蛋(dan)白質分(fen)子(zi)中(zhong)存在含有(you)共(gong)軛雙(shuang)鍵的酪(lao)氨suan、se氨酸(suan)、苯(ben)bing氨酸(suan)，使(shi)蛋(dan)白質在270～290nm波長範(fan)圍內(nei)具有(you)吸收(shou)紫(zi)外光的性質，其(qi)中(zhong)酪(lao)氨suan的最大吸收(shou)峰為(wei)275nm，se氨酸(suan)的最大吸收(shou)峰為(wei)280nm，苯(ben)bing氨酸(suan)的最大吸收(shou)峰為(wei)257nm。在上述(shu)波長範(fan)圍內(nei)，蛋(dan)白質溶液的吸收(shou)值(zhi)與其(qi)濃度(du)呈(cheng)正(zheng)比(bi)，可作(zuo)定(ding)量測(ce)定(ding)。
紫外法蛋(dan)白定(ding)量試劑(ji)盒(he) 蛋(dan)白檢(jian)測(ce)

諾(nuo)博萊德(de) 紫(zi)外法蛋(dan)白定(ding)量試劑(ji)盒(he) 蛋(dan)白檢(jian)測(ce)

紫(zi)外法蛋(dan)白定(ding)量試劑(ji)盒(he)

產品(pin)簡介：

蛋白質分(fen)子(zi)中(zhong)存在含有(you)共(gong)軛雙(shuang)鍵的酪(lao)氨suan、se氨酸(suan)、苯(ben)bing氨酸(suan)，使(shi)蛋(dan)白質在270～290nm波長範(fan)圍內(nei)具有(you)吸收(shou)紫(zi)外光的性質，其(qi)中(zhong)酪(lao)氨suan的最大吸收(shou)峰為(wei)275nm，se氨酸(suan)的最大吸收(shou)峰為(wei)280nm，苯(ben)bing氨酸(suan)的最大吸收(shou)峰為(wei)257nm。在上述(shu)波長範(fan)圍內(nei)，蛋(dan)白質溶液的吸收(shou)值(zhi)與其(qi)濃度(du)呈(cheng)正(zheng)比(bi)，可作(zuo)定(ding)量測(ce)定(ding)。

NobleRyder 紫外法蛋(dan)白定(ding)量試劑(ji)盒(he)優點(dian)是(shi)：操作(zuo)迅(xun)速(su)、簡便，不(bu)易受(shou)低濃度(du)鹽(yan)類的幹擾(rao)；缺(que)點是(shi)與標(biao)準(zhun)蛋(dan)白中(zhong)酪(lao)氨suan、se氨酸(suan)含量差(cha)異較大的蛋白質，準(zhun)確(que)性較差(cha)。樣品(pin)中(zhong)含有(you)嘌(piao)呤、嘧啶(ding)及核酸會幹擾(rao)檢(jian)測(ce)結(jie)果。

產品(pin)組(zu)成(cheng)：

自備材料：

1、 分(fen)光光度計(ji)或酶標(biao)儀

2、 96孔板或(huo)離心管(guan)

 具體(ti)產品(pin)的參數以(yi)收到(dao)產品(pin)說明書的參數為(wei)準(zhun)

操作(zuo)步(bu)驟(僅(jin)供(gong)參(can)考(kao))：

1、 用(yong)去離子(zi)水(shui)或(huo)蒸(zheng)餾水稀釋(shi)蛋(dan)白稀釋(shi)液(ye)(10×)至(zhi)1×，即為(wei)蛋白稀釋(shi)工(gong)作(zuo)液(ye)。取(qu)1支(zhi)20mg的蛋白標(biao)準(zhun)，加入20ml蛋白稀釋(shi)工(gong)作(zuo)液(ye)，即(ji)配(pei)制(zhi)成(cheng)蛋(dan)白標(biao)準(zhun)(1mg/ml)，-20℃保存。

2、 標(biao)準(zhun)曲(qu)線(xian)法(fa)：取若幹試(shi)管(guan)或(huo)96孔板，如(ru)下操(cao)作(zuo)以(yi)分(fen)光光度法(fa)為(wei)例。選(xuan)用(yong)1cm的石(shi)英(ying)比(bi)色皿，在280nm處以第1管作(zuo)為(wei)調(tiao)零(ling)點，分(fen)別(bie)檢(jian)測(ce)各管(guan)吸光度，以(yi)A280為(wei)縱坐(zuo)標(biao)，以(yi)蛋(dan)白質濃度(du)為(wei)橫坐(zuo)標(biao)，繪制(zhi)標(biao)準(zhun)曲(qu)線(xian)。

取1ml待測(ce)蛋(dan)白加至(zhi)3ml的蛋白稀釋(shi)工(gong)作(zuo)液(ye)中(zhong)，混(hun)勻(yun)，分(fen)光光度計(ji)或酶標(biao)儀測(ce)定(ding)A280。根據(ju)標(biao)準(zhun)曲(qu)線(xian)計(ji)算出樣(yang)品(pin)的蛋白濃度(du)。

