素(su)；Hygromycin B

產品規格(ge)：10ml （1g）

潮黴素B液體(ti) 農(nong)桿(gan)菌(jun)培(pei)養(yang)

產品簡(jian)介：

別(bie)名：Hygromix ； O-6-Amino-6-deoxy-L-glycero-D-galactoh e p t o p y r a n o s y l i d e ne-(1-2-3)-O-β-Dtalopyranosyl- (1-5)-2-deoxy -N3-methyl-D-streptamine，潮(chao)黴素B溶液(ye) 潮(chao)黴素B85+% 潮黴素B98+% 濕黴素乙 效(xiao)高(gao)素(su)

英文(wen)名稱：Hygromycin B

CAS：31282-04-9

分子(zi)式(shi)：C₂₀H₃₇N₃O₁₃

分子(zi)量(liang)：527.52

儲存(cun)條件(jian)：2-8℃，有(you)效期(qi)4年

規格(ge)：10ml （1g）

外觀(guan)(性(xing)狀(zhuang))：液體(ti)

酶(mei)活(huo)/效(xiao)價：POTENCY:1100units/mg

濃度：100mg/mL

具體產(chan)品的(de)參(can)數(shu)以收(shou)到(dao)產品說(shuo)明書的(de)參(can)數(shu)為準

NobleRyder H6868 潮黴素B（液體(ti)）；Hygromix ； O-6-Amino-6-deoxy-L-glycero-D-galactoh e p t o p y r a n o s y l i d e ne-(1-2-3)-O-β-Dtalopyranosyl- (1-5)-2-deoxy -N3-methyl-D-streptamine，潮(chao)黴素B溶液(ye) 潮(chao)黴素B85+% 潮黴素B98+% 濕黴素乙 效(xiao)高(gao)素(su)；Hygromycin B

產品介紹(shao)

蛋(dan)白質(zhi)合成(cheng)抑制(zhi)劑(ji)，可(ke)用於植(zhi)物(wu)細胞(bao)培(pei)養(yang)等(deng)生(sheng)化研究。

潮黴素B（Hygromycin B）是由(you)吸(xi)水鏈(lian)黴菌(jun)（Streptomyces hygroscopicus）代(dai)謝產(chan)生(sheng)的(de)壹(yi)種氨(an)基糖苷(gan)類(lei)抗(kang)生(sheng)素(su)，通(tong)過幹擾70S核糖體易位和誘(you)導對mRNA模(mo)板(ban)的(de)錯讀(du)而(er)抑制(zhi)蛋(dan)白合(he)成(cheng)，從(cong)而(er)殺(sha)死(si)原核（如(ru)細菌(jun)）、真(zhen)核（如(ru)酵(jiao)母菌(jun)，真(zhen)菌(jun)）和(he)高(gao)等(deng)哺乳動(dong)物(wu)真(zhen)核細胞(bao)。

大腸桿菌(jun)（ Escherichia coli.）來源的(de)潮黴素抗性(xing)基(ji)因(yin)（hyg或(huo)hph），編碼潮(chao)黴素B磷酸(suan)轉移(yi)酶(mei)，將(jiang)潮黴素B轉化(hua)成不具有(you)生物(wu)活(huo)性(xing)的(de)磷酸(suan)化產物(wu)，從(cong)而(er)起到(dao)解(jie)毒(du)作(zuo)用。針對這壹(yi)原理，潮黴素B是壹(yi)種非常有(you)用的(de)選擇(ze)性(xing)標(biao)記，用來篩(shai)選(xuan)和(he)維(wei)持培養(yang)成(cheng)功轉染潮黴素抗性(xing)基(ji)因(yin)的(de)原核或(huo)者(zhe)真(zhen)核細胞(bao)。另外，由於作用模(mo)式(shi)的(de)差(cha)異(yi)，常(chang)與(yu)G418，Zeocin和Blasticidin S聯合使用進(jin)行(xing)雙(shuang)抗(kang)性(xing)陽(yang)性(xing)細(xi)胞株的(de)選擇(ze)。潮黴素B還能(neng)用作(zuo)抗(kang)病毒(du)劑(ji)，因(yin)其選擇(ze)性(xing)滲(shen)透(tou)進入因(yin)病毒(du)感染增強通(tong)透(tou)性(xing)的(de)細胞(bao)，且具有(you)抑制(zhi)翻(fan)譯(yi)的(de)功效(xiao)。還可(ke)混(hun)合(he)入動物(wu)飼料中(zhong)起(qi)到(dao)驅蟲(chong)功能(neng)。

