SABC是(shi)專(zhuan)為(wei)免(mian)疫組(zu)化(hua)和其他(ta)免(mian)疫檢測(ce)而(er)設(she)計的，用(yong)以顯示組(zu)織(zhi)和細胞中抗(kang)原(yuan)分布(bu)。鏈黴(mei)親和素(su)(StreptAvidin)是(shi)壹(yi)種(zhong)從(cong)鏈黴(mei)菌中提取的蛋白質(zhi)，同(tong)親(qin)和素(su)壹(yi)樣(yang)，對生wu素(su)有(you)極(ji)gao的親和力，親和素(su)是(shi)壹(yi)個(ge)堿(jian)性蛋白質(zhi)（IP=10），經(jing)改造後可(ke)以轉變成(cheng)中性蛋白質(zhi)。
SABC(小(xiao)鼠/兔IgG)-FITC kit SABC法

諾博(bo)萊德(de) SABC(小(xiao)鼠/兔IgG)-FITC kit  SABC法

NobleRyder SA8821 SABC(小鼠/兔IgG)-FITC kitSABC(Mouse/RabbitIgG)-FITCKit

產品(pin)貨(huo)號：SA8821

產品(pin)名(ming)稱：SABC(小鼠/兔IgG)-FITC kitSABC(Mouse/RabbitIgG)-FITCKit

英文(wen)名(ming)稱：SABC(Mouse/RabbitIgG)-FITCKit

產品(pin)規格：1kit

產品(pin)簡介：

儲存(cun)條(tiao)件(jian)：-20℃，avoid light，1 year

具體(ti)產品(pin)的參數(shu)以收(shou)到(dao)產品(pin)說(shuo)明(ming)書(shu)的參數(shu)為(wei)準(zhun)

NobleRyder SA8821 SABC(小鼠/兔IgG)-FITC kitSABC(Mouse/RabbitIgG)-FITCKit適合於(yu)壹(yi)抗(kang)為(wei)小(xiao)鼠/兔IgG的免(mian)疫組(zu)化(hua)實(shi)驗，FITC熒(ying)光檢測(ce)。

SABC是(shi)專(zhuan)為(wei)免(mian)疫組(zu)化(hua)和其他(ta)免(mian)疫檢測(ce)而(er)設(she)計的，用(yong)以顯示組(zu)織(zhi)和細胞中抗(kang)原(yuan)分布(bu)。鏈黴(mei)親和素(su)(StreptAvidin)是(shi)壹(yi)種(zhong)從(cong)鏈黴(mei)菌中提取的蛋白質(zhi)，同(tong)親(qin)和素(su)壹(yi)樣(yang)，對生wu素(su)有(you)極(ji)gao的親和力，親和素(su)是(shi)壹(yi)個(ge)堿(jian)性蛋白質(zhi)（IP=10），經(jing)改造後可(ke)以轉變成(cheng)中性蛋白質(zhi)。鏈(lian)黴(mei)親(qin)和素(su)等(deng)電(dian)點(dian)接(jie)近中性，對(dui)

組(zu)織(zhi)和細胞的非特(te)異吸附很低(di)，基(ji)於(yu)鏈(lian)黴(mei)親(qin)和素(su)的免(mian)疫組(zu)化(hua)方(fang)法背(bei)景很(hen)低(di)。SABC即(ji)StreptAvidin-Biotin Complex，SABC 大約(yue)可(ke)形成(cheng)壹(yi)百(bai)個左(zuo)右(you)的過(guo)氧化(hua)物(wu)酶和五(wu)十(shi)個(ge)左(zuo)右(you)的鏈黴(mei)親(qin)和素(su)所(suo)構成(cheng)的復合物(wu)。大量(liang)的酶將保(bao)證(zheng)SABC具有(you)很高(gao)的敏感(gan)性(xing)。

操作(zuo)步(bu)驟:（以石(shi)蠟(la)切(qie)片(pian)為例(li)）

1. 切(qie)片(pian)常規(gui)脫蠟(la)至水(shui)(三(san)次(ci)二(er)甲(jia)苯(ben)，三(san)次(ci)乙(yi)醇(chun))。

2. 可(ke)選(xuan)步(bu)聚：

a、熱修(xiu)復抗(kang)原(yuan)，將(jiang)切(qie)片(pian)浸入(ru)0.01M檸檬酸鈉(na)緩沖液(ye)（PH6.0），電(dian)爐或微波爐加(jia)熱(re)至沸(fei)騰 後斷(duan)電(dian)，間隔(ge)5-10分鐘(zhong)後，反(fan)復(fu)1-2次(ci)。冷(leng)卻(que)後PBS（pH7.2-7.6）洗滌(di)1-2次(ci)。

b、酶消化(hua)，滴加(jia)消(xiao)化(hua)液(ye)，37℃10分鐘(zhong)，PBS（pH7.2-7.4）洗滌(di)2-3次(ci)。

c、跳過(guo)此步(bu)，直接(jie)進(jin)入(ru)下壹(yi)步(bu)。

3. 滴加(jia)5%BSA封(feng)閉液,室(shi)溫20分鐘(zhong)。甩(shuai)去(qu)多(duo)余(yu)液(ye)體(ti), 免(mian)洗。

