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| 品(pin)牌 | NobleRyder/諾博萊(lai)德(de) | 貨(huo)號(hao) | D9088 |
|---|---|---|---|
| 規(gui)格 | 50T / 100T | 供貨(huo)周(zhou)期 | 現(xian)貨 |
| 主(zhu)要(yao)用(yong)途 | 可適用於(yu)各(ge)種(zhong)常(chang)規(gui)操作(zuo),包括(kuo)酶(mei)切、PCR、測序(xu)、文(wen)庫(ku)篩選、連接和轉(zhuan)化等實驗 | 應用領域 | 環保(bao),化工(gong),生(sheng)物(wu)產(chan)業(ye),農(nong)林(lin)牧(mu)漁,制(zhi)藥(yao)/生(sheng)物(wu)制(zhi)藥(yao) |
DNA瓊(qiong)脂(zhi)糖凝(ning)膠回收試(shi)劑盒 質粒提取
NobleRyder D9088 DNA瓊(qiong)脂(zhi)糖凝(ning)膠回收試(shi)劑盒 DNA Extraction Kit
產(chan)品(pin)貨號(hao):D9088
產(chan)品(pin)名(ming)稱:DNA瓊(qiong)脂糖凝膠回收(shou)試(shi)劑盒 DNA Extraction Kit
英(ying)文名(ming)稱:DNA Extraction Kit
產(chan)品(pin)規(gui)格:50T/100T
產(chan)品(pin)簡介:
儲存條(tiao)件:RT,復檢期1年
NobleRyderD9088 DNA瓊(qiong)脂(zhi)糖凝(ning)膠回收試(shi)劑盒本(ben)試(shi)劑盒采(cai)用(yong)可(ke)以高效(xiao)、專(zhuan)壹(yi)結(jie)合(he)DNA的(de)矽(gui)基(ji)質(zhi)材料(liao)和(he)du特(te)的(de)緩(huan)沖(chong)液(ye)系統,從TAE或TBE瓊脂糖凝(ning)膠(jiao)上(shang)回收(shou)DNA片段(duan),同(tong)時(shi)除(chu)去蛋白(bai)質(zhi)、其它有(you)機(ji)化合(he)物(wu)、無(wu)機(ji)鹽(yan)離(li)子及寡(gua)核(he)苷酸(suan)引物(wu)等雜(za)質(zhi)。可回收100bp–10kb大(da)小(xiao)的(de)片(pian)段(duan),回(hui)收(shou)率(lv)大於80%(<100bp和>10kb 的(de)DNA片(pian)段(duan)回(hui)收(shou)率(lv)為30-50%)。使用(yong)本(ben)試(shi)劑盒回收的(de)DNA可(ke)適用於(yu)各(ge)種(zhong)常(chang)規(gui)操作(zuo),包括(kuo)酶(mei)切、PCR、測序(xu)、文(wen)庫(ku)篩選、連接和轉(zhuan)化等實驗。
註(zhu)意(yi)事(shi)項:
1、電(dian)泳時(shi)最(zui)好(hao)使(shi)用新的(de)電(dian)泳緩(huan)沖液(ye),以免影(ying)響電(dian)泳和(he)回收效(xiao)果,如(ru)下壹(yi)步(bu)實驗要求(qiu)較高(gao),則(ze)應盡量使用(yong)TAE電(dian)泳緩(huan)沖液(ye)。
2、切膠時(shi),紫外照射(she)時(shi)間應盡量短,以免對DNA造(zao)成損傷(shang)。
3、回(hui)收(shou)<100bp及>10kb的(de)DNA片(pian)段(duan)時(shi),應加大溶膠液(ye)的(de)體(ti)積(ji),延(yan)長(chang)吸(xi)附和(he)洗(xi)脫(tuo)的(de)時(shi)間。
4、回(hui)收(shou)率與初始DNA量(liang)和洗(xi)脫(tuo)體(ti)積(ji)有(you)關(guan),初始量(liang)越(yue)少(shao)、洗(xi)脫(tuo)體(ti)積(ji)越(yue)小(xiao),回(hui)收率越(yue)低(di)。
5、如(ru)非(fei)指明,所有(you)離(li)心(xin)步(bu)驟均為使用(yong)臺式離心(xin)機(ji)在(zai)室(shi)溫下離(li)心(xin)。
具(ju)體(ti)產(chan)品(pin)的(de)參(can)數以收到(dao)產(chan)品(pin)說明書(shu)的(de)參(can)數為準
操(cao)作(zuo)步(bu)驟(僅供(gong)參考(kao)):
*使(shi)用(yong)前(qian)請先(xian)在(zai)漂(piao)洗(xi)液(ye)中加入無(wu)水乙醇,加入體(ti)積(ji)請參照瓶(ping)體(ti)上(shang)的(de)標(biao)簽。
