細(xi)菌膜蛋(dan)白(bai)/胞質蛋(dan)白(bai)提(ti)取(qu)試劑盒(he)可(ke)以(yi)從(cong)各(ge)種菌體(ti)中提(ti)取(qu)膜蛋(dan)白(bai)和(he)胞質蛋(dan)白(bai)。提(ti)取(qu)過程簡(jian)單(dan)方(fang)便(bian)。本(ben)試劑(ji)盒含(han)有(you)的(de)du特配方(fang)能(neng)夠(gou)有(you)效(xiao)溶解(jie)細(xi)胞膜組(zu)份，試(shi)劑盒含(han)有(you)蛋(dan)白(bai)酶(mei)抑制劑混合物，阻(zu)止了(le)蛋(dan)白(bai)酶(mei)對(dui)蛋(dan)白(bai)的(de)降解(jie)，為(wei)提(ti)取(qu)高質量(liang)的(de)蛋(dan)白(bai)提(ti)供(gong)了(le)保證(zheng)。
細(xi)菌膜蛋(dan)白(bai) 胞質蛋(dan)白(bai)提(ti)取(qu)試劑盒(he)

諾(nuo)博萊(lai)德(de) 細(xi)菌膜蛋(dan)白(bai)/胞質蛋(dan)白(bai)提(ti)取(qu)試劑盒(he)

NobleRyder P5007 細(xi)菌膜蛋(dan)白(bai)/胞質蛋(dan)白(bai)提(ti)取(qu)試劑盒(he)

產品貨(huo)號：P5007

產品名(ming)稱(cheng)：細(xi)菌膜蛋(dan)白(bai)/胞質蛋(dan)白(bai)提(ti)取(qu)試劑盒(he)

產品規(gui)格：50T/100T

細(xi)菌膜蛋(dan)白(bai) 胞質蛋(dan)白(bai)提(ti)取(qu)試劑盒(he)

產品簡(jian)介(jie)：

中文名(ming)稱(cheng)：細(xi)菌膜蛋(dan)白(bai)/胞質蛋(dan)白(bai)提(ti)取(qu)試劑盒(he)

規格：100T ; 50T

儲(chu)存(cun)條(tiao)件(jian)：2-8℃，1 year

具(ju)體(ti)產(chan)品的(de)參數(shu)以(yi)收(shou)到產品說明書的(de)參數(shu)為(wei)準

細(xi)菌膜蛋(dan)白(bai)/胞質蛋(dan)白(bai)提(ti)取(qu)試劑盒(he)可(ke)以(yi)從(cong)各(ge)種菌體(ti)中提(ti)取(qu)膜蛋(dan)白(bai)和(he)胞質蛋(dan)白(bai)。提(ti)取(qu)過程簡(jian)單(dan)方(fang)便(bian)。本(ben)試劑(ji)盒含(han)有(you)的(de)du特配方(fang)能(neng)夠(gou)有(you)效(xiao)溶解(jie)細(xi)胞膜組(zu)份，試(shi)劑盒含(han)有(you)蛋(dan)白(bai)酶(mei)抑制劑混合物，阻(zu)止了(le)蛋(dan)白(bai)酶(mei)對(dui)蛋(dan)白(bai)的(de)降解(jie)，為(wei)提(ti)取(qu)高質量(liang)的(de)蛋(dan)白(bai)提(ti)供(gong)了(le)保證(zheng)。本(ben)試劑(ji)盒提(ti)取(qu)的(de)蛋(dan)白(bai)可(ke)用於WesternBlotting、蛋(dan)白(bai)質(zhi)電(dian)泳(yong)、免疫沈澱(dian)、ELISA、轉錄活(huo)性(xing)分(fen)析(xi)、Gelshift凝膠阻(zu)滯(zhi)實(shi)驗、酶(mei)活(huo)性(xing)測(ce)定(ding)等下(xia)遊(you)蛋(dan)白(bai)研(yan)究實(shi)驗。本(ben)試劑(ji)盒提(ti)取(qu)的(de)蛋(dan)白(bai)為(wei)具(ju)有(you)天(tian)然蛋(dan)白(bai)構(gou)象(xiang)的(de)活(huo)性(xing)蛋(dan)白(bai)。本(ben)試劑(ji)盒中不含(han)有(you)EDTA，與(yu)金(jin)屬螯和(he)層析(xi)等下(xia)遊(you)應用兼容(rong)。

