全(quan)蛋白提取(qu)試(shi)劑盒（強）用(yong)於(yu)哺(bu)乳動(dong)物(wu)組織(zhi)和細(xi)胞中(zhong)提取(qu)總蛋白，試(shi)劑盒中(zhong)的(de)裂解(jie)液(ye)含(han)有蛋白酶(mei)抑(yi)制(zhi)劑和磷(lin)酸(suan)酶抑(yi)制(zhi)劑，作用(yong)較(jiao)為強烈(lie)，可快(kuai)速獲得總蛋白，可(ke)用(yong)於(yu)免疫印(yin)跡實(shi)驗(yan)等(deng)基(ji)礎(chu)研究(jiu)實驗，由於(yu)含(han)有上(shang)述(shu)的(de)酶抑(yi)制(zhi)劑，不(bu)能(neng)用(yong)於(yu)研(yan)究(jiu)蛋白激(ji)酶和磷(lin)酸(suan)激(ji)酶的(de)研究(jiu)。本品(pin)僅(jin)用(yong)於(yu)科(ke)研(yan)。
諾博(bo)萊(lai)德 全蛋白提取(qu)試(shi)劑盒（強）樣(yang)本裂解(jie)

諾博(bo)萊(lai)德 全蛋白提取(qu)試(shi)劑盒（強）樣(yang)本裂解(jie)

NobleRyder BC1598 全蛋白提取(qu)試(shi)劑盒（強）

產(chan)品(pin)貨號(hao)：BC1598

產(chan)品(pin)名稱：全蛋白提取(qu)試(shi)劑盒（強）

產(chan)品(pin)規(gui)格：50T / 100T

產(chan)品(pin)簡(jian)介(jie)：

中(zhong)文(wen)名稱：全蛋白提取(qu)試(shi)劑盒（強）

規格：50T ; 100T

儲(chu)存條(tiao)件(jian)：-20℃，avoid light，at least 1 year

具體產(chan)品(pin)的(de)參數(shu)以收到產(chan)品(pin)說明(ming)書的(de)參數(shu)為準(zhun)

NobleRyder BC1598 全蛋白提取(qu)試(shi)劑盒（強）產(chan)品(pin)介(jie)紹：

全蛋白提取(qu)試(shi)劑盒（強）用(yong)於(yu)哺(bu)乳動(dong)物(wu)組織(zhi)和細(xi)胞中(zhong)提取(qu)總蛋白，試(shi)劑盒中(zhong)的(de)裂解(jie)液(ye)含(han)有蛋白酶(mei)抑(yi)制(zhi)劑和磷(lin)酸(suan)酶抑(yi)制(zhi)劑，作用(yong)較(jiao)為強烈(lie)，可快(kuai)速獲得總蛋白，可(ke)用(yong)於(yu)免疫印(yin)跡實(shi)驗(yan)等(deng)基(ji)礎(chu)研究(jiu)實驗，由於(yu)含(han)有上(shang)述(shu)的(de)酶抑(yi)制(zhi)劑，不(bu)能(neng)用(yong)於(yu)研(yan)究(jiu)蛋白激(ji)酶和磷(lin)酸(suan)激(ji)酶的(de)研究(jiu)。本品(pin)僅(jin)用(yong)於(yu)科(ke)研(yan)。

產(chan)品(pin)組(zu)成：

操作方(fang)法(fa):
1、組織(zhi)總蛋白的(de)提取(qu)
1)在1ml的(de)冷裂解(jie)液(ye)中(zhong)各(ge)加入(ru)10ul的(de)磷酸(suan)酶抑(yi)制(zhi)劑、蛋白酶(mei)抑(yi)制(zhi)劑和PMSF；混勻(yun)，放(fang)置在(zai)冰上(shang)備(bei)用(yong)；
2)稱取(qu)0.1g的(de)新(xin)鮮組(zu)織，放(fang)置於(yu)玻(bo)璃(li)勻(yun)漿器(qi)的(de)入口(kou)緩沖處，用(yong)眼(yan)科(ke)剪(jian)將(jiang)組織(zhi)塊盡(jin)可(ke)能(neng)的(de)剪(jian)碎(sui)，然後加入0.5-1ml的(de)新(xin)配(pei)置的(de)裂解(jie)液(ye)，研(yan)磨(mo)直至沒有明(ming)顯(xian)的(de)組織(zhi)塊，這(zhe)個過程註意(yi)冰上(shang)操(cao)作；
3)將組(zu)織勻(yun)漿液(ye)移入(ru)1.5ml的(de)EP管中(zhong)，4 ℃ 12000g離(li)心(xin)30min；
4)吸取(qu)上(shang)清(qing)至新(xin)的(de)管中(zhong)；
5)進(jin)行蛋白定(ding)量或者(zhe)變性(xing)進(jin)行蛋白實(shi)驗。
（提取(qu)好(hao)的(de)蛋白建(jian)議(yi)保存於(yu)-80 ℃，即用(yong)即取(qu)，避(bi)免反復凍融(rong)，避(bi)免長(chang)時(shi)間儲(chu)存。)
2、細胞(bao)總蛋白的(de)提取(qu)
1)裂解(jie)液(ye)的(de)用(yong)量：10⁷個細胞(bao)需要(yao)裂(lie)解(jie)液(ye)1ml；
2)貼(tie)壁細(xi)胞(bao)：棄去培養(yang)基(ji)，用(yong)冷的(de)PBS洗兩(liang)次，棄去(qu)PBS，然後加入計算好(hao)的(de)細胞(bao)裂解(jie)液(ye)；在(zai)冰上(shang)用(yong)細(xi)胞(bao)刮刀進(jin)行刮離(li)細(xi)胞，
將刮離(li)的(de)細胞(bao)裂解(jie)液(ye)移入(ru)EP管中(zhong)，顛(dian)倒裂解(jie)20-30min
3)懸浮(fu)細胞(bao)：4 ℃ 400g離(li)心(xin)收集細胞，用(yong)冷的(de)PBS洗兩(liang)次細胞(bao)，同樣(yang)按(an)細胞(bao)數(shu)加入(ru)裂(lie)解(jie)液(ye)，
渦(wo)旋(xuan)10s，放(fang)置冰上(shang)裂(lie)解(jie)10min，重(zhong)復3-4次；
4)裂解(jie)完(wan)畢之(zhi)後，將細胞裂(lie)解(jie)液(ye)4 ℃ 12000g離(li)心(xin)30min；
5)將上(shang)清(qing)移入(ru)新(xin)的(de)EP管中(zhong)；進(jin)行蛋白定(ding)量或者(zhe)變性(xing)進(jin)行蛋白實(shi)驗。
（提取(qu)好(hao)的(de)蛋白建(jian)議(yi)保存於(yu)-80 ℃，即用(yong)即取(qu)，避(bi)免反復凍融(rong)，避(bi)免長(chang)時(shi)間儲(chu)存。)

註意(yi)事(shi)項(xiang)：
實驗(yan)過程，所(suo)有試劑都要(yao)需(xu)要(yao)預(yu)冷或者(zhe)即融(rong)，保證操作過程中(zhong)的(de)低(di)溫環(huan)境；
PSMF（有毒）現用(yong)現加，因(yin)為(wei)PMSF在(zai)水溶液(ye)中(zhong)會快(kuai)速降(jiang)解(jie)；

諾博(bo)萊(lai)德 全蛋白提取(qu)試(shi)劑盒（強）樣(yang)本裂解(jie)