Na+k+—ATP酶(mei)活性檢(jian)測試劑(ji)盒(he) 抗逆：Na+K+- ATP酶(mei)廣泛(fan)分布(bu)於(yu)植(zhi)物、動物、微(wei)生(sheng)物(wu)和(he)細(xi)胞(bao)中，可(ke)催(cui)化ATP水解(jie)生(sheng)成ADP和無(wu)機磷(lin)。
Na+K+-ATP酶(mei)分解(jie)ATP生(sheng)成ADP及無(wu)機磷(lin)，通過測(ce)定(ding)無(wu)機磷(lin)的量(liang)來(lai)確(que)定(ding)ATP酶(mei)活性。

NobleRyder BC8843 Na+k+——ATP酶(mei)活性檢(jian)測試劑(ji)盒(he) Na+K+——ATPase Activity Assay Kit

產(chan)品貨(huo)號：BC8843

產(chan)品名(ming)稱(cheng)：Na+k+——ATP酶(mei)活性檢(jian)測試劑(ji)盒(he) Na+K+——ATPase Activity Assay Kit

產(chan)品規格(ge)：100T/48S

Na+k+—ATP酶(mei)活性檢(jian)測試劑(ji)盒(he) 抗逆產(chan)品簡(jian)介：

中文名(ming)稱(cheng)：Na+k+ ——ATP酶(mei)活性檢(jian)測試劑(ji)盒(he)

英(ying)文名(ming)稱(cheng)：Na+K+——ATPase Activity Assay Kit

別名(ming)：Na+k+――ATP酶(mei)試劑(ji)盒(he) Na+k+ ――ATP酶(mei)測試盒(he)

規(gui)格(ge)：100T/48S

檢(jian)測方(fang)法：微量法 Spectrophotometer/Microplate Reader

儲存條(tiao)件(jian)：Store at -20℃，6 months

具體(ti)產(chan)品的參(can)數(shu)以(yi)收(shou)到(dao)產(chan)品說(shuo)明(ming)書的參(can)數(shu)為(wei)準(zhun)

NobleRyder BC8843 Na+k+——ATP酶(mei)活性檢(jian)測試劑(ji)盒(he) Na+K+——ATPase Activity Assay Kit

Na+K+- ATP酶(mei)廣泛(fan)分布(bu)於(yu)植(zhi)物、動物、微(wei)生(sheng)物(wu)和(he)細(xi)胞(bao)中，可(ke)催(cui)化ATP水解(jie)生(sheng)成ADP和無(wu)機磷(lin)。

Na+K+-ATP酶(mei)分解(jie)ATP生(sheng)成ADP及無(wu)機磷(lin)，通過測(ce)定(ding)無(wu)機磷(lin)的量(liang)來(lai)確(que)定(ding)ATP酶(mei)活性。

需自(zi)備(bei)的儀(yi)器和用品：

可見(jian)分光光度計/酶(mei)標(biao)儀、水浴鍋/恒(heng)溫培養箱(xiang)、臺式(shi)離心(xin)機(ji)、可(ke)調式(shi)移液器、微量玻璃(li)比(bi)色(se)皿/96孔(kong)板(ban)、研(yan)缽(bo)/勻(yun)漿(jiang)器、冰(bing)和(he)蒸餾水(shui)。

操作步驟：

壹、樣本(ben)處(chu)理(可適當調整待(dai)測樣本(ben)量(liang)，具體比(bi)例(li)可以(yi)參考(kao)文獻(xian))

1、細(xi)菌(jun)、細(xi)胞(bao)或(huo)組(zu)織樣本(ben)的制(zhi)備(bei)：

細(xi)菌(jun)或(huo)培養細(xi)胞(bao)：先(xian)收(shou)集(ji)細(xi)菌(jun)或(huo)細(xi)胞(bao)到離(li)心(xin)管內，離心(xin)後(hou)棄(qi)上(shang)清(qing);按(an)照每500萬(wan)細(xi)菌(jun)或(huo)細(xi)胞(bao)加入1mL試劑(ji)壹，超聲(sheng)波(bo)破碎(sui)細(xi)菌(jun)或(huo)細(xi)胞(bao)(功率(lv)200w，超聲(sheng)3s，間(jian)隔10s，重復30次)：8000g4℃離心(xin)10min，取(qu)上(shang)清(qing)，置(zhi)冰(bing)上(shang)待(dai)測。

組(zu)織：稱(cheng)取約(yue)0.1g組織，加入1mL試劑(ji)壹進行冰(bing)浴(yu)勻(yun)漿(jiang)。8000g4℃離心(xin)10min，取(qu)上(shang)清(qing)，置(zhi)冰(bing)上(shang)待(dai)測。

