SABC 是(shi)專(zhuan)為(wei)免疫組化(hua)和其(qi)他免疫檢測(ce)而設計(ji)的，用(yong)以顯示組織(zhi)和(he)細(xi)胞(bao)中(zhong)抗(kang)原(yuan)分布。鏈(lian)黴(mei)親和(he)素(StreptAvidin)是(shi)壹種(zhong)從鏈(lian)黴(mei)菌中(zhong)提(ti)取(qu)的蛋白質(zhi)，同(tong)親(qin)和(he)素壹樣，對生wu素(su)有(you)極(ji)gao的親和力(li)，親和(he)素(su)是(shi)壹個(ge)堿(jian)性(xing)蛋白(bai)質(zhi)（IP=10）經(jing)改造後可(ke)以轉變成中(zhong)性(xing)蛋白(bai)質(zhi)。鏈(lian)黴(mei)親和(he)素等(deng)電點接(jie)近(jin)中性(xing)，對組織(zhi)和(he)細(xi)胞(bao)的非(fei)特異(yi)吸(xi)附(fu)很(hen)低，基於(yu)鏈(lian)黴(mei)親和(he)素的免疫組化(hua)方法背景(jing)很(hen)低
SABC(山(shan)羊IgG)-POD kit SABC法(fa)

諾(nuo)博(bo)萊(lai)德 SABC(山(shan)羊IgG)-POD kit SABC法(fa)

NobleRyder SA8819 SABC(山(shan)羊IgG)-POD kitSABC(Goat IgG)-POD Kit

產(chan)品(pin)貨號(hao)：SA8819

產(chan)品(pin)名稱：SABC(山(shan)羊IgG)-POD kitSABC(Goat IgG)-POD Kit

英文名(ming)稱：SABC(Goat IgG)-POD Kit

產(chan)品(pin)規(gui)格(ge)：kit

產(chan)品(pin)簡介：

儲存條件(jian)：-20℃，avoid light，1 year

具(ju)體(ti)產(chan)品(pin)的參(can)數(shu)以(yi)收(shou)到產(chan)品(pin)說明(ming)書的參(can)數(shu)為(wei)準

NobleRyder SA8819 SABC(山(shan)羊IgG)-POD kitSABC(Goat IgG)-POD Kit適合(he)於壹抗(kang)為(wei)山羊IgG的免疫組化(hua)實驗，DAB顯色。

SABC 是(shi)專為(wei)免疫組化(hua)和其(qi)他免疫檢測(ce)而設計(ji)的，用(yong)以顯示組織(zhi)和(he)細(xi)胞(bao)中(zhong)抗(kang)原(yuan)分布。鏈(lian)黴(mei)親和(he)素(StreptAvidin)是(shi)壹種(zhong)從鏈(lian)黴(mei)菌中(zhong)提(ti)取(qu)的蛋白質(zhi)，同(tong)親(qin)和(he)素壹樣，對生wu素(su)有(you)極(ji)gao的親和力(li)，親和(he)素(su)是(shi)壹個(ge)堿(jian)性(xing)蛋白(bai)質(zhi)（IP=10），經(jing)改造後可(ke)以轉變成中(zhong)性(xing)蛋白(bai)質(zhi)。鏈(lian)黴(mei)親和(he)素等(deng)電點接(jie)近(jin)中性(xing)，對組織(zhi)和(he)細(xi)胞(bao)的非(fei)特異(yi)吸(xi)附(fu)很(hen)低，基於(yu)鏈(lian)黴(mei)親和(he)素的免疫組化(hua)方法背景(jing)很(hen)低。SABC 即(ji)StreptAvidin—Biotin Complex，SABC 大約可形成壹百(bai)個(ge)左右的過氧化(hua)物(wu)酶和五(wu)十(shi)個(ge)左右的鏈(lian)黴(mei)親和(he)素所(suo)構成(cheng)的復合(he)物(wu)。大量(liang)的酶將保(bao)證(zheng)SABC具(ju)有(you)很(hen)高的敏感(gan)性(xing)。

操(cao)作(zuo)步驟(zhou):（以(yi)石蠟切片為(wei)例）

1. 切片常(chang)規(gui)脫(tuo)蠟(la)至(zhi)水(三(san)次二(er)甲(jia)苯(ben)，三(san)次乙醇)。

2. 3% H2O2 室(shi)溫(wen)處(chu)理5-10分鐘以(yi)滅活內源(yuan)性(xing)酶。蒸(zheng)餾水(shui)洗(xi)3次。

