GUS(β-Galactosidase)基因(yin)是存(cun)在(zai)於(yu)E.coli等壹些(xie)細菌基因(yin)組內(nei)的(de)編碼(ma)β-葡(pu)萄(tao)糖苷酸酶(mei)的壹種(zhong)水解(jie)酶，該(gai)基因(yin)常作(zuo)為融(rong)合(he)標(biao)記用(yong)於植(zhi)物轉基因(yin)分析和調(tiao)控(kong)研(yan)究(jiu)中(zhong)。
GUS染色(se)試劑盒(he) 植(zhi)物組(zu)織(zhi)染色(se)

NobleRyder G1848 GUS染色(se)試劑盒(he)，GUS Stain Kit

產品貨號(hao)：G1848

產品名稱(cheng)：GUS染色(se)試劑盒(he)，GUS Stain Kit

產品規(gui)格(ge)：100ml

GUS染色(se)試劑盒(he) 植(zhi)物組(zu)織(zhi)染色(se)

產品簡(jian)介(jie)：

中文(wen)名(ming)稱(cheng)：GUS染色(se)試劑盒(he)

英文(wen)名(ming)稱(cheng)：GUS Stain Kit

規(gui)格(ge)：100ml

儲存(cun)條(tiao)件：-20℃，避(bi)光保(bao)存(cun)，有(you)效期6個月(yue)。

具體(ti)產(chan)品的參(can)數(shu)以收(shou)到(dao)產品說明書的參(can)數(shu)為準

NobleRyder G1848 GUS染色(se)試劑盒(he)，GUS Stain Kit產品介(jie)紹

GUS(β-Galactosidase)基因(yin)是存(cun)在(zai)於(yu)E.coli等壹些(xie)細菌基因(yin)組內(nei)的(de)編碼(ma)β-葡(pu)萄(tao)糖苷酸酶(mei)的壹種(zhong)水解(jie)酶，該(gai)基因(yin)常作(zuo)為融(rong)合(he)標(biao)記用(yong)於植(zhi)物轉基因(yin)分析和調(tiao)控(kong)研(yan)究(jiu)中(zhong)。GUS受體(ti)基因(yin)系(xi)統有表達E.coli GUS酶(mei)的(de)穩定(ding)性和在植(zhi)物內(nei)的(de)低活(huo)性，絕(jue)大(da)多(duo)數植(zhi)物沒有(you)檢(jian)測(ce)到(dao)葡萄(tao)糖苷酸酶的(de)背(bei)景(jing)活(huo)性，以(yi)β-葡(pu)萄糖(tang)苷酸酯類(lei)物質為底(di)物(wu)，其反(fan)應產物(wu)可(ke)用(yong)多種(zhong)方法(fa)檢(jian)測(ce)出(chu)來。5-Bromo-chloro-3-indolyl β-D-glucuronide，cyclohexylammonium salt(簡(jian)稱(cheng)為X-Gluc或X-GlcA)，是(shi)檢(jian)測(ce)大(da)腸(chang)桿菌中(zhong)GUS基因(yin)的底(di)物(wu)，可(ke)快(kuai)速檢(jian)測(ce)植(zhi)物中(zhong)GUS基因(yin)融(rong)合(he)標(biao)記。

GUS染色(se)液(ye)是(shi)β-葡萄糖(tang)苷酶(mei)基因(yin)染色(se)試劑盒(he)(β-Galactosidase Reporter Gene Staining Kit)的(de)簡(jian)稱(cheng)。GUS染色(se)液(ye)染色(se)原理(li)是適(shi)宜的(de)反(fan)應條件下，β-葡萄糖苷(gan)酶(mei)(GUS)可(ke)將(jiang)X-Gluc水解(jie)成藍(lan)色(se)物質，該(gai)物(wu)質不溶解(jie)於轉基因(yin)的細(xi)胞(bao)核(he)組織中(zhong)的靛(dian)藍(lan)物質，具有(you)GUS活(huo)性的(de)部位(wei)或位(wei)點呈現藍色或藍(lan)色(se)斑(ban)點，可(ke)用(yong)肉(rou)眼或顯(xian)微鏡觀察(cha)到(dao)。GUS染色(se)液(ye)可(ke)用(yong)於生物(wu)化學活(huo)性分(fen)析、免(mian)疫(yi)分析以(yi)及(ji)組織(zhi)和細胞(bao)的(de)組(zu)織化學染色(se)，多(duo)用(yong)於轉基因(yin)植(zhi)物的(de)GUS基因(yin)表達分(fen)析。該(gai)試劑僅用(yong)於科研(yan)領(ling)域，不(bu)適用(yong)於臨床診(zhen)斷或其(qi)他(ta)用(yong)途(tu)。

