SABC是(shi)專(zhuan)為免疫(yi)組化和其(qi)他(ta)免疫(yi)檢測而設計的，用(yong)以(yi)顯(xian)示(shi)組織和細(xi)胞(bao)中(zhong)抗(kang)原(yuan)分(fen)布(bu)。鏈(lian)黴親和素(su)(StreptAvidin)是(shi)壹種(zhong)從(cong)鏈(lian)黴菌中(zhong)提(ti)取的蛋白質，同(tong)親和素(su)壹樣(yang)，對(dui)生wu素有(you)極(ji)gao的親和力，親(qin)和素(su)是(shi)壹個(ge)堿(jian)性蛋白質（PI=10），經(jing)改造(zao)後(hou)可(ke)以(yi)轉(zhuan)變(bian)成(cheng)中(zhong)性蛋白質。
SABC(小(xiao)鼠(shu)IgG)-POD kit SABC法

諾(nuo)博(bo)萊(lai)德(de) SABC(小鼠(shu)IgG)-POD kit  SABC法

NobleRyder SA8899 SABC(小鼠(shu)IgG)-POD kitSABC(Mouse IgG)-POD Kit

產品貨號：SA8899

產品名稱(cheng)：SABC(小鼠(shu)IgG)-POD kitSABC(Mouse IgG)-POD Kit

英(ying)文(wen)名稱(cheng)：SABC(Mouse IgG)-POD Kit

產品規(gui)格(ge)：kit

產品簡(jian)介(jie)：

儲(chu)存條件(jian)：-20℃，avoid light，1 year

具(ju)體產品的參數(shu)以(yi)收(shou)到產品說(shuo)明書(shu)的參數(shu)為準(zhun)

NobleRyder SA8899 SABC(小鼠(shu)IgG)-POD kitSABC(Mouse IgG)-POD Kit 適合(he)於(yu)壹抗(kang)為小(xiao)鼠(shu)IgG的免疫(yi)組化實(shi)驗(yan)DAB顯色(se)。

SABC是(shi)專(zhuan)為免疫(yi)組化和其(qi)他(ta)免疫(yi)檢測而設計的，用(yong)以(yi)顯(xian)示(shi)組織和細(xi)胞(bao)中(zhong)抗(kang)原(yuan)分(fen)布(bu)。鏈(lian)黴親和素(su)(StreptAvidin)是(shi)壹種(zhong)從(cong)鏈(lian)黴菌中(zhong)提(ti)取的蛋白質，同(tong)親和素(su)壹樣(yang)，對(dui)生wu素有(you)極(ji)gao的親和力，親(qin)和素(su)是(shi)壹個(ge)堿(jian)性蛋白質（PI=10），經(jing)改造(zao)後(hou)可(ke)以(yi)轉(zhuan)變(bian)成(cheng)中(zhong)性蛋白質。鏈(lian)黴親和素(su)等(deng)電點接(jie)近中(zhong)性，對(dui)組織和細(xi)胞(bao)的非特異吸附很低(di)，因(yin)此(ci)基(ji)於(yu)鏈(lian)黴親和素(su)的免疫(yi)組化方(fang)法背景很(hen)低(di)。SABC即(ji)StreptAvidin—Biotin Complex，SABC大(da)約可(ke)形成(cheng)壹百(bai)個(ge)左右(you)的過氧(yang)化物酶(mei)和五十(shi)個(ge)左(zuo)右(you)的鏈(lian)黴親和素(su)所構成的復合(he)物。大(da)量(liang)的酶將保(bao)證(zheng)SABC具(ju)有很(hen)高的敏(min)感(gan)性。

操(cao)作(zuo)步(bu)驟(zhou):（以(yi)石(shi)蠟(la)切(qie)片為例）

1. 切(qie)片常(chang)規(gui)脫(tuo)蠟(la)至(zhi)水(shui)(三次(ci)二(er)甲(jia)苯，三次(ci)乙醇)。

2. 3% H2O2 室溫(wen)處理5-10分(fen)鐘(zhong)以(yi)滅活內源性酶(mei)。蒸餾水(shui)洗(xi)3次。

3.可選(xuan)步(bu)聚(ju)：

a、熱(re)修(xiu)復(fu)抗(kang)原，將切(qie)片浸入 0.01M 檸(ning)檬(meng)酸(suan)鈉(na)緩沖(chong)液(ye)（PH6.0）,電爐或(huo)微(wei)波(bo)爐加(jia)熱(re)至(zhi)沸騰(teng) 後斷(duan)電，間(jian)隔(ge) 5-10分(fen)鐘(zhong)後，反復1-2次。冷卻(que)後PBS（pH7.2-7.6）洗(xi)滌1-2次(ci)。

b、酶消化，滴加(jia)消化液(ye)，37℃10分鐘(zhong)，PBS（pH7.2-7.4）洗(xi)滌2-3次(ci)。

c、跳(tiao)過此(ci)步(bu)，直(zhi)接(jie)進(jin)入下(xia)壹步(bu)。

4.  滴加(jia)5% BSA封(feng)閉(bi)液(ye),室溫(wen)20分(fen)鐘(zhong)。甩去多(duo)余(yu)液(ye)體, 免洗(xi)。

