T4 DNA Ligase 是從表(biao)達(da)T4 DNA Ligase 基(ji)因(yin)的大(da)腸桿(gan)菌經(jing)誘導表(biao)後分(fen)離純(chun)化而來的。它(ta)催(cui)化相鄰DNA鏈(lian)的的(de)5’-磷酸末端(duan)和(he)3’羥(qiang)基(ji)末端(duan)以(yi)磷酸二酯鍵(jian)結(jie)合(he)反應。該酶催(cui)化平(ping)滑(hua)末端(duan)或粘(zhan)性末端(duan)DNA的連(lian)接，修(xiu)復雙(shuang)鏈(lian)DNA、RNA、DNA/RNA雜(za)交(jiao)中(zhong)的(de)單(dan)鏈(lian)中的(de)單(dan)鏈(lian)切口。
T4 DNA Ligase T4原理(li)載體及(ji)其他

諾博(bo)萊(lai)德(de) T4 DNA Ligase T4原理(li)載體及(ji)其他

T4 DNA Ligase

目錄號(hao)：42017

試劑盒(he)組(zu)成(cheng)、包裝：

具(ju)體產品的(de)參數(shu)以(yi)收(shou)到(dao)產品說(shuo)明書的(de)參數(shu)為(wei)準(zhun)  

     濃度： 5U/ml

儲運(yun)溫(wen)度：-20℃（保(bao)存(cun)6個(ge)月(yue)）

制(zhi)品說(shuo)明：T4 DNA Ligase 是從表(biao)達(da)T4 DNA Ligase 基(ji)因(yin)的大(da)腸桿(gan)菌經(jing)誘導表(biao)後分(fen)離純(chun)化而來的。它(ta)催(cui)化相鄰DNA鏈(lian)的的(de)5’-磷酸末端(duan)和(he)3’羥(qiang)基(ji)末端(duan)以(yi)磷酸二酯鍵(jian)結(jie)合(he)反應。該酶催(cui)化平(ping)滑(hua)末端(duan)或粘(zhan)性末端(duan)DNA的連(lian)接，修(xiu)復雙(shuang)鏈(lian)DNA、RNA、DNA/RNA雜(za)交(jiao)中(zhong)的(de)單(dan)鏈(lian)中的(de)單(dan)鏈(lian)切口。

適(shi)用(yong)範圍：（1）DNA片(pian)段(duan)和(he)載(zai)體DNA快(kuai)速(su)連接；

（2）限(xian)制酶切片(pian)段(duan)的克隆(long)；

（3）將DNA片(pian)段(duan)與Linker或(huo)Adaptor連(lian)接(jie)。

酶(mei)貯(zhu)存(cun)緩(huan)沖液：

 20mM Tris-HCl (pH7.5)， 0.1 mM EDTA， 1mM DTT， 50 mM KCl， 50% glycerol。

10×Ligation Buffer：

400 mM Tris-HCl， 100 mM MgCl₂， 100 mM DTT，5 mM ATP(PH7.8)，其他成(cheng)分(fen)。

建(jian)議連(lian)接(jie)反應體系(xi)： (以(yi) 10 μl 反應體系(xi)為(wei)例(li))

反應循(xun)環的設置(zhi)：

粘(zhan)端(duan)連接：22^oC反應10分(fen)鐘(可(ke)根據需(xu)要延(yan)長到(dao)1小時)；也(ye)可(ke)以(yi)16^oC反應1-5小時。

平(ping)端連(lian)接(jie)：22^oC反應2小時或(huo)16 ^oC過(guo)夜(ye)。

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