本試(shi)劑(ji)盒(he)適(shi)用(yong)於(yu)各(ge)種 RNA制品的(de)反(fan)轉(zhuan)錄反(fan)應。
通(tong)用(yong)反(fan)轉(zhuan)錄試(shi)劑(ji)盒(he)M-MLV不含(han)Taq酶 核(he)酸(suan)檢(jian)測

NobleRyder RP9983 通(tong)用(yong)反(fan)轉(zhuan)錄試(shi)劑(ji)盒(he)(M-MLV，不含(han)Taq酶) Universal RT-PCR Kit(M-MLV, free Taq polymerase)

產品(pin)貨(huo)號：RP9983

產品(pin)名(ming)稱：通(tong)用(yong)反(fan)轉(zhuan)錄試(shi)劑(ji)盒(he)(M-MLV，不含(han)Taq酶) Universal RT-PCR Kit(M-MLV, free Taq polymerase)

英(ying)文(wen)名(ming)稱：Universal RT-PCR Kit(M-MLV, free Taq polymerase)

產品(pin)規格(ge)：50T/100T

通(tong)用(yong)反(fan)轉(zhuan)錄試(shi)劑(ji)盒(he)M-MLV不含(han)Taq酶 核(he)酸(suan)檢(jian)測

產(chan)品簡介(jie)：

儲(chu)存條件：Store at -20℃，1 year.

具體產品的(de)參數(shu)以(yi)收(shou)到(dao)產品說明(ming)書(shu)的(de)參數(shu)為準(zhun)

NobleRyder RP9983 通(tong)用(yong)反(fan)轉(zhuan)錄試(shi)劑(ji)盒(he)(M-MLV，不含(han)Taq酶)產(chan)品簡介(jie)：

本試(shi)劑(ji)盒(he)適(shi)用(yong)於(yu)各(ge)種 RNA制品的(de)反(fan)轉(zhuan)錄反(fan)應。它(ta)采用(yong)M-MLV進行反轉(zhuan)錄反(fan)應，能(neng)夠獲(huo)得較(jiao)長的(de)反(fan)轉(zhuan)錄產(chan)物用(yong)於(yu)後續的(de)PCR擴增和分子克(ke)隆(long)實(shi)驗。

本(ben)試劑(ji)盒(he)中(zhong)配(pei)置(zhi)的(de)酶(mei)為進口的(de)酶(mei)。RT酶(mei)采(cai)用(yong)進口的(de)M-MLV，所(suo)以(yi)cDNA更(geng)長，基因的(de)信息(xi)保(bao)留(liu)得更(geng)完整！反(fan)轉(zhuan)錄過程中(zhong)特異(yi)的(de)RNase抑(yi)制劑(ji)可有(you)效(xiao)降(jiang)低由於(yu)外源RNase汙染(ran)而(er)導致(zhi)實驗失敗的(de)風(feng)險(xian)。本(ben)試(shi)劑(ji)盒(he)使用(yong)方(fang)便(bian)、快(kuai)捷(jie)，可廣泛用(yong)於(yu)cDNA克隆(long)及(ji)目(mu)的(de)基(ji)因檢(jian)測等(deng)分子生(sheng)物(wu)學實(shi)驗。

註意(yi)事項(xiang)：

1、 用(yong)於(yu)cDNA合(he)成反應的(de)相關(guan)試(shi)劑(ji)和耗(hao)材盡可(ke)能(neng)用(yong)DEPC進行處(chu)理，並在高壓(ya)滅菌(jun)後(hou)使用(yong)。有(you)些(xie)試劑(ji)不能(neng)高壓滅菌時，首(shou)先(xian)用(yong)經(jing)過滅菌(jun)的(de)器(qi)具(ju)、水等(deng)配(pei)制溶液後，再(zai)將(jiang)溶(rong)液進行過濾除菌(jun)處(chu)理。

2、 試劑(ji)盒(he)的(de)各(ge)組(zu)分應在-20℃保(bao)存，避(bi)免反(fan)復(fu)凍融，有效(xiao)期12個(ge)月(yue)。

3、 RNA樣(yang)品要(yao)避(bi)免反(fan)復(fu)多(duo)次凍融，應使RNA在冰(bing)浴(yu)中(zhong)處(chu)於(yu)融化(hua)狀(zhuang)態。

