β-巰基(ji)還原劑，蛋(dan)白(bai)酶(mei)抑(yi)制劑（100×），PMSF（100X）這(zhe)幾(ji)個(ge)試劑(ji)使用前(qian)先用(yong)掌(zhang)上離(li)心(xin)機(ji)進(jin)行(xing)離(li)心(xin)。
酵(jiao)母(mu)總蛋(dan)白(bai)提(ti)取(qu)試劑(ji)盒-常(chang)備(bei)現貨(huo)

NobleRyder BC1568 酵(jiao)母總(zong)蛋(dan)白(bai)提(ti)取(qu)試劑(ji)盒

產品貨號：BC1568

產品名稱(cheng)：酵(jiao)母總蛋(dan)白(bai)提(ti)取(qu)試劑(ji)盒

產品規(gui)格：50T/100T

酵(jiao)母總(zong)蛋(dan)白(bai)提(ti)取(qu)試劑(ji)盒-常(chang)備(bei)現貨(huo)

產品簡介：

中(zhong)文名稱(cheng)：酵(jiao)母總蛋(dan)白(bai)提(ti)取(qu)試劑(ji)盒

規(gui)格：50T ; 100T

儲(chu)存(cun)條件：-20℃，avoid light，1 year

具(ju)體產品的參數(shu)以收(shou)到(dao)產品說明書的參數(shu)為準(zhun)

NobleRyder BC1568 酵(jiao)母總(zong)蛋(dan)白(bai)提(ti)取(qu)試劑(ji)盒

產品介紹

操(cao)作步(bu)驟（僅(jin)供參考(kao)）：

註：β-巰基(ji)還原劑，蛋(dan)白(bai)酶(mei)抑(yi)制劑（100×），PMSF（100X）這(zhe)幾(ji)個(ge)試劑(ji)使用前(qian)先用(yong)掌(zhang)上離(li)心(xin)機(ji)進(jin)行(xing)離(li)心(xin)。

1、收(shou)集OD600=1.0 酵母(mu)菌(jun)體，4℃，12000rpm離心(xin)5min,棄(qi)去(qu)上清(qing)液。

2、將(jiang)菌(jun)體稱(cheng)重(zhong)，按照比(bi)例（50mg：500µL）向(xiang)沈(chen)澱中(zhong)加(jia)入500µL破(po)壁溶液(ye)Ⅰ，重(zhong)懸(xuan)菌(jun)體，冰(bing)上(shang)孵(fu) 育5min。

3、4℃，12000rpm 離(li)心(xin)2min，棄(qi)去(qu)上清(qing)，向(xiang)沈(chen)澱中(zhong)加(jia)入500µL破(po)壁溶液(ye)Ⅱ，重(zhong)懸(xuan)菌(jun)體，冰(bing)上(shang)孵(fu)育 5min。

4、在(zai)500µL的裂解液(ye)中加(jia)入5µLPMSF，5µL蛋(dan)白(bai)酶(mei)抑(yi)制劑和12.5µLβ-巰(qiu)基(ji)還原劑；混(hun)勻(yun)，放(fang)置(zhi) 在(zai)冰(bing)上(shang)備(bei)用(yong)(根據(ju)實(shi)際(ji)用(yong)量(liang)準(zhun)備(bei)適(shi)量裂解液(ye)），現用(yong)現配(pei)。

5、4℃，12000rpm 離(li)心(xin)2min,棄(qi)去(qu)上清(qing)，向(xiang)沈(chen)澱中(zhong)加(jia)入500µL上(shang)述提前(qian)備(bei)好的裂解液(ye)重懸(xuan)菌(jun)液。室(shi) 溫(wen)震(zhen)蕩40min~60min，或(huo)者煮沸5min。

6、裂解結束(shu)後，4℃ ，12000rpm 離心(xin) 10min。收(shou)集上清(qing)用(yong)於後續實(shi)驗(yan)。

註意(yi)事(shi)項:

1、裂解液(ye)在低溫(wen)條件下可(ke)能(neng)會(hui)出現沈(chen)澱(dian)析出現象(xiang)，37度(du)水浴加(jia)熱至沈澱(dian)wan全(quan)溶解再(zai)使用。

2、β-巰(qiu)基還原劑低(di)溫(wen)狀(zhuang)態下可(ke)能(neng)比(bi)較粘稠(chou)，可(ke)恢復室(shi)溫(wen)後使用。

3、提(ti)取後的蛋(dan)白(bai)溶液(ye)中(zhong)含有(you)還原劑，如(ru)果(guo)要(yao)測(ce)濃度(du)，請(qing)先(xian)沈(chen)澱蛋(dan)白(bai)，然(ran)後用PBS重新溶解蛋(dan)白(bai)後再進行(xing)測(ce)定，否則(ze)會(hui)影響(xiang)結果(guo)。

4、按照每50mg濕(shi)重加(jia)500µL的破壁溶液(ye)和裂解液(ye)，菌(jun)體的量不能(neng)夠過(guo)多,否(fou)則(ze)會使(shi)的菌(jun)體裂解不 充(chong)分(fen)。

5、裂解後的酵母(mu)菌(jun)蛋(dan)白(bai)液(ye),應(ying)在-80℃的冰(bing)箱(xiang)中(zhong)保存(cun)。

6、裂解液(ye)中鹽離(li)子(zi)濃度(du)較高，必(bi)要時(shi)可(ke)除(chu)鹽後使用。

7、如(ru)果(guo)提(ti)取(qu)磷(lin)酸(suan)化(hua)蛋(dan)白(bai)，需要(yao)加(jia)入磷(lin)酸(suan)酶(mei)抑(yi)制劑。

8、本(ben)試劑(ji)只能(neng)夠用(yong)於(yu)體(ti)外實(shi)驗(yan)科(ke)研(yan)實(shi)驗(yan)，不能(neng)夠用(yong)於(yu)臨(lin)床(chuang)、治療(liao)和動(dong)物(wu)體內(nei)實(shi)驗(yan)等，由此(ci)產生(sheng)的後果(guo)，概(gai)不承擔責(ze)任(ren)。

酵(jiao)母總(zong)蛋(dan)白(bai)提(ti)取(qu)試劑(ji)盒-常(chang)備(bei)現貨(huo)

產品訂購信息：

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