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| 品牌(pai) | NobleRyder/諾(nuo)博萊(lai)德(de) | 貨號(hao) | SA8800 |
|---|---|---|---|
| 規(gui)格(ge) | 1 kit | 供貨周(zhou)期 | 現(xian)貨(huo) |
| 主要用途(tu) | 適(shi)合於壹抗(kang)為(wei)兔(tu)IgG的(de)免疫組(zu)化實驗AP顯(xian)色。 | 應(ying)用領(ling)域 | 環(huan)保(bao),化(hua)工(gong),生物(wu)產業(ye),農(nong)林(lin)牧漁(yu),制(zhi)藥/生物(wu)制藥 |
諾博萊(lai)德(de) SABC(兔IgG)-AP kit SABC法
NobleRyder SA8800 SABC(兔IgG)-AP kitSABC(Rabbit IgG)-AP Kit
產品貨號(hao):SA8800
產品名稱:SABC(兔IgG)-AP kitSABC(Rabbit IgG)-AP Kit
英(ying)文名稱:SABC(Rabbit IgG)-AP Kit
產品規格(ge):kit
產品簡介:
儲存條(tiao)件(jian):-20℃,avoid light,1 year
具體產品的(de)參(can)數(shu)以收到產品說(shuo)明書(shu)的(de)參(can)數(shu)為(wei)準(zhun)
NobleRyder SA8800 SABC(兔IgG)-AP kitSABC(Rabbit IgG)-AP Kit 適(shi)合於壹抗(kang)為(wei)兔(tu)IgG的(de)免疫組(zu)化實驗AP顯(xian)色。
SABC 是專(zhuan)為(wei)免疫組(zu)化和(he)其(qi)他(ta)免疫檢(jian)測(ce)而(er)設計(ji)的(de),用(yong)以(yi)顯(xian)示(shi)組(zu)織(zhi)和(he)細(xi)胞(bao)中抗(kang)原(yuan)分布(bu)。鏈(lian)黴親和(he)素(su)(StreptAvidin)是(shi)壹(yi)種(zhong)從(cong)鏈(lian)黴菌(jun)中提(ti)取(qu)的(de)蛋(dan)白(bai)質(zhi),同親和(he)素(su)壹(yi)樣(yang),對(dui)生wu素有極gao的(de)親和(he)力(li),親和(he)素(su)是(shi)壹(yi)個(ge)堿(jian)性蛋(dan)白(bai)質(zhi)(IP=10),經(jing)改造後可以(yi)轉變(bian)成(cheng)中性蛋(dan)白(bai)質(zhi)。鏈(lian)黴親和(he)素(su)等電點(dian)接(jie)近(jin)中性,對(dui)組織(zhi)和(he)細(xi)胞(bao)的(de)非(fei)特(te)異(yi)吸附很低(di),基(ji)於鏈黴親和(he)素(su)的(de)免疫組(zu)化方法背景很(hen)低(di)。SABC 即(ji)StreptAvidin—Biotin Complex。SABC 大約(yue)可形成壹百個(ge)左右(you)的(de)過(guo)氧(yang)化物(wu)酶和五(wu)十(shi)個(ge)左右(you)的(de)鏈(lian)黴親和(he)素(su)所(suo)構(gou)成的(de)復合物(wu)。大量的(de)酶將保(bao)證(zheng)SABC具(ju)有(you)很高的(de)敏感(gan)性。
實驗步驟(zhou):(以(yi)石蠟(la)切(qie)片(pian)為(wei)例(li),僅作參考)
1. 切片常規脫蠟(la)至水(三(san)次二甲(jia)苯,三(san)次乙(yi)醇)。
2. 可選步聚(ju):a、熱(re)修(xiu)復抗(kang)原(yuan), b、酶消化(hua), c、跳過(guo)此步,直接(jie)進(jin)入(ru)下(xia)壹步。