適(shi)用樣本(ben)：細(xi)菌

註(zhu)：

1. 蛋(dan)白(bai)酶(mei)抑制劑未(wei)開(kai)蓋(gai)使用前也(ye)可以(yi)2-8℃儲(chu)存(cun)。開(kai)蓋(gai)使用後(hou)-20℃儲(chu)存(cun)。

2. 蛋(dan)白(bai)酶(mei)抑制劑在2-8℃低(di)溫(wen)時(shi)是(shi)固(gu)體(ti)狀(zhuang)態，從(cong)冰箱(xiang)取(qu)出(chu)後(hou)恢(hui)復至室溫(wen)或(huo)37℃短(duan)時間(jian)水(shui)浴(yu)，變成液體狀態後(hou)離心至管底(di)部再開(kai)蓋(gai)。

3. 試劑拆(chai)封(feng)後(hou)請盡快使用完(wan)！

產品簡(jian)介(jie)：

細(xi)菌膜蛋(dan)白(bai)/胞質蛋(dan)白(bai)提(ti)取(qu)試劑盒(he)可(ke)以(yi)從(cong)各(ge)種菌體(ti)中提(ti)取(qu)膜蛋(dan)白(bai)和(he)胞質蛋(dan)白(bai)。提(ti)取(qu)過程簡(jian)單(dan)方(fang)便(bian)。本(ben)試劑(ji)盒含(han)有(you)的(de)du特配方(fang)能(neng)夠(gou)有(you)效(xiao)溶解(jie)細(xi)胞膜組(zu)份，試(shi)劑盒含(han)有(you)蛋(dan)白(bai)酶(mei)抑制劑混合物，阻(zu)止了(le)蛋(dan)白(bai)酶(mei)對(dui)蛋(dan)白(bai)的(de)降解(jie)，為(wei)提(ti)取(qu)高質量(liang)的(de)蛋(dan)白(bai)提(ti)供(gong)了(le)保證(zheng)。

本(ben)試劑(ji)盒提(ti)取(qu)的(de)蛋(dan)白(bai)可(ke)用於 Western Blotting、蛋(dan)白(bai)質(zhi)電(dian)泳(yong)、免疫沈澱(dian)、ELISA、轉錄活(huo)性(xing)分(fen)析(xi)、Gel shift 凝膠阻(zu)滯(zhi)實(shi)驗、酶(mei)活(huo)性(xing)測(ce)定(ding)等下(xia)遊(you)蛋(dan)白(bai)研(yan)究實(shi)驗。本(ben)試劑(ji)盒提(ti)取(qu)的(de)蛋(dan)白(bai)為(wei)具(ju)有(you)天(tian)然蛋(dan)白(bai)構(gou)象(xiang)的(de)活(huo)性(xing)蛋(dan)白(bai)。

本(ben)試劑(ji)盒提(ti)取(qu)的(de)蛋(dan)白(bai)為(wei)具(ju)有(you)天(tian)然蛋(dan)白(bai)構(gou)象(xiang)的(de)活(huo)性(xing)蛋(dan)白(bai)。

本(ben)試劑(ji)盒中不含(han)有(you) EDTA，與(yu)金(jin)屬螯和(he)層析(xi)等下(xia)遊(you)應用兼容(rong)。

本(ben)試劑(ji)盒提(ti)取(qu)的(de)蛋(dan)白(bai)樣(yang)本(ben)含(han)有(you)高(gao)濃(nong)度(du)的(de)鹽(yan)成分，不可直接(jie)用於 2D 電(dian)泳(yong)，如(ru)下遊(you)實驗(yan)需(xu)要直接(jie)用於等電(dian)聚(ju)焦、雙向電(dian)泳，請使用其他(ta)貨(huo)號的(de)試劑(ji)盒(he)。也(ye)可以(yi)將(jiang)最(zui)後(hou)樣(yang)品除(chu)鹽(yan)後(hou)再用於 2D 電(dian)泳(yong)，用脫(tuo)鹽(yan)柱(zhu)脫(tuo)鹽(yan)處(chu)理(li)。

產品特點(dian)：

1、使用方(fang)便(bian)，從(cong)細(xi)菌中提(ti)取(qu)蛋(dan)白(bai)不需經過超聲破碎等前(qian)處(chu)理(li)。