本品是(shi)無菌(jun)的(de)潮黴素B溶液(ye)（100mg/ml），可(ke)直(zhi)接(jie)用培(pei)養(yang)液(ye)稀釋使用。

使用方法

1.  常用篩(shai)選(xuan)濃度

註意：潮黴素B用來篩(shai)選(xuan)穩(wen)轉株的(de)工(gong)作(zuo)濃(nong)度需(xu)要(yao)根據(ju)細胞(bao)類(lei)型(xing)，培養(yang)基(ji)，生長條件(jian)和(he)細胞(bao)代(dai)謝率(lv)而(er)變化(hua)，推(tui)薦使用濃(nong)度為50-1000μg/mL。對於第壹(yi)次使用的(de)實驗體系(xi)建(jian)議通(tong)過建立殺(sha)滅(mie)曲(qu)線(xian)（kill curve），即(ji)劑(ji)量反(fan)應性(xing)曲(qu)線(xian)，來確定最(zui)佳(jia)篩(shai)選濃(nong)度。

壹(yi)般而(er)言，哺乳動(dong)物(wu)細胞(bao)50-500μg/mL；細(xi)菌(jun)/植(zhi)物(wu)細胞(bao)20-200μg/mL；真(zhen)菌(jun)300-1000μg/mL。

2. 殺(sha)滅(mie)曲(qu)線(xian)的(de)建立(li)

註意：為了(le)篩選(xuan)得(de)到(dao)穩(wen)定表達(da)目(mu)的(de)蛋(dan)白的(de)細胞(bao)株，需(xu)要(yao)確定能(neng)夠(gou)殺(sha)死(si)未(wei)轉染宿主(zhu)細(xi)胞的(de)抗生(sheng)素最(zui)di濃(nong)度，可(ke)通(tong)過建立殺(sha)滅(mie)曲(qu)線(xian)（劑(ji)量(liang)反(fan)應曲(qu)線(xian)）來實現(xian)，至少選(xuan)擇5個(ge)濃度。

1）  第壹(yi)天：未轉化(hua)的(de)細胞(bao)按照20-25%的(de)細胞(bao)密度鋪(pu)在(zai)合適(shi)的(de)培養(yang)板(ban)上，37℃，CO2培養(yang)過夜；註：對於需要(yao)更高(gao)密(mi)度來檢(jian)測(ce)活(huo)力(li)的(de)細胞(bao)，可(ke)增(zeng)加(jia)接(jie)種量。

2）  根據(ju)細胞(bao)類(lei)型(xing)，設定合適(shi)範(fan)圍(wei)內(nei)的(de)濃度梯(ti)度。以(yi)哺乳動(dong)物(wu)細胞(bao)為例(li)，可(ke)設(she)定(ding)50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去(qu)離(li)子(zi)水或(huo)者(zhe)PBS buffer按照1:10的(de)比例(li)將(jiang)母液稀釋到(dao)5 mg/ml，然(ran)後(hou)按照下表(biao)稀釋到(dao)相應濃度的(de)工(gong)作(zuo)液(ye)。

3）  第二天：替換舊的(de)培養(yang)基(ji)，換用新鮮(xian)配(pei)制(zhi)的(de)含有(you)相應濃度藥物(wu)的(de)培養(yang)基(ji)。每個(ge)濃度做(zuo)三個(ge)平行(xing)孔(kong)。