3. 滴加(jia)5%BSA封閉(bi)液(ye),室溫20分鐘(zhong)。甩去多余液(ye)體(ti), 不(bu)洗。
4. 用稀釋(shi)液(ye)將(jiang)壹抗(kang)按壹(yi)定(ding)比(bi)例(li)稀釋(shi)(稀釋(shi)後(hou)的(de)壹(yi)抗(kang)4℃可保(bao)存壹周(zhou)),也(ye)可另行(xing)購(gou)買(mai)抗(kang)體稀釋(shi)液(ye)。滴(di)加(jia)稀釋(shi)的(de)壹(yi)抗(kang)37 ℃ 1小(xiao)時(shi)左右(you)或20℃時2小(xiao)時(shi)左右(you)。也(ye)可4℃過(guo)夜(ye)。PBS(pH7.2-7.4)洗2分鐘(zhong)×3次(ci)。(壹抗(kang)的(de)稀釋(shi)度、孵(fu)育(yu)時(shi)間(jian)和溫度與(yu)染色強度、背(bei)景有(you)直接(jie)關(guan)系(xi)。具體(ti)稀釋(shi)度和(he)孵(fu)育(yu)時(shi)間(jian)參考壹(yi)抗(kang)生產廠家(jia)說(shuo)明書(shu)。)
5. 根據用量,用稀釋(shi)液(ye)將(jiang)Bio-羊(yang)抗(kang)兔IgG濃縮(suo)液(ye)按1:100稀釋(shi)成(cheng)工(gong)作液(ye)(1ml稀釋(shi)液(ye)加(jia)入(ru)10ul Bio-羊(yang)抗(kang)兔IgG濃縮(suo)液(ye)混(hun)勻。此工(gong)作液(ye)4℃可(ke)保(bao)存壹周(zhou)).滴(di)加(jia)Bio-羊(yang)抗(kang)兔IgG工(gong)作液(ye),20-37℃ 30分鐘(zhong)。PBS(pH7.2-7.4) 洗(xi)2分鐘(zhong)×3次(ci)。
6.根據使用(yong)量,用稀釋(shi)液(ye)將(jiang)SABC-AP濃縮(suo)液(ye)按1:100稀釋(shi)成(cheng)工(gong)作液(ye)(1ml稀釋(shi)液(ye)加(jia)入(ru)10ul SABC-AP濃縮(suo)液(ye)混(hun)勻。此工(gong)作液(ye)4℃可(ke)保(bao)存壹周(zhou)).滴(di)加(jia)SABC-AP工(gong)作液(ye),20-37℃,30分鐘(zhong)。PBS (pH7.2-7.4)洗(xi)5分鐘(zhong)×4次(ci)。
7.根據用量,1ml AP緩(huan)沖(chong)液(ye)中加(jia)入(ru)40ul NBT溶(rong)液(ye),混(hun)勻後再(zai)加(jia)入(ru)40ul BCIP溶(rong)液(ye)。此(ci)工(gong)作液(ye)現(xian)用(yong)現(xian)配(pei)。室溫顯(xian)色, 鏡(jing)下(xia)控(kong)制反應(ying)時間(jian)。蒸(zheng)餾水洗(xi)滌(di)終(zhong)止(zhi)反應(ying)。
對(dui)於冰凍(dong)切(qie)片(pian),固(gu)定(ding)後,PBS漂(piao)洗兩次(ci),接(jie)上(shang)述第(di)二步。
註意(yi)事項:
如果(guo)染色背景過(guo)高,在(zai)SABC反應(ying)之後(hou),AP顯(xian)色之前(qian),用(yong)加(jia)有0.01—0.02% TWEEN-20的(de)PBST(pH7.2-7.4)洗(xi)滌(di)切(qie)片4次(ci),PBS 洗(xi)2次(ci),然(ran)後AP顯(xian)色。因為(wei)免疫組(zu)化指標眾多,標本不(bu)壹,此步驟(zhou)僅作參考。
SABC(兔IgG)-AP kit SABC法
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SA8800 SABC(兔IgG)-AP kitSABC(Rabbit IgG)-AP Kit 1kit