2、含(han)蛋(dan)白(bai)穩定(ding)劑(ji)，提(ti)取(qu)的(de)蛋(dan)白(bai)穩定(ding)。

3、紫外檢測(ce)蛋(dan)白(bai)濃(nong)度(du)時(shi)，背景(jing)幹擾低(di)。

4、蛋(dan)白(bai)酶(mei)抑制劑抑制了蛋(dan)白(bai)的(de)降解(jie)，蛋(dan)白(bai)酶(mei)抑制劑配方(fang)優化(hua)。蛋(dan)白(bai)酶(mei)抑制劑混合物包(bao)含(han)

6 種獨立(li)的(de)蛋(dan)白(bai)酶(mei)抑制劑；每壹種抑制劑可特異(yi)性抑制某壹種或(huo)幾(ji)種蛋(dan)白(bai)酶(mei)活(huo)性(xing)。該混合物優化(hua)的(de)組(zu)成使其可(ke)以抑制幾(ji)乎所(suo)有(you)重要的(de)蛋(dan)白(bai)酶(mei)活(huo)性(xing)，包(bao)括si氨(an)酸(suan)蛋(dan)白(bai)酶(mei)、半guang氨(an)酸(suan)酸(suan)蛋(dan)白(bai)酶(mei)、天(tian)冬氨(an)酸(suan)蛋(dan)白(bai)酶(mei)、丙氨(an)酰(xian)-氨(an)基肽酶(mei)等。

5、本(ben)品可(ke)用於革蘭氏(shi)陽(yang)性菌(jun)和(he)革蘭氏(shi)陰性(xing)菌(jun)。

6、本(ben)品不含(han) EDTA，可(ke)以(yi)用於金(jin)屬螯合層析(xi)等下(xia)遊(you)應用。

自(zi)備試(shi)劑(ji)和儀(yi)器：

離心機、振(zhen)蕩(dang)器、渦(wo)旋(xuan)混勻(yun)器、移(yi)液(ye)器(qi)、冰箱(xiang)、冰盒(he)，PBS 緩(huan)沖液(ye)、蛋(dan)白(bai)定(ding)量(liang)試劑(ji)盒(he)，離心管、吸頭(tou)、壹(yi)次(ci)性手套

使用方(fang)法(fa)：

壹、使用註(zhu)意(yi)事項：

1. 旋(xuan)帽離心管裝的(de)試劑(ji)在開(kai)蓋(gai)前(qian)請短(duan)暫離心，將(jiang)蓋(gai)內壁上的(de)液體(ti)甩(shuai)至(zhi)管底(di)，避免(mian)開(kai)蓋(gai)時(shi)液(ye)體(ti)灑(sa)落(luo)。

2. 實驗過程中的(de)所(suo)有(you)試(shi)劑(ji)須(xu)預(yu)冷(leng)；所(suo)有(you)器(qi)具(ju)須(xu)放-20℃冰箱(xiang)預冷(leng)。整(zheng)個過程須保持樣品處(chu)於低(di)溫(wen)。

3. 蛋(dan)白(bai)酶(mei)抑制劑儲(chu)存(cun)期間(jian)溶(rong)液如(ru)果出(chu)現(xian)沈澱(dian)，不影(ying)響使用，溶解(jie)後(hou)正(zheng)常使用。

4. 蛋(dan)白(bai)酶(mei)抑制劑在 2-8℃時(shi)是(shi)固(gu)體(ti)狀(zhuang)態，從(cong)冰箱(xiang)取(qu)出(chu)後(hou)恢(hui)復至室溫(wen)或(huo) 37℃短(duan)時間(jian)水(shui)浴(yu)，變成液體狀態後(hou)離心至管底(di)部再開(kai)蓋(gai)。

5. 提(ti)取(qu)液 A 在使用前須(xu)壹(yi)直置於 2-8℃條(tiao)件(jian)，否則下遊膜蛋(dan)白(bai)提(ti)取(qu)時會導致(zhi)不容(rong)易分(fen)層(ceng)。

6. 可以根據自(zi)己實驗(yan)需要加(jia)入其它蛋(dan)白(bai)酶(mei)抑制劑單品。

二、操作(zuo)步驟

1. 提(ti)取(qu)液制備：

每 500ul 冷的(de)提(ti)取(qu)液 A 中加(jia)入 5ul 提(ti)取(qu)液 B 和 2ul 蛋(dan)白(bai)酶(mei)抑制劑混合物，充(chong)分(fen)混勻後(hou)置冰上備用。

【註(zhu)】：

1) 根據需要處(chu)理(li)的(de)樣品數(shu)量(liang)準備蛋(dan)白(bai)提(ti)取(qu)液，蛋(dan)白(bai)酶(mei)抑制劑混合物不可以壹(yi)次(ci)全(quan)部加(jia)入提(ti)取(qu)液。