操作(zuo)步(bu)驟(zhou)：(僅供(gong)參(can)考(kao))

1. 配(pei)制X-GlcA工作(zuo)液(ye)：取(qu)X-GlcA溶(rong)劑(ji)229ul加入(ru)至(zhi)80mgX-GlcA中或取(qu)適(shi)量上(shang)述(shu)2種(zhong)物質溶解(jie)，使 其(qi)濃度達到(dao)350mg/mL，輕輕混(hun)勻(yun)，即(ji)為X-GlcA工作(zuo)液(ye)，分(fen)裝(zhuang)後，-20℃避(bi)光保(bao)存(cun)。 2. 按(an)下列比例(li)配(pei)制GUS染色(se)液(ye)：

3. 固定(ding)(固定(ding)不是(shi)必(bi)須的步(bu)驟(zhou)，如果不(bu)需(xu)要(yao)固(gu)定(ding)，直(zhi)接進(jin)行(xing)操作(zuo)步(bu)驟(zhou)4)：

① 取(qu)轉基因(yin)植(zhi)物組(zu)織(zhi)，加入(ru)到(dao)3-5mL左右清潔(jie)小瓶(ping)或多(duo)孔(kong)板(ban)中。

② 取(qu)適(shi)量2×緩(huan)沖固定(ding)液與(yu)去(qu)離子水等(deng)量稀(xi)釋即(ji)獲得1×緩(huan)沖固定(ding)液。加入(ru)3-5倍(bei)組織(zhi)體積(ji)的1×緩(huan)沖固 定(ding)液沒過(guo)組(zu)織(zhi)，室(shi)溫(wen)孵育45min，棄(qi)液。

③ 配(pei)制洗滌液：按GUS緩(huan)沖液 A:去(qu)離子水=1:20稀(xi)釋，即(ji)為洗滌液。用(yong)配(pei)制好(hao)的洗滌液漂洗3次。 每次1min。

4. 加入(ru)適量GUS染色(se)液(ye)，使(shi)GUS染色(se)液(ye)wan全(quan)浸沒組(zu)織(zhi)。

5. 用(yong)真空(kong)泵抽(chou)取(qu)小(xiao)瓶(ping)或多(duo)孔(kong)板(ban)中的(de)氣(qi)體(ti)，抽(chou)取(qu)時(shi)間(jian)應大(da)於(yu)2min。該(gai)步(bu)驟(zhou)是為了(le)抽(chou)取(qu)植(zhi)物組(zu)織(zhi)內的氣(qi)體， 並使染色(se)液(ye)更(geng)容(rong)易(yi)進(jin)入(ru)組織內。

6. 立即(ji)蓋緊瓶(ping)子或多(duo)孔(kong)板(ban)，37℃孵育24h。隨(sui)著(zhe)孵育時(shi)間(jian)的延(yan)長，藍(lan)色漸漸(jian)出(chu)現，當表達量較(jiao)高時，GUS 活(huo)性的(de)部位(wei)或位(wei)點呈現藍色或藍(lan)色(se)斑(ban)點。

7. 用(yong)75%乙(yi)醇脫去(qu)樣(yang)本(ben)的(de)葉綠素(su)，壹般(ban)樣(yang)本(ben)浸沒於(yu)乙(yi)醇1-3h。如有必(bi)要(yao)可(ke)重(zhong)復(fu)該(gai)脫色步(bu)驟(zhou)，以便徹(che)di清除葉(ye)綠素(su)。樣(yang)本(ben)保(bao)存於乙(yi)醇中(zhong)，可(ke)用(yong)肉(rou)眼或普(pu)通(tong)光學顯(xian)微鏡下觀察(cha)。

註意(yi)事(shi)項(xiang)：

1.    配(pei)制好(hao)的GUS染色(se)液(ye)可(ke)以(yi)2-8℃避(bi)光保(bao)存(cun)半(ban)個月(yue)。

2.    X-GlcA 工作(zuo)液(ye)應避(bi)免(mian)反(fan)復凍(dong)融(rong)，否則(ze)染色(se)效(xiao)率(lv)會(hui)下(xia)降(jiang)。

3.    由於(yu)組(zu)織特異性等(deng)原因(yin)，藍色(se)顏(yan)色(se)反(fan)應可(ke)能不(bu)wan全(quan)壹(yi)致(zhi)，應註意(yi)摸索具體(ti)實(shi)驗條件。

4.    為了(le)您(nin)的(de)安(an)全(quan)和健康(kang)，請穿實(shi)驗服並戴壹次性手套(tao)操作(zuo)。

GUS染色(se)試劑盒(he) 植(zhi)物組(zu)織(zhi)染色(se) 

產品訂購信息(xi)：

NobleRyder G1848 GUS染色(se)試劑盒(he)，GUS Stain Kit 100ml