2x SYBR qPCR Mix是(shi)SYBR Green I 嵌(qian)合(he)染(ran)料(liao)法(fa)專用(yong)的(de)qPCR試劑(ji)，為2x 預混(hun)液，包(bao)含除(chu)引(yin)物和(he)DNA樣品以外的(de)所有(you)qPCR組分，可(ke)減(jian)少操作步(bu)驟(zhou)，縮(suo)短(duan)加(jia)樣時間，降低(di)汙(wu)染(ran)幾(ji)率(lv)。
2x SYBR qPCR Mix（Without ROX）熒(ying)光定量(liang)

諾(nuo)博萊德 2x SYBR qPCR Mix（Without ROX）熒(ying)光定量(liang)

2x SYBR qPCR Mix（Without ROX）

目錄號(hao)：71321

產品內容

保存(cun)條件

-20℃保存(cun)，有效期 24 個月。使用(yong)前(qian)，充(chong)分融(rong)解(jie)，輕柔(rou)顛倒(dao)混(hun)勻，短(duan)期使用(yong)可放在4 ℃，避免(mian)反復(fu)凍融(rong)。

具(ju)體(ti)產品的(de)參(can)數以收到產品說明書的(de)參(can)數為準

產品簡介

2x SYBR qPCR Mix是(shi)SYBR Green I 嵌(qian)合(he)染(ran)料(liao)法(fa)專用(yong)的(de)qPCR試劑(ji)，為2x 預混(hun)液，包(bao)含除(chu)引(yin)物和(he)DNA樣品以外的(de)所有(you)qPCR組分，可(ke)減(jian)少操作步(bu)驟(zhou)，縮(suo)短(duan)加(jia)樣時間，降低(di)汙(wu)染(ran)幾(ji)率(lv)。其(qi)核(he)心組(zu)分是(shi)全(quan)新抗體(ti)法(fa)的(de)Hotmaster Taq DNA聚合(he)酶，配合(he)精心優化的(de)Buffer體(ti)系，有效(xiao)抑制非特異性(xing)擴增，可對寬(kuan)廣(guang)濃度範圍(wei)的(de)模板進行(xing)準確(que)定量(liang)，獲(huo)得穩(wen)定(ding)可(ke)靠(kao)的(de)qPCR結(jie)果(guo)，具(ju)有(you)靈(ling)敏度高(gao)、特異性(xing)強、穩(wen)定(ding)性(xing)好等(deng)特點。

本品不含參(can)比染(ran)料(liao)ROX，適(shi)用(yong)於不需(xu)要ROX校(xiao)準的(de)儀器(qi)，常(chang)見(jian)的(de)是(shi)Bio-rad系(xi)列(lie)、Roche、國(guo)產qPCR儀。Roche、國(guo)產(chan)qPCR儀。

操作步(bu)驟(zhou)：

1. 將(jiang)DNA模板、引(yin)物、2 x SYBR qPCR Mix、ddH2O溶解(jie)並(bing)置(zhi)於冰上備(bei)用(yong)。

2. 冰上配制qPCR反應(ying)體(ti)系：（以20μl反應(ying)體(ti)系為例(li)）

註意：

1） 推(tui)薦模板加(jia)樣量為1-2μl / 20μl反應(ying)體(ti)系，cDNA原(yuan)液≤總反應(ying)體(ti)系的(de)10%，基(ji)因組(zu)DNA的(de)量為(wei)10-100 ng。因不同(tong)種(zhong)類的(de)DNA模板中含有的(de)靶基(ji)因拷(kao)貝(bei)數不同(tong)，可對(dui)模板進行(xing)梯度稀釋(shi)，以確(que)定最佳的(de)模板使(shi)用(yong)量。

2） 通常推(tui)薦引物(wu)濃度為0.2 μM，就(jiu)可以(yi)得到較好的(de)結(jie)果(guo)，反應(ying)效果(guo)不佳時可(ke)在0.1 - 1.0 μM範圍(wei)內(nei)進行(xing)調(tiao)整(zheng)。擴增效率不高(gao)的(de)情況下(xia)，可(ke)提高(gao)引物濃度；發(fa)生(sheng)非(fei)特異性(xing)反應(ying)時，可降(jiang)低引(yin)物濃度，由此(ci)優化反應(ying)體(ti)系。
3. qPCR反應(ying)程序

註意：

1） 本產品兼(jian)容(rong)性(xing)強，絕大多(duo)數情況下(xia)使(shi)用(yong)二步(bu)法(fa)和(he)三步(bu)法(fa)均可(ke)獲得良(liang)好效(xiao)果(guo)。壹般來說(shuo)，二(er)步(bu)法(fa)擴增特異性(xing)高(gao)，三步(bu)法(fa)擴增效率高(gao)。如果(guo)融(rong)鏈曲(qu)線(xian)較差(cha)，可(ke)以嘗(chang)試(shi)兩步(bu)法(fa)擴增或(huo)提高(gao)退火溫(wen)度；如果(guo)因(yin)使用(yong)Tm值較低的(de)引物(wu)等原(yuan)因，得不到(dao)良(liang)好的(de)實驗(yan)結(jie)果(guo)時(shi)，可嘗(chang)試(shi)加長延伸時間或(huo)者進行(xing)三步(bu)法(fa)PCR擴增。

2） 根據引(yin)物(wu)的(de)Tm值進行(xing)退火&延(yan)伸(shen)（退火）溫(wen)度的(de)設定(ding)；

3） 延伸（退(tui)火&延(yan)伸(shen)）時間(jian)的(de)設置(zhi)還(hai)需(xu)要根(gen)據您(nin)所(suo)使(shi)用(yong)的(de)qPCR儀所(suo)需(xu)要的(de)最短數據采集時(shi)間自行(xing)調(tiao)整(zheng)。

4） 融(rong)解(jie)曲(qu)線(xian)分析(xi)請以(yi)所(suo)使用(yong)的(de)熒光定量(liang)PCR儀推(tui)薦的(de)程序(xu)進行(xing)設定(ding)。

2x SYBR qPCR Mix（Without ROX）熒光定量(liang)