2) 加(jia)過蛋(dan)白(bai)酶(mei)抑制劑的(de)提(ti)取(qu)液壹周內未(wei)使用完(wan)，再次(ci)使用前需(xu)要再次(ci)加(jia)入蛋(dan)白(bai)酶(mei)抑制劑。

3) 蛋(dan)白(bai)樣(yang)品用於測(ce)定(ding)某(mou)些(xie)蛋(dan)白(bai)酶(mei)活(huo)性(xing)等下(xia)遊(you)實驗(yan)時，註(zhu)意(yi)根據實際(ji)情況(kuang)調整(zheng)抑制劑混合物是(shi)否加(jia)入。

4) 提(ti)取(qu)液 A 在使用前須(xu)壹(yi)直置於 2-8℃條(tiao)件(jian)，否則下遊膜蛋(dan)白(bai)提(ti)取(qu)時會導致(zhi)不容(rong)易分(fen)層(ceng)。

5) 以下步驟中使用的(de)蛋(dan)白(bai)提(ti)取(qu)液為(wei)此步(bu)配制(zhi)好(hao)的(de)含(han)蛋(dan)白(bai)酶(mei)抑制劑的(de)提(ti)取(qu)液。

2. 離心收(shou)集菌體(ti)，用 PBS 洗菌體 2 次(ci)。

【註(zhu)】：

1) 加(jia)入 PBS 重懸混(hun)勻(yun)，5000×g 離心 10 分鐘(zhong)。

2) 不同菌種需要的(de)離心力有(you)差異(yi)，可以(yi)根(gen)據(ju)實際(ji)情況(kuang)調整(zheng)離心力，采(cai)用平時(shi)收(shou)集菌體(ti)的(de)轉速(su)即(ji)可。

3. 按(an)每 100-150mg 濕(shi)重菌體(ti)樣(yang)本(ben)加(jia)入 500ul 冷的(de)提(ti)取(qu)液 A（大約(yue)菌體(ti)和(he)提(ti)取(qu)液體積比 1:3-1:5，wan全(quan)淹沒菌(jun)體(ti)即(ji)可），吹(chui)打混(hun)勻，在 2-8℃振(zhen)蕩(dang) 1-2 小時(shi)，至(zhi)菌(jun)體裂解wan全(quan)，液體澄清(qing)，菌體沈澱(dian)減少。

【註(zhu)】：

1) 必須在 2-8℃條(tiao)件(jian)下振(zhen)蕩(dang)。不可以室(shi)溫(wen)振(zhen)蕩(dang)

2) 使用振蕩(dang)器或(huo)搖床的(de)較(jiao)低(di)轉(zhuan)速，保持液體(ti)稍微晃動(dong)即(ji)可。可以蓋緊(jin)離心管，將(jiang)離心管傾斜(xie)放置或(huo)者橫置，以利於液(ye)體(ti)振蕩(dang)。

3) 如(ru)果沒有(you) 2-8℃持續振(zhen)蕩(dang)條(tiao)件(jian)，也(ye)可直接(jie)置 2-8℃冰箱(xiang)靜(jing)置 1-2 小時，中間(jian)每(mei)隔 10 分鐘(zhong)渦旋(xuan)振蕩(dang)混勻(yun)即(ji)可。

4) 如(ru)果有(you)超聲條(tiao)件(jian)，可以(yi)在 40-300w，超聲 5s/間(jian)隔 5s 條(tiao)件(jian)下超聲幾(ji)分(fen)鐘(zhong)，至澄清(qing)。超聲有(you)利於提(ti)高(gao)膜蛋(dan)白(bai)回(hui)收(shou)率(lv)。

4. 將(jiang)菌(jun)液在 2-8℃低(di)溫(wen)下(xia) 12000×g 離心 5 分鐘(zhong)，取(qu)上清(qing)。

5. 在 37℃水(shui)浴(yu) 10 分鐘。

6. 在 37℃，1000×g 離心 3 分鐘(zhong)。

【註(zhu)】：

1) 此步(bu)驟必須 37℃條(tiao)件(jian)下離心。

2) 如(ru)果離心機不可控溫(wen)，可(ke)以(yi)不離心，延(yan)長(chang)上壹步驟水(shui)浴(yu)時間，至溶液分(fen)層清(qing)晰(xi)即(ji)可。或(huo)者在室(shi)溫(wen)條(tiao)件(jian)下離心，縮短(duan)離心時間(jian)至(zhi) 1 分鐘。

