諾博萊德(de) 增強(qiang)型RNA清潔純(chun)化試劑盒(he) RNA提(ti)取配(pei)套產品

FlashPure Plus RNA Purification Kit增強(qiang)型 RNA 清潔純(chun)化試劑盒(he)（含 miRNA）

目(mu)錄(lu)號:91612

產品內容：

自備試劑：

    無水(shui)乙醇

保(bao)存條件(jian)：

    室溫（15 ~ 25℃）

具(ju)體產品的(de)參(can)數(shu)以收(shou)到(dao)產品說明(ming)書(shu)的(de)參(can)數(shu)為準(zhun)

產品簡介(jie)：

本(ben)試劑盒(he)不(bu)但可(ke)以純(chun)化大(da)片(pian)段(duan)的(de) mRNA 等 RNA，也(ye)可(ke)以(yi)純(chun)化 miRNA 等(deng)各(ge)種(zhong)小(xiao)的(de) RNA。適用(yong)於(yu)從酶(mei)反應(ying)液（如(ru)DNase 處(chu)理(li)、體外(wai)轉(zhuan)錄、RNA 加帽、蛋白(bai)酶(mei)處理(li)、RNA 標(biao)記等(deng)）中(zhong)純(chun)化回(hui)收(shou)RNA，也可(ke)用(yong)於(yu)從其(qi)它(ta)方(fang)式提(ti)取獲得的(de) RNA 的(de)純(chun)化。

在(zai)高(gao)鹽(yan)條(tiao)件(jian)下(xia)，RNA 與(yu)矽(gui)膠吸(xi)附(fu)膜(mo)高效(xiao)、專壹(yi)地(di)結(jie)合(he)，經(jing)過漂(piao)洗步驟(zhou)，最大(da)限(xian)度除去(qu)蛋白(bai)質(zhi)、無機鹽離子(zi)和許多有(you)機雜質(zhi)等(deng)，在(zai)低(di)鹽條(tiao)件(jian)下(xia)，RNA 被(bei)洗脫(tuo)。可處(chu)理(li)的(de)RNA 樣品(pin)量(liang)可(ke)高(gao)達 100 μg。

本(ben)試劑盒(he)純(chun)化的(de)RNA 沒有(you)蛋白(bai)的(de)汙(wu)染(ran)，所得的(de) RNA 可用(yong)於(yu)NGS RNA 文庫(ku)構(gou)建、反轉(zhuan)錄熒光定量(liang) PCR、 Northern blot、 Formation of ribonucleoprotein (RNP) complexes for genome editing、顯(xian)微註射(she)、RNA 標(biao)記、 RNA 幹(gan)擾(rao)、轉(zhuan)染(ran)等下(xia)遊實驗。

適用(yong)範圍(wei)：

適用(yong)於(yu)回收(shou)≥15nt 的(de)單鏈(lian) RNA 或(huo)者(zhe)雙(shuang)鏈RNA。

產品特點

1.         快速(su)：步驟(zhou)少，操作(zuo)簡便，整(zheng)個操作(zuo)僅(jin)需 15 分鐘(zhong)。

2.         高(gao)效(xiao)：獨(du)te配(pei)方使(shi)本(ben)產品比(bi)壹(yi)般試劑盒(he)回收(shou)效率(lv)大(da)大(da)提(ti)高(gao)，並且不(bu)會(hui)抑(yi)制(zhi)下(xia)遊反應(ying)。

註意事項

1.   使(shi)用(yong)前(qian)請(qing)檢(jian)查(zha)Buffer MRC 是(shi)否出現渾濁，如(ru)有(you)混(hun)濁(zhuo)現象，可(ke)在(zai) 37℃水(shui)浴中(zhong)加熱幾分鐘(zhong)，即(ji)可(ke)恢(hui)復(fu)澄(cheng)清(qing)。

2.所(suo)有步驟(zhou)均可以在(zai)室溫進(jin)行，但(dan)是(shi)應(ying)該(gai)迅速(su)操作(zuo)，減少(shao)RNA 降解機(ji)會(hui)。