4. 用(yong)稀(xi)釋(shi)液(ye)將壹(yi)抗(kang)按壹(yi)定(ding)比例(li)稀(xi)釋(shi)（稀(xi)釋(shi)後的壹(yi)抗(kang)4℃可(ke)保(bao)存壹(yi)周(zhou)），也(ye)可(ke)另行(xing)購(gou)買(mai)抗(kang)體(ti)稀(xi)釋(shi)液(ye)。滴加(jia)稀(xi)釋(shi)的壹(yi)抗(kang)37℃ 孵育(yu)1小時(shi)左(zuo)右(you)或20℃2小(xiao)時(shi)左(zuo)右(you)，也(ye)可(ke)4℃過(guo)夜。PBS（pH7.2-7.4）洗滌(di)3次(ci)，每(mei)次(ci)2分鐘(zhong)（壹(yi)抗(kang)的稀(xi)釋(shi)度(du)、孵育(yu)時間和溫度(du)與(yu)染(ran)色(se)強(qiang)度(du)、背(bei)景有(you)直接關(guan)系(xi)。壹(yi)般(ban)來說(shuo)，陽(yang)性(xing)染(ran)色(se)強(qiang)度(du)不(bu)夠時(shi)，可(ke)提高(gao)壹(yi)抗(kang)濃(nong)度(du)和延長孵育(yu)時間；背(bei)景過(guo)高(gao)時，可(ke)降(jiang)低(di)壹(yi)抗(kang)濃(nong)度(du)和縮短(duan)孵育(yu)時間）。

5. 根據(ju)用(yong)量(liang)，用(yong)稀(xi)釋(shi)液(ye)將Bio-羊抗(kang)小(xiao)鼠/兔IgG濃(nong)縮液(ye)按1:50-100稀(xi)釋(shi)成(cheng)工作(zuo)液(ye)(1ml稀(xi)釋(shi)液(ye)加(jia)入(ru)10-20ul Bio-羊抗(kang)小(xiao)鼠/兔 IgG 濃(nong)縮液(ye)混勻(yun)，此工作(zuo)液(ye)4℃可(ke)保(bao)存壹(yi)周(zhou))。滴加(jia)Bio-羊抗(kang)小(xiao)鼠/兔IgG工作(zuo)液(ye)，20-37℃ 孵育(yu)30分鐘(zhong)。PBS（pH7.2-7.4）洗滌(di)3次(ci)，每(mei)次(ci)2分鐘(zhong)。

6. 根據(ju)使用(yong)量(liang)，用(yong)稀(xi)釋(shi)液(ye)將SABC-FITC 濃(nong)縮液(ye)按1:100 稀(xi)釋(shi)成(cheng)工作(zuo)液(ye)(1ml 稀(xi)釋(shi)液(ye)加(jia)入(ru) 10ul SABC-FITC 濃(nong)縮液(ye)混勻(yun)，此工作(zuo)液(ye)4℃可(ke)保(bao)存壹(yi)周(zhou))。滴加(jia)SABC-FITC工作(zuo)液(ye)，20-37℃，30分鐘(zhong)。

PBS （pH7.2-7.4）洗滌(di)4次(ci)，每(mei)次(ci)5分鐘(zhong)。

7. 滴加(jia)抗(kang)熒(ying)光衰(shuai)減封(feng)片(pian)劑(ji)封(feng)片(pian)。熒(ying)光顯(xian)微(wei)鏡(jing)觀(guan)察。

對於(yu)細(xi)胞爬(pa)片(pian)，固定(ding)後，PBS漂(piao)洗兩次(ci)，再用(yong)0.5%TrxitonX-100室(shi)溫孵育(yu)20分鐘(zhong)， PBS漂洗兩次(ci)，接(jie)上述第3步(bu)。

對於(yu)冰(bing)凍切(qie)片(pian)，固定(ding)後，PBS漂(piao)洗兩次(ci)，再接上述第2步(bu)。

註意事(shi)項(xiang)：

如果染(ran)色(se)背(bei)景過(guo)高(gao)，在(zai)SABC反應(ying)之後，DAB顯(xian)色(se)之(zhi)前,用(yong)加(jia)有(you)0.01—0.02%TWEEN-20的PBST（pH7.2-7.4）洗滌(di)切(qie)片(pian)4次(ci)，PBS洗2次(ci)，然(ran)後DAB顯(xian)色(se)。

 SABC(小鼠/兔IgG)-FITC kit  SABC法

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