7. 此時(shi)液體(ti)分(fen)為(wei) 2 層，小心移(yi)除(chu)上層溶液(ye)，即(ji)得到胞質蛋(dan)白(bai)。

8. 留管底(di)部下(xia)層，大(da)約(yue) 50ul 液體(ti)。

【註(zhu)】：

1) 下層為(wei)粘(zhan)稠(chou)狀(zhuang)液體。

2) 未(wei)wan全(quan)分好層時看上去可能(neng)像(xiang) 3 層(ceng)，保留(liu)中間(jian)的(de)界(jie)面層即(ji)可。

9. 用 50-200μl 冷的(de)膜蛋(dan)白(bai)溶(rong)解(jie)液(ye)溶解該下層溶液(ye)，即(ji)得細(xi)菌膜蛋(dan)白(bai)樣(yang)品。

【註(zhu)】：

1) 膜蛋(dan)白(bai)比較(jiao)難(nan)溶(rong)解(jie)，不能很(hen)快(kuai)溶解混勻(yun)，可(ke)以(yi)在加(jia)入溶解液後(hou)稍微吹(chui)打混(hun)勻，然後(hou)置於 4℃冰箱(xiang)靜(jing)置至溶解。中途(tu)用移(yi)液(ye)器(qi)輕(qing)輕(qing)吹(chui)打混(hun)勻壹次(ci)。靜(jing)置後(hou)取(qu)出(chu)再次(ci)用移(yi)液(ye)器(qi)稍微吹(chui)打混(hun)勻即(ji)可。

2) 靜(jing)置直至(zhi)管底(di)透(tou)明膠狀物wan全(quan)溶解。

10. 將(jiang)上述蛋(dan)白(bai)提(ti)取(qu)物定(ding)量(liang)後(hou)分(fen)裝於-80℃冰箱(xiang)保存(cun)備用或(huo)直接(jie)用於下(xia)遊(you)實驗。

【註(zhu)】：

1) 建議(yi)用 BCA 法進(jin)行蛋(dan)白(bai)定(ding)量(liang)。

2) 蛋(dan)白(bai)樣(yang)品-80℃存(cun)放壹年沒有(you)問(wen)題(ti)。註(zhu)意(yi)不要被(bei)蛋(dan)白(bai)酶(mei)水(shui)解掉(diao)，不要被(bei)細(xi)菌汙(wu)染(ran)。

註(zhu)意(yi)事項：

1. 正式實驗前(qian)請選取(qu)幾(ji)個樣本(ben)做預(yu)實驗(yan)，以優化(hua)實(shi)驗(yan)條(tiao)件(jian)，取(qu)得優良實驗效(xiao)果。

2. 螺(luo)旋(xuan)蓋微量(liang)試劑(ji)管裝的(de)試劑(ji)在開(kai)蓋(gai)前(qian)請短(duan)暫離心，將(jiang)蓋(gai)和管內壁(bi)上的(de)液體(ti)離心至管底(di)，避免(mian)開(kai)蓋(gai)時(shi)試(shi)劑(ji)損失。

3. 禁止與(yu)其他(ta)品牌的(de)試劑(ji)混(hun)用，否則會影(ying)響使用效(xiao)果。

4. 樣品或(huo)試劑被(bei)細(xi)菌或(huo)真(zhen)菌汙(wu)染(ran)或(huo)試劑交叉汙染(ran)可能(neng)會導致(zhi)錯(cuo)誤(wu)的(de)結果(guo)。

5. 最好使用壹次(ci)性吸(xi)頭、管、瓶或(huo)玻璃器(qi)皿，可重復使用的(de)玻璃(li)器(qi)皿(min)必須在使用前清(qing)洗並che底(di)清(qing)除(chu)殘留(liu)清(qing)潔劑。

6. 實驗後(hou)完(wan)成後(hou)所(suo)有(you)樣(yang)品及接(jie)觸(chu)過的(de)器皿(min)應(ying)按(an)照規(gui)定(ding)程(cheng)序處(chu)理(li)。

細(xi)菌膜蛋(dan)白(bai) 胞質蛋(dan)白(bai)提(ti)取(qu)試劑盒(he)

產品訂(ding)購(gou)信息(xi)：

P5007  細(xi)菌膜蛋(dan)白(bai)/胞質蛋(dan)白(bai)提(ti)取(qu)試劑盒(he)  50T/100T