3、 Lowry-Kalckar法(又(you)稱(cheng)280nm和(he)260nm吸收(shou)差(cha)法)：對(dui)於含有(you)核酸的蛋白質，無(wu)需(xu)制(zhi)作標(biao)準(zhun)曲(qu)線(xian)。以(yi)蛋白稀釋(shi)工(gong)作(zuo)液(ye)作(zuo)為(wei)調(tiao)零(ling)點，取(qu)1ml待測(ce)蛋(dan)白加至(zhi)3ml的蛋白稀釋(shi)工(gong)作(zuo)液(ye)中(zhong)，混(hun)勻(yun)，分(fen)光光度計(ji)或酶標(biao)儀測(ce)定(ding)A280 和(he)A260。根據(ju)經驗(yan)公(gong)式計算出待測(ce)樣(yang)品(pin)的蛋白濃度(du)，如(ru)果蛋(dan)白濃度(du)過(guo)高應用(yong)蛋白稀釋(shi)工(gong)作(zuo)液(ye)稀釋(shi)後(hou)再行(xing)檢(jian)測(ce)。

蛋白質濃度(du)(g/L)=1.45×A280-0.74×A280

4、 Waddell法(又(you)稱(cheng)215nm和(he)225nm吸收(shou)差(cha)法)：對(dui)於蛋(dan)白質含量較少(shao)的溶液，適(shi)用(yong)於該(gai)法。取(qu)若幹試管或96孔(kong)板，如(ru)下操(cao)作(zuo)以(yi)分(fen)光光度法(fa)為(wei)例。以蛋白稀釋(shi)工(gong)作(zuo)液(ye)作(zuo)為(wei)調(tiao)零(ling)點，取(qu)1ml蛋白標(biao)準(zhun)(1mg/ml)加至(zhi)3ml的蛋白稀釋(shi)工(gong)作(zuo)液(ye)中(zhong)，混(hun)勻(yun)，分(fen)光光度計(ji)或酶標(biao)儀測(ce)定(ding)A215 和(he)A225。以215nm與225nm吸光度值(zhi)之(zhi)差(cha)(D=A215-A225)為(wei)縱坐(zuo)標(biao)，以(yi)蛋(dan)白濃度(du)為(wei)橫坐(zuo)標(biao)，繪制(zhi)標(biao)準(zhun)曲(qu)線(xian)，再(zai)測(ce)出(chu)未知樣(yang)品(pin)的吸收(shou)差(cha)，即可由標(biao)準(zhun)曲(qu)線(xian)查(zha)出未知樣(yang)品(pin)的蛋白質濃度(du)。或(huo)者(zhe)不(bu)用(yong)制(zhi)作標(biao)準(zhun)曲(qu)線(xian)，直(zhi)接(jie)按照如(ru)下經驗(yan)公(gong)式計算：

蛋白質濃度(du)(g/L)=144×(A215-A225)。

註(zhu)意事(shi)項(xiang)：

1.蛋白標(biao)準(zhun)(BSA)粉(fen)末(mo)溶解於蛋(dan)白稀釋(shi)工(gong)作(zuo)液(ye)，該(gai)液中(zhong)含有(you)防腐劑(ji)，不(bu)影(ying)響(xiang)後續檢(jian)測(ce)，該(gai)蛋白標(biao)準(zhun)液(ye)-20℃保存。

2.待測(ce)蛋(dan)白溶解於什麽樣(yang)的稀釋(shi)液(ye)中(zhong)，蛋(dan)白標(biao)準(zhun)也(ye)宜(yi)溶解於什麽樣(yang)的稀釋(shi)液(ye)中(zhong)，否(fou)者(zhe)待測(ce)蛋(dan)白與蛋白標(biao)準(zhun)中(zhong)所含非(fei)蛋(dan)白成(cheng)分(fen)不(bu)壹(yi)致(zhi)，有(you)可(ke)能(neng)導(dao)致測(ce)定(ding)不(bu)準(zhun)確(que)。

3.如(ru)果沒(mei)有(you)分(fen)光光度計(ji)，也可(ke)以(yi)使(shi)用(yong)酶標(biao)儀測(ce)定(ding)，但應考(kao)慮(lv)根據(ju)比(bi)色皿的最小檢(jian)測(ce)體(ti)積(ji)。

4.為(wei)了您(nin)的安全(quan)和(he)健(jian)康(kang)，請(qing)穿實驗(yan)服(fu)並戴壹(yi)次(ci)性手套(tao)操作(zuo)。

有效(xiao)期(qi)： 12個月(yue)有(you)效(xiao)。蛋白標(biao)準(zhun)配(pei)制(zhi)成(cheng)溶液後(hou)應-20℃凍存。

紫外法蛋(dan)白定(ding)量試劑(ji)盒(he) 蛋(dan)白檢(jian)測(ce)

訂購信(xin)息(xi)：

P2815 紫外法蛋(dan)白定(ding)量試劑(ji)盒(he)  250T/500T