4）  接(jie)下來每(mei)3-4天更換新的(de)含藥物(wu)培養(yang)基(ji)。

5）按照固定的(de)周期(qi)（如(ru)每2天）進行(xing)活(huo)細(xi)胞計數來確定阻(zu)止未(wei)轉染細胞(bao)生(sheng)長的(de)恰當(dang)濃(nong)度。選(xuan)擇在(zai)理想(xiang)的(de)天數（通常是(shi)7-10天）內(nei)能(neng)夠(gou)殺(sha)死(si)絕(jue)大(da)多數細(xi)胞的(de)最(zui)di濃(nong)度為穩(wen)定轉染細胞(bao)篩(shai)選用的(de)工(gong)作(zuo)濃(nong)度。

3. 穩(wen)定轉染細胞(bao)的(de)篩選(xuan)

1）轉染48h後，用含(han)有(you)適(shi)當(dang)濃(nong)度的(de)潮黴素B篩選(xuan)培(pei)養(yang)基(ji)來傳代(dai)細胞(bao)（直接(jie)傳代(dai)或(huo)者(zhe)稀釋後傳代(dai)）。

註意：細胞處於活(huo)躍分裂(lie)狀(zhuang)態時抗(kang)生素(su)的(de)殺(sha)傷效guo最(zui)hao。則當細(xi)胞過於稠密，其效率(lv)會(hui)降(jiang)低(di)。為了(le)得到(dao)較好的(de)篩選(xuan)xiao果(guo)，最(zui)好將(jiang)細胞(bao)稀釋至豐度不超(chao)過25%。

2）每隔(ge)3-4天更換含有(you)藥物(wu)的(de)篩選(xuan)培養(yang)液(ye)。

3）篩選7天後觀(guan)察(cha)並評(ping)估(gu)細胞(bao)克隆(long)（集落）的(de)形成(cheng)情(qing)況。集落的(de)形成(cheng)可(ke)能(neng)還需要(yao)壹(yi)周或(huo)者(zhe)更(geng)多的(de)時間，這取(qu)決(jue)於宿主細(xi)胞類(lei)型(xing)，轉染，以及(ji)篩(shai)選(xuan)效(xiao)果(guo)。

4） 挑取(qu)並轉移(yi)5-10個(ge)抗性(xing)克隆(long)於35mm細胞培(pei)養(yang)板(ban)，繼續用含(han)藥物(wu)的(de)篩選(xuan)培養(yang)液(ye)維持培養(yang)7天。

5） 之後更換正(zheng)常培(pei)養(yang)基(ji)培養(yang)即(ji)可(ke)。

註意事項

1） 潮黴素B的(de)抗性(xing)基(ji)因(yin)（hyg或(huo)hph）除(chu)了(le)來自(zi)E. Coli.之外，還發現(xian)於其他的(de)菌(jun)株，包(bao)括(kuo)Streptomyces hygroscopicus和(he)Klebsiella pneumoniae。

2） 本品為有(you)毒(du)化(hua)合(he)物(wu)，避免(mian)與(yu)皮膚(fu)和眼睛接(jie)觸，請(qing)小(xiao)心操(cao)作。

3） 為了(le)您(nin)的(de)安全(quan)和健(jian)康，請(qing)穿(chuan)實驗服並(bing)戴壹(yi)次性(xing)手套(tao)操(cao)作。

潮黴素B液體(ti) 農(nong)桿(gan)菌(jun)培(pei)養(yang) 

產品訂(ding)購信息：

NobleRyder H6868 潮黴素B（液體(ti)）；Hygromix ； O-6-Amino-6-deoxy-L-glycero-D-galactoh e p t o p y r a n o s y l i d e ne-(1-2-3)-O-β-Dtalopyranosyl- (1-5)-2-deoxy -N3-methyl-D-streptamine，潮(chao)黴素B溶液(ye) 潮(chao)黴素B85+% 潮黴素B98+% 濕黴素乙 效(xiao)高(gao)素(su)；Hygromycin B 10ml （1g）