2、血(xue)清(qing)(漿)樣本(ben)：直(zhi)接(jie)檢(jian)測。

二、測(ce)定(ding)步驟

1、可(ke)見(jian)分光光度計或(huo)酶(mei)標(biao)儀預熱30min以(yi)上，調節(jie)波長至660nm，可(ke)見(jian)分光光度計需用蒸餾水(shui)調零。

三(san)、Na+K+-ATP酶(mei)活計算(suan)

1、血清(qing)(漿)Na*K*-ATPase活力(li)的計算(suan)：

larbio

定義(yi)：規定(ding)每小(xiao)時(shi)每毫升血(xue)清(qing)(漿)中Na+K+- ATP酶(mei)分解(jie)ATP產(chan)生(sheng)lμmoL無(wu)機磷(lin)的量(liang)為(wei)壹個(ge)酶(mei)活力(li)單位。

Na+K+-ATP酶(mei)活力(li)(U/mL)=C標(biao)x(A測定-A對照)+(A標(biao)準(zhun)-A空(kong)白(bai))xV 總(zong)+V 樣+TxF=7.5x(A測定(ding)-A對(dui)照)+(A標(biao)準(zhun)-A空(kong)白(bai))xF

2、組(zu)織(zhi)、細(xi)菌(jun)或(huo)細(xi)胞(bao)中Na*K*-ATPase活力(li)的計算(suan)：

(1)按(an)蛋(dan)白(bai)濃度計算(suan)：

定義(yi)：規定(ding)每小(xiao)時(shi)每毫克組(zu)織(zhi)蛋(dan)白(bai)中Na+K+-ATP酶(mei)分解(jie)ATP產(chan)生(sheng)lμmoL無(wu)機磷(lin)的量(liang)為(wei)壹個(ge)酶(mei)活力(li)單位。

Na+K+-ATP酶(mei)活力(li)(U/mg prot)=C標(biao)x(A測定-A對照)÷(A標(biao)準(zhun)-A空(kong)白(bai)) xV總(zong)÷ (CprxV樣) ÷TxF=7.5x(A測定(ding)-A對(dui)照)÷(A標(biao)準(zhun)-A空(kong)白(bai))+CprxF

(2)按(an)樣本(ben)質(zhi)量計算(suan)：

定義(yi)：規定(ding)每小(xiao)時(shi)每克組織(zhi)中Na+K+-ATP酶(mei)分解(jie) ATP產(chan)生(sheng)lμmoL無(wu)機磷(lin)的量(liang)為(wei)壹個(ge)酶(mei)活力(li)單位。

Na+K+-ATP酶(mei)活力(li)(U/g質量)=C標(biao)x(A 測定-A對照)+(A標(biao)準(zhun)-A空(kong)白(bai))xV總(zong)+(V樣+V 樣總(zong)xW)÷TxF-7.5x(A測定(ding)-A對照)÷(A標(biao)準(zhun)-A空(kong)白(bai))÷WxF

(3)按(an)細(xi)菌(jun)或(huo)細(xi)胞(bao)數量(liang)計算(suan)：

定義(yi)：規定(ding)每小(xiao)時(shi)每1萬個(ge)細(xi)菌(jun)或(huo)細(xi)胞(bao)中Na+K+-ATP酶(mei)分解(jie)ATP產(chan)生(sheng)lμmoL無(wu)機磷(lin)的量(liang)為(wei)壹個(ge)酶(mei)活力(li)單位。

Na+K+-ATP酶(mei)活力(li)(U/104cell)=C標(biao)x(A測定-A對照)÷(A標(biao)準(zhun)-A空(kong)白(bai))xV 總(zong)÷(V 樣÷V 樣總(zong)xN)÷TxF=7.5x(A測定(ding)-A對照)+(A標(biao)準(zhun)-A空(kong)白(bai))xF

C標(biao)：標(biao)準(zhun)管濃度(du)，0.5μmol/mL：V總(zong)：酶(mei)促反應總(zong)體積(ji)，0.25mL;V樣：加入樣本(ben)體(ti)積，0.1mL：V樣總(zong)：加入試劑(ji)壹體積(ji)，1mL;T：反應(ying)時(shi)間(jian)，1/6小(xiao)時(shi)：Cpr：樣本(ben)蛋(dan)白(bai)質濃度(du)，mg/mL：W：樣本(ben)質(zhi)量，g;N：細(xi)菌(jun)或(huo)細(xi)胞(bao)總(zong)數，以(yi)萬計：F：樣本(ben)稀(xi)釋倍數。

註意事項(xiang)：

1、由(you)於(yu)每(mei)壹個(ge)樣都必(bi)須(xu)做(zuo)對(dui)照，本(ben)試劑(ji)盒(he)100管保證(zheng)測48份(fen)Na*K*-ATP酶(mei)。

2、此法具有微量(liang)、靈敏(min)、快速的特點。所以(yi)對測(ce)定(ding)所(suo)用試管要求嚴格(ge)無(wu)磷(lin)。

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