1.瓊(qiong)脂(zhi)糖凝(ning)膠電(dian)泳後,將(jiang)單(dan)壹的(de)目(mu)的(de) DNA 條(tiao)帶(dai)從瓊(qiong)脂糖(tang)凝(ning)膠中切下(盡量切除(chu)多余部(bu)分),放(fang)入幹(gan)凈(jing)的(de)離(li)心(xin)管中,稱(cheng)取重(zhong)量(liang)。
2.向(xiang)膠塊中(zhong)加入 3 倍(bei)體(ti)積(ji)溶膠液(ye)(如(ru)果凝(ning)膠重為0.1g,其體(ti)積(ji)可(ke)視(shi)為 100μL,則(ze)加入 300μL溶膠液(ye)),50-55℃水浴放(fang)置10min,期間不(bu)斷(duan)溫(wen)和地(di)上下(xia)翻(fan)轉離(li)心(xin)管,以確保(bao)膠塊充(chong)分溶解。
註(zhu)意(yi):溶膠時(shi),如(ru)果溶膠液(ye)變為紅色(se)(正(zheng)常(chang)情(qing)況(kuang)下為淡(dan)黃色(se)),可向(xiang)含有(you) DNA 的(de)膠(jiao)溶液(ye)中加入10-30μL 3M 醋酸(suan)鈉(na)(pH5.2)將(jiang)膠(jiao)溶液(ye)調(tiao)為淡(dan)黃色(se),否則(ze)將(jiang)會(hui)影響DNA與吸附柱(zhu)的(de)結(jie)合(he),影響回收效(xiao)率(lv)。
3.將(jiang)上(shang)壹步(bu)所得溶液(ye)加入壹個吸附柱(zhu)中(zhong)(吸(xi)附柱(zhu)放(fang)入收(shou)集管中),12000rpm離(li)心(xin)30-60s,倒(dao)掉(diao)收(shou)集管中的(de)廢(fei)液(ye),將(jiang)吸(xi)附柱(zhu)重(zhong)新放(fang)入收(shou)集管中。
註(zhu)意(yi):膠(jiao)塊wan全(quan)溶解後最(zui)好(hao)將(jiang)膠(jiao)溶液(ye)溫度(du)降至(zhi)室溫再上柱(zhu),因(yin)為吸附柱(zhu)在(zai)較高(gao)溫(wen)度(du)時(shi)結(jie)合(he)DNA的(de)能(neng)力較弱(ruo)。
4.向(xiang)吸附柱(zhu)中(zhong)加入600μL漂(piao)洗(xi)液(ye)(使用前(qian)請先(xian)檢(jian)查是否已(yi)加入無(wu)水乙醇),12000rpm離心(xin)1min,棄(qi)廢(fei)液(ye),將(jiang)吸(xi)附柱(zhu)放(fang)入收(shou)集管中。
5.向(xiang)吸附柱(zhu)中(zhong)加入600μL漂(piao)洗(xi)液(ye),12000rpm離心(xin)1min,棄(qi)廢(fei)液(ye),將(jiang)吸(xi)附柱(zhu)放(fang)入收(shou)集管中。
6.12000rpm 離(li)心(xin) 2min,盡(jin)量(liang)除(chu)去漂(piao)洗(xi)液(ye)。將(jiang)吸(xi)附柱(zhu)敞(chang)口(kou)置於室溫(wen)或 50℃溫箱放(fang)置數分鐘(zhong),目的(de)是(shi)將(jiang)吸(xi)附柱(zhu)中(zhong)殘(can)余(yu)的(de)漂(piao)洗(xi)液(ye)去除(chu),防(fang)止漂(piao)洗(xi)液(ye)中的(de)乙(yi)醇影響後續的(de)實驗。
7.將(jiang)吸(xi)附柱(zhu)放(fang)入壹(yi)個幹凈的(de)離(li)心(xin)管中,向(xiang)吸附膜(mo)中(zhong)央懸(xuan)空滴加適量經(jing)65℃水浴預(yu)熱的(de)洗(xi)脫(tuo)液(ye),室溫放(fang)置2min,12000rpm離(li)心(xin)1min。
註(zhu)意(yi):
1)為了增加回收效(xiao)率(lv),可(ke)將(jiang)得到(dao)的(de)洗(xi)脫(tuo)液(ye)重新加入吸附柱(zhu)中(zhong),12000rpm再次(ci)離心(xin)1min。
2)洗(xi)脫(tuo)緩(huan)沖液(ye)體(ti)積(ji)不(bu)應少於30μL,體(ti)積(ji)過(guo)小(xiao)影(ying)響回收效(xiao)率(lv)。
3)洗(xi)脫(tuo)液(ye)的(de)pH值對於洗脫(tuo)效(xiao)率(lv)有(you)很(hen)大影(ying)響,若用水做(zuo)洗脫(tuo)液(ye)應保(bao)證(zheng)其pH值在(zai)7.0-8.5之(zhi)間。
8.DNA 產(chan)物(wu)-20℃保(bao)存。
DNA瓊(qiong)脂(zhi)糖凝(ning)膠回收試(shi)劑盒 質粒提取
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D9088 DNA瓊(qiong)脂(zhi)糖凝(ning)膠回收試(shi)劑盒 DNA Extraction Kit 50T
D1198 DNA瓊(qiong)脂(zhi)糖凝(ning)膠回收試(shi)劑盒 DNA Extraction Kit 100T