3. Wash Solution 1 和 Wash Solution 2/3 加入(ru)無水(shui)乙醇後(hou)，可(ke)以在(zai)常(chang)溫保(bao)存。

4.  Wash Solution 2/3 可能加入(ru)乙醇使(shi)用(yong)幾天(tian)後(hou)出現沈澱晶(jing)體，並不(bu)影響(xiang)使(shi)用(yong)，直接(jie) 不(bu)吸晶(jing)體，吸(xi)上(shang)清使(shi)用(yong)就可以(yi)。

提(ti)示(shi)：

第(di)壹(yi)次使(shi)用(yong)前(qian)請(qing)先(xian)在(zai) Wash Solution 1 瓶(ping)和(he) Wash Solution 2/3 瓶(ping)中(zhong)加入(ru)無水(shui)乙醇，加入(ru)體積請(qing)參(can)照瓶上(shang)的(de)標簽(qian)，並打(da)對(dui)勾標(biao)記。

操作(zuo)步驟(zhou)

1.    於(yu)冰上(shang)，用(yong) RNase-Free H2O 將 RNA 樣品(pin)補(bu)足(zu)至(zhi) 100 μl，加入(ru) 200 μl Buffer MRC，輕(qing)柔(rou)混(hun)勻(yun)。

2.   加入(ru) 375 μl （1.25 倍體積）無水(shui)乙醇，混(hun)勻(yun)，無需離心(xin)。

註意：如(ru)果(guo)希望回收(shou)大(da)於(yu) 25nt 的(de) RNA，加 1.25 倍體積無水(shui)乙醇就可以(yi)；如(ru)果(guo)希望回收(shou)大(da)於(yu) 15nt 的(de) RNA，可以(yi)加 2 倍體積無水(shui)乙醇。

3.    將上(shang)壹(yi)步所(suo)得溶(rong)液加入(ru)壹(yi)套吸(xi)附(fu)柱(zhu)中(zhong)（吸(xi)附(fu)柱(zhu)套(tao)在(zai)收(shou)集管內），13,000 rpm 離心(xin) 30 sec，棄濾(lv)液，將吸附(fu)

柱(zhu)重(zhong)新(xin)套回(hui)收(shou)集管。（吸附(fu)柱(zhu)的(de)最大(da)容量(liang)是(shi) 700 ul，溶(rong)液較多時(shi)，可分兩(liang)次(ci)進(jin)行）

4.    加入(ru) 700 μl Wash Solution 1（請先(xian)檢查(zha)是(shi)否已加入(ru)無水(shui)乙醇!），13,000 rpm 離心(xin) 30 sec，棄濾(lv)液。

5.    漂(piao)洗：加入(ru) 500ul Wash Solution 2/3，13,000 rpm 離心(xin) 30 sec，棄濾(lv)液。

6.    二次漂(piao)洗：重(zhong)復(fu)步驟(zhou) 5 壹(yi)次。

7.    幹(gan)燥(zao)：將離心(xin)吸附(fu)柱(zhu)於(yu) 13,000 rpm 離心(xin) 2 min，甩幹(gan)殘留(liu)漂(piao)洗液。

8. 洗脫(tuo)：將吸附(fu)柱(zhu)置(zhi)於(yu)壹(yi)個新(xin)的(de) 1.5 ml 離心(xin)管中(zhong)，在(zai)吸(xi)附(fu)膜(mo)的(de)中(zhong)央(yang)懸(xuan)空(kong)滴(di)加 30 ~ 80 μl RNase-Free H2O，室溫放置(zhi) 2 min，13,000 rpm 離心(xin) 1 min，收(shou)集 RNA 片(pian)段(duan)。

（註意：為增加回收(shou)效率(lv)，可將 RNase-Free H2O 在(zai) 80℃預熱，也(ye)可(ke)將得到(dao)的(de)溶(rong)液重(zhong)新(xin)加入(ru)到(dao)離心(xin)管中(zhong)，室溫放置(zhi) 2 min，再次離心(xin)收(shou)集。）

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