3.可(ke)選步聚(ju)：

a、熱修(xiu)復抗(kang)原(yuan)，將切片浸(jin)入(ru)0.01M檸檬(meng)酸(suan)鈉(na)緩沖(chong)液(ye)（PH6.0）,電爐或微波爐加(jia)熱(re)至(zhi)沸(fei)騰 後斷(duan)電，間(jian)隔(ge)5-10分鐘後，反(fan)復1-2次。冷卻後PBS（pH7.2-7.6）洗(xi)滌1-2次。

b、酶消化(hua)，滴(di)加(jia)消(xiao)化(hua)液，37℃10分鐘，PBS（pH7.2-7.4）洗(xi)滌2-3次。

c、跳(tiao)過此步，直(zhi)接(jie)進(jin)入下壹步。

4. 滴(di)加(jia)5% BSA封(feng)閉液,室(shi)溫(wen)20分鐘。甩(shuai)去多(duo)余液體(ti), 免洗(xi)。

5. 用(yong)稀釋(shi)液將壹抗(kang)按壹定(ding)比(bi)例稀釋(shi)（稀釋(shi)後的壹抗(kang) 4℃可保存壹周(zhou)），也可另行(xing)購買(mai)抗(kang)體(ti)稀釋(shi)液。

滴(di)加(jia)稀釋(shi)的壹抗(kang)37℃孵育1小(xiao)時左右或20℃ 2小(xiao)時左右，也可4℃過夜(ye)。PBS（pH7.2-7.4）洗(xi)滌3次，每次2分鐘（壹抗(kang)的稀釋(shi)度、孵育時間(jian)和溫(wen)度(du)與染(ran)色強(qiang)度(du)、背(bei)景(jing)有(you)直(zhi)接關(guan)系。壹般(ban)來(lai)說(shuo)，陽(yang)性(xing)染(ran)色強(qiang)度(du)不(bu)夠時，可(ke)提(ti)高(gao)壹抗(kang)濃度和延(yan)長孵育時間(jian)；背景(jing)過高(gao)時，可(ke)降低(di)壹抗(kang)濃度和縮(suo)短(duan)孵育時間(jian)）。

6. 根(gen)據用(yong)量(liang)，用(yong)稀釋(shi)液將Bio-兔抗(kang)山羊IgG濃(nong)縮(suo)液(ye)按1:100稀釋(shi)成工(gong)作(zuo)液(1ml稀釋(shi)液加(jia)入(ru)10ul Bio-兔抗(kang)山羊IgG濃(nong)縮(suo)液(ye)混勻，此工作(zuo)液4℃可保(bao)存壹周(zhou))。滴(di)加(jia)Bio-兔抗(kang)山羊IgG工(gong)作(zuo)液,20-37℃ 孵育30 分鐘。PBS（pH7.2-7.4）洗(xi)滌3次，每次2分鐘。

7. 根(gen)據使用(yong)量(liang)，用(yong)稀釋(shi)液將 SABC-POD 濃(nong)縮(suo)液(ye)按 1:100 稀釋(shi)成工(gong)作(zuo)液(1ml 稀釋(shi)液加(jia)入(ru) 10ul SABC-POD 濃(nong)縮(suo)液(ye)混勻，此工作(zuo)液 4℃可保(bao)存壹周(zhou))。滴(di)加(jia)SABC-POD 工(gong)作(zuo)液,20-37℃，30 分鐘。

PBS （pH7.2-7.4）洗(xi)滌4次，每次5分鐘。

8. DAB 顯色:根(gen)據用(yong)量(liang)，用(yong)PBS（pH7.2-7.4）配制，按1ml PBS加(jia)入(ru)50ul 20×DAB顯色液A，加(jia)入(ru)50ul 20×DAB 顯色液 B 。充分混勻後滴(di)加(jia)到(dao)切片上。室(shi)溫(wen)顯色，鏡下控(kong)制反應(ying)時間(jian)，壹般(ban)在 5-30分鐘之間。蒸(zheng)餾水(shui)洗(xi)滌終(zhong)止反應。

9. 蘇(su)木(mu)素輕度(du)復染(ran)。脫水,透(tou)明(ming),封(feng)片。顯微鏡觀察(cha)。

對於(yu)細(xi)胞(bao)爬(pa)片(pian)，固定後，PBS漂(piao)洗(xi)兩(liang)次，再(zai)用(yong)0.5% Triton X-100室(shi)溫(wen)孵育20分鐘，PBS漂(piao)洗(xi)兩(liang)次，3% H2O2處(chu)理15分鐘；PBS漂(piao)洗(xi)兩(liang)次，接(jie)上述第(di)4步。

對於(yu)冰凍(dong)切片，固定後，PBS漂(piao)洗(xi)兩(liang)次，接(jie)上述第(di)二步。

註意(yi)事項(xiang)：

如(ru)果染(ran)色背景(jing)過高(gao)，在SABC反(fan)應(ying)之後，DAB顯色之前,用(yong)加(jia)有(you)0.01—0.02% TWEEN-20的PBST（pH7.2-7.4）洗(xi)滌切片4次，PBS洗(xi)2次，然(ran)後DAB顯色。

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