5.  用(yong)稀釋液(ye)將壹抗(kang)按壹定(ding)比例稀釋（稀釋後的壹抗(kang)4℃可(ke)保存壹周(zhou)），也可另(ling)行購(gou)買抗體(ti)稀(xi)釋液(ye)。滴加(jia)稀(xi)釋的壹抗(kang)37℃ 孵育1小時(shi)左右或(huo)20℃ 2小(xiao)時(shi)左右，也可4℃過夜(ye)。PBS（pH7.2-7.4）洗(xi)滌3次(ci)，每(mei)次(ci)2分(fen)鐘(zhong)。（壹抗(kang)的稀釋度(du)、孵育時(shi)間(jian)和溫(wen)度(du)與(yu)染色(se)強(qiang)度(du)、背景有(you)直(zhi)接(jie)關系(xi)。壹般(ban)來說，陽性染(ran)色(se)強(qiang)度(du)不(bu)夠(gou)時(shi)，可提(ti)高壹抗(kang)濃(nong)度(du)和延長孵育時(shi)間(jian)；背(bei)景過高時(shi)，可降(jiang)低(di)壹抗(kang)濃(nong)度(du)和縮短孵育時(shi)間(jian)。）

6． 根(gen)據用(yong)量，用(yong)稀釋液(ye)將Bio-羊(yang)抗(kang)小(xiao)鼠(shu)IgG濃縮液(ye)按1:100稀(xi)釋成工(gong)作(zuo)液(ye)(1ml稀釋液(ye)加(jia)入(ru)10ul Bio-羊抗小(xiao)鼠(shu)IgG濃縮液(ye)混勻(yun)，此(ci)工作(zuo)液(ye)4℃可保(bao)存壹周(zhou))。滴加(jia)Bio-羊(yang)抗小鼠(shu)IgG工作(zuo)液(ye),20-37℃ 孵育30分鐘(zhong)。PBS（pH7.2-7.4）洗(xi)滌3次(ci)，每(mei)次(ci)2分(fen)鐘(zhong)。

7．根(gen)據使用(yong)量，用(yong)稀釋液(ye)將SABC-POD濃(nong)縮液(ye)按1:100稀(xi)釋成工(gong)作(zuo)液(ye)(1ml稀釋液(ye)加(jia)入(ru)10ul SABC-POD濃縮液(ye)混勻(yun)，此(ci)工作(zuo)液(ye)4℃可保(bao)存壹周(zhou))。滴加(jia)SABC-POD工(gong)作(zuo)液(ye),20-37℃，30分鐘(zhong)。PBS （pH7.2-7.4）洗(xi)滌4次(ci)，每(mei)次(ci)5

分鐘(zhong)。

8．DAB顯色(se):根(gen)據用(yong)量，用(yong)PBS（pH7.2-7.4）配制(zhi)，按1ml PBS加(jia)入(ru)50ul 20×DAB顯色(se)液(ye)A，加(jia)入(ru)50ul 20×DAB顯色(se)液(ye)B 。充分(fen)混(hun)勻(yun)後(hou)滴加(jia)到(dao)切(qie)片上。室溫(wen)顯(xian)色(se)，鏡(jing)下控制(zhi)反應(ying)時(shi)間(jian)，壹般(ban)在(zai)5-30分(fen)鐘(zhong)之間(jian)。蒸餾水(shui)洗(xi)滌終(zhong)止(zhi)反應(ying)。

9．蘇(su)木(mu)素(su)輕度(du)復染(ran)。脫(tuo)水(shui),透明,封(feng)片。顯微(wei)鏡(jing)觀察。

對於細胞(bao)爬(pa)片，固(gu)定後(hou)，PBS漂洗(xi)兩次(ci)，再(zai)用(yong)0.5% Triton X-100室溫(wen)孵育20分鐘(zhong)，PBS漂洗(xi)兩次(ci)，3% H2O2處理15分(fen)鐘(zhong)；PBS漂洗(xi)兩次(ci)，接(jie)上(shang)述第4步(bu)。

10．對於冰凍切(qie)片，固(gu)定後(hou)，PBS漂洗(xi)兩次(ci)，接(jie)上(shang)述第二(er)步(bu)。

註意(yi)事(shi)項(xiang)：

如果(guo)染色(se)背(bei)景過高，在(zai)SABC反應(ying)之(zhi)後(hou)，DAB顯(xian)色(se)之(zhi)前,用(yong)加(jia)有(you)0.01—0.02% TWEEN-20的PBST（pH7.2-7.4）洗(xi)滌切(qie)片4次，PBS洗(xi)2次，然(ran)後(hou)DAB顯(xian)色(se)。

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