操(cao)作(zuo)步驟（僅供(gong)參考(kao)）：

壹(yi)、反轉(zhuan)錄反(fan)應

關(guan)於(yu)逆(ni)轉(zhuan)錄引(yin)物的(de)選(xuan)擇(ze) :

（1）如果模板為真(zhen)核生(sheng)物(wu)來(lai)源，建(jian)議(yi)用(yong) Oligo(dT)16 ， Oligo(dT)16可(ke)以(yi)與(yu)真(zhen)核生(sheng)物(wu) mRNA 的(de) 3’Poly A 尾(wei)配(pei)對，可(ke)獲(huo)得高(gao)產量(liang)的(de)全(quan)長 cDNA。（2）模板為原(yuan)核生(sheng)物(wu) RNA 的(de)反(fan)轉(zhuan)錄請(qing)選(xuan)用(yong) Random引(yin)物或(huo)者基因特異(yi)性(xing)引(yin)物。Random 引(yin)物適(shi)用(yong)於(yu)mRNA、tRNA和rRNA等(deng)所(suo)有(you)RNA的(de)反(fan)轉(zhuan)錄反(fan)應，對(dui)物(wu)種沒有限(xian)制，病毒、細菌(jun)、植(zhi)物(wu)、動(dong)物(wu)等(deng)都可使用(yong)。

1、在冰(bing)浴(yu)的(de)無(wu)RNase的(de)離(li)心(xin)管(guan)中(zhong)加(jia)入如(ru)下(xia)反應(ying)成(cheng)分：

1-5μg 總 RNA或50-500ng mRNA

2μLOligo(dT)16或(huo) 2μLRandom 或 2 pmole 基(ji)因特異(yi)性(xing)引(yin)物

補(bu)RNase-free ddH2O 至 14.5μL

2、70℃保(bao)溫(wen)5min後迅速(su)在冰(bing)上冷卻(que)2min，簡(jian)短離(li)心收(shou)集(ji)反應液後(hou)加(jia)入以(yi)下(xia)各(ge)組(zu)分：

4μL5×M-MLVBuffer

1μLdNTPs

0.5μL RNasin

1μLM-MLV

3、42℃溫浴(yu)60min，如果是用(yong)Random 引(yin)物，請(qing)先將離心管置(zhi)25℃溫(wen)浴10min，再(zai)42℃溫(wen)浴60min。

4、95℃加(jia)熱(re)5min終止反應(ying)，置(zhi)冰(bing)上進行後續實驗或(huo)-20℃保(bao)存。

5、若用(yong)於(yu)後續PCR擴增,用(yong)RNase-freeddH2O將(jiang)反(fan)應(ying)體系(xi)稀(xi)釋(shi)到(dao)50μL，取(qu)2-5μL作(zuo)為PCR反(fan)應模板。

註意(yi)事項(xiang)：

1、用(yong)於(yu)cDNA合(he)成反應的(de)相關(guan)試(shi)劑(ji)和耗(hao)材盡可(ke)能(neng)用(yong)DEPC進行處(chu)理，並在高壓(ya)滅菌(jun)後(hou)使用(yong)。有(you)些(xie)試劑(ji)不能(neng)高壓滅菌時，首(shou)先(xian)用(yong)經(jing)過滅菌(jun)的(de)器(qi)具(ju)、水等(deng)配(pei)制溶液後，再(zai)將(jiang)溶(rong)液進行過濾除菌(jun)處(chu)理。

2、試劑(ji)盒(he)的(de)各(ge)組(zu)分應在-20℃保(bao)存，避(bi)免反(fan)復(fu)凍融，有效(xiao)期12個(ge)月(yue)。

3、RNA樣(yang)品要(yao)避(bi)免反(fan)復(fu)多(duo)次凍融，應使RNA在冰(bing)浴(yu)中(zhong)處(chu)於(yu)融化(hua)狀(zhuang)態。

通(tong)用(yong)反(fan)轉(zhuan)錄試(shi)劑(ji)盒(he)M-MLV不含(han)Taq酶 核(he)酸(suan)檢(jian)測

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