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聯(lian)系電(dian)話:10-62817090
| 品牌(pai) | NobleRyder/諾博萊德(de) | 貨號(hao) | R9088 |
|---|---|---|---|
| 規格(ge) | 50T/100T | 供貨周(zhou)期(qi) | 現(xian)貨 |
| 主要用(yong)途 | 總(zong)RNA提(ti)取試(shi)劑(ji)盒(he) | 應(ying)用(yong)領域 | 環(huan)保(bao),化(hua)工(gong),生(sheng)物產業(ye),農(nong)林牧(mu)漁(yu),制(zhi)藥/生(sheng)物制(zhi)藥 |
NobleRyder R9088 總(zong)RNA提(ti)取試(shi)劑(ji)盒(he) Total RNA Extraction Kit
產品貨號(hao):R9088
產品名(ming)稱:總RNA提(ti)取(qu)試(shi)劑(ji)盒(he) Total RNA Extraction Kit
英(ying)文(wen)名稱:Total RNA Extraction Kit
總(zong)RNA提(ti)取試(shi)劑(ji)盒(he)-常(chang)備(bei)現(xian)貨
產品規(gui)格:50T/100T
產品簡(jian)介(jie):
儲(chu)存條件:2-8℃,避(bi)光,有(you)效期1年(nian)
具(ju)體(ti)產品的(de)參數以收到(dao)產品說明(ming)書(shu)的(de)參數為準
NobleRyder R9088 總(zong)RNA提(ti)取試(shi)劑(ji)盒(he) Total RNA Extraction Kit
運(yun)輸(shu)溫度:常(chang)溫(wen)運(yun)輸(shu)
操(cao)作(zuo)步驟:
1. 樣(yang)品處(chu)理: a. 植(zhi)物組(zu)織(zhi):取新鮮或(huo)-70℃凍(dong)存100mg組(zu)織(zhi)在液(ye)氮(dan)中(zhong)研(yan)磨(mo),把粉(fen)末(mo)加(jia)入到(dao)1ml裂解液(ye)中(zhong)混(hun)勻(yun)。
b. 動物組(zu)織(zhi):取新鮮或(huo)-70℃凍(dong)存100mg組(zu)織(zhi)加(jia)1ml裂解液(ye),用(yong)組(zu)織(zhi)研(yan)磨(mo)杵(chu)或(huo)勻(yun)漿(jiang)器勻(yun)漿(jiang)處理。
c. 貼(tie)壁(bi)細胞:直(zhi)接(jie)在培養(yang)板(ban)中(zhong)加(jia)入裂解液(ye)裂解細(xi)胞,每(mei)106細胞加(jia)1ml 裂解液(ye)。用(yong)取(qu)樣(yang)器(qi)吹(chui)打(da)混(hun)勻(yun)。
d. 細(xi)胞懸(xuan)液:離(li)心(xin)收集細胞。每(mei)106動物、植(zhi)物(wu)和(he)酵(jiao)母細胞或(huo)每107細(xi)菌細胞加(jia)1ml裂解液(ye)混(hun)勻(yun)。
e. 血(xue)液處理:取(qu)0.2-1ml新鮮血(xue)液加(jia)3倍體(ti)積(ji)紅細胞裂解液(ye),混(hun)勻(yun)後室(shi)溫放置(zhi)10分(fen)鐘,10000rpm離(li)心(xin)1分(fen)鐘。棄(qi)上清(qing),若沈澱(dian)含有(you)紅細胞,可(ke)加(jia)入2倍(bei)體(ti)積(ji)紅細胞裂解液(ye)重復(fu)裂解步驟。離(li)心(xin)後沈澱(dian)加(jia)入1 ml裂解液(ye)混(hun)勻(yun)。
2. 將(jiang)處(chu)理後的(de)樣品在(zai)室(shi)溫放置(zhi)5分(fen)鐘,使得核(he)酸蛋(dan)白復(fu)合物wan全(quan)分(fen)離(li)。
3. 向(xiang)勻(yun)漿(jiang)樣品中(zhong)加(jia)0.2ml氯仿(fang),蓋(gai)好管蓋,劇(ju)烈(lie)振(zhen)蕩15秒,室(shi)溫放置(zhi)3-5分(fen)鐘。
4. 2-8℃ 12000 rpm離(li)心(xin)10分(fen)鐘。RNA主(zhu)要在上層(ceng)無(wu)色(se)的(de)水相(xiang)中(zhong),把水(shui)相轉移到(dao)新管中(zhong),不(bu)要吸(xi)到(dao)沈澱(dian)。
5. 吸(xi)附柱(zhu)前處理:在(zai)吸(xi)附柱(zhu)中(zhong)加(jia)入500ul 洗柱液(ye),室(shi)溫放置(zhi)2分(fen)鐘,2-8℃ 12,000 rpm離(li)心(xin)2min,棄(qi)廢液。
6. 第(di)4步收集(ji)的(de)上清(qing)中(zhong)加(jia)入200ul無(wu)水乙(yi)醇混(hun)勻(yun),加(jia)入吸(xi)附柱(zhu)靜(jing)置2分(fen)鐘,2-8℃ 12000rpm離(li)心(xin)2min,棄(qi)廢液。
7. 向(xiang)吸(xi)附柱(zhu)中(zhong)加(jia)入600ul漂(piao)洗液(使用(yong)前(qian)請(qing)先檢查是否已(yi)加(jia)入無(wu)水乙(yi)醇),2-8℃ 12,000 rpm離(li)心(xin)2min,棄(qi)廢液。
8. 向(xiang)吸(xi)附柱(zhu)中(zhong)加(jia)入600ul漂(piao)洗液,2-8℃ 12,000 rpm離(li)心(xin)2min,棄(qi)廢液。
9. 12000rpm離(li)心(xin)2min,棄(qi)掉(diao)收集管,將(jiang)吸(xi)附柱(zhu)置於室(shi)溫放置(zhi)數分(fen)鐘將(jiang)吸(xi)附柱(zhu)中(zhong)殘余的(de)漂洗液去(qu)除(chu)。
10. 將(jiang)吸(xi)附柱(zhu)放入(ru)新管中(zhong),向(xiang)膜中(zhong)央(yang)滴(di)加(jia)50-100ul RNase free ddH2O,室(shi)溫放置(zhi)5min,12000rpm室(shi)溫離(li)心(xin)2min即得到(dao)RNA。
註意事項:
1,所有(you)相關器皿耗(hao)材(cai)都應(ying)為RNase-free產品,操(cao)作(zuo)過程要小心(xin),帶口(kou)罩(zhao)、手(shou)套(tao)避免(mian)環(huan)境(jing)中(zhong)RNA酶(mei)汙染(ran)樣品。
2,RNA在(zai)水(shui)溶液(ye)中(zhong)OD值可(ke)能(neng)在(zai)1.5-1.9之間,但(dan)這(zhe)並(bing)不(bu)表示(shi)RNA不(bu)純,需電(dian)泳(yong)檢測。
3. 血(xue)液處理中(zhong),紅細胞裂解液(ye)需(xu)自備。
總(zong)RNA提(ti)取試(shi)劑(ji)盒(he)-常(chang)備(bei)現(xian)貨
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R9088 總(zong)RNA提(ti)取試(shi)劑(ji)盒(he) Total RNA Extraction Kit 50T/100T