SP 試劑(ji)盒(he)是(shi)專為免疫組化和(he)其他免(mian)疫檢測(ce)而設(she)計(ji)的，用以顯(xian)示組織和(he)細(xi)胞(bao)中(zhong)抗原分布。鏈(lian)黴親(qin)和(he)素(su)(StreptAvidin)是(shi)壹種從(cong)鏈(lian)黴菌(jun)中提(ti)取(qu)的蛋白(bai)質，同親(qin)和(he)素(su)壹樣，對(dui)生(sheng)wu素(su)有極(ji)gao的親和(he)力(li)，親(qin)和(he)素(su)是(shi)壹個堿(jian)性(xing)蛋白(bai)質（PI=10），經改(gai)造(zao)後可(ke)以(yi)轉變(bian)成中性蛋白(bai)質。
山(shan)羊(yang)SP檢測(ce)試(shi)劑(ji)盒(he) SP法

諾博萊德(de) 山(shan)羊(yang)SP檢測(ce)試(shi)劑(ji)盒(he)   SP法

NobleRyder SP8819 山(shan)羊(yang)SP檢測(ce)試(shi)劑(ji)盒(he)SP Kit(Goat)

產品(pin)貨(huo)號(hao)：SP8819

產品(pin)名稱(cheng)：山(shan)羊(yang)SP檢測(ce)試(shi)劑(ji)盒(he)SP Kit(Goat)

英文名稱(cheng)：SP Kit(Goat)

產品(pin)規(gui)格：3ml ; 6ml ; 18ml ; 110ml

產品(pin)簡介(jie)：

別(bie)名：山羊(yang)SP試劑(ji)盒(he)/山(shan)羊(yang)SP免疫(yi)組(zu)織化學試劑(ji)盒(he)/山(shan)羊(yang)SP超(chao)敏免(mian)疫(yi)組(zu)化試劑(ji)盒(he)

儲(chu)存(cun)條(tiao)件：-20℃，avoid light，1 year

具體產品(pin)的參數以(yi)收(shou)到產品(pin)說明(ming)書(shu)的參數為(wei)準

NobleRyder SP8819 山(shan)羊(yang)SP檢測(ce)試(shi)劑(ji)盒(he)SP Kit(Goat)適合(he)於(yu)壹抗為山(shan)羊(yang)IgG的免(mian)疫(yi)組(zu)化實(shi)驗(yan)DAB顯(xian)色。

SP 試(shi)劑(ji)盒(he)是(shi)專為免疫組化和(he)其他免(mian)疫檢測(ce)而設(she)計(ji)的，用以顯(xian)示組織和(he)細(xi)胞(bao)中(zhong)抗原分布。鏈(lian)黴親(qin)和(he)素(su)(StreptAvidin)是(shi)壹種從(cong)鏈(lian)黴菌(jun)中提(ti)取(qu)的蛋白(bai)質，同親(qin)和(he)素(su)壹樣，對(dui)生(sheng)wu素(su)有極(ji)gao的親和(he)力(li)，親(qin)和(he)素(su)是(shi)壹個堿(jian)性(xing)蛋白(bai)質（PI=10），經改(gai)造(zao)後可(ke)以(yi)轉變(bian)成中性蛋白(bai)質。鏈(lian)黴親(qin)和(he)素(su)等(deng)電點接近中(zhong)性(xing)，對(dui)組(zu)織和(he)細(xi)胞(bao)的(de)非特異(yi)吸(xi)附很(hen)低，因此(ci)基(ji)於(yu)鏈(lian)黴親(qin)和(he)素(su)的(de)免疫組化方法背景(jing)很(hen)低。

操(cao)作(zuo)步(bu)驟(zhou):（以(yi)石蠟(la)切(qie)片(pian)為例）

1. 切(qie)片(pian)常規(gui)脫蠟(la)至水(shui)(三次(ci)二甲苯，三次(ci)乙(yi)醇(chun))。

2. 3% H2O2 室溫(wen)處(chu)理5-10分鐘以滅活內源性酶。蒸餾水(shui)洗(xi)3次(ci)。

3.可(ke)選(xuan)步(bu)聚(ju)：

a、熱(re)修復抗原，將(jiang)切(qie)片(pian)浸(jin)入0.01M檸檬(meng)酸鈉(na)緩(huan)沖液(ye)（PH6.0），電爐或微(wei)波爐加熱(re)至(zhi)沸(fei)騰後斷(duan)電，間隔5-10分鐘後，反復1-2次(ci)。冷(leng)卻後PBS（pH7.2-7.6）洗(xi)滌1-2次(ci)。

b、酶消化，滴加消(xiao)化液(ye)，37℃10分鐘，PBS（pH7.2-7.4）洗(xi)滌2-3次(ci)。

c、跳(tiao)過(guo)此(ci)步(bu)，直(zhi)接進入下壹步(bu)。

4.  滴加封閉液(ye)，室溫(wen)20分鐘。甩去多余(yu)液(ye)體，免(mian)洗(xi)。

5.  用稀釋液(ye)將(jiang)壹抗按壹定(ding)比(bi)例稀釋（稀釋後的(de)壹抗4℃可保(bao)存(cun)壹周(zhou)），也(ye)可(ke)另(ling)行購買(mai)抗體稀釋液(ye)。滴加稀釋的壹抗37℃ 孵(fu)育(yu)1小時(shi)左右或20℃ 2小時(shi)左右，也可4℃過(guo)夜(ye)。PBS（pH7.2-7.4）洗(xi)滌3次(ci)，每次(ci) 2 分鐘。（壹抗的稀釋度(du)、孵(fu)育(yu)時(shi)間和(he)溫(wen)度(du)與染色強(qiang)度(du)、背景(jing)有直(zhi)接關(guan)系。壹般(ban)來說(shuo)，陽性(xing)染(ran)色(se)強度(du)不(bu)夠時(shi)，可提(ti)高壹抗濃(nong)度(du)和(he)延(yan)長孵(fu)育(yu)時(shi)間；背景(jing)過(guo)高時(shi)，可降(jiang)低壹抗濃(nong)度(du)和(he)縮(suo)短孵(fu)育(yu)時(shi)間。）

6． 根(gen)據(ju)用量，用稀釋液(ye)將(jiang)Bio-兔抗山羊(yang)IgG濃(nong)縮(suo)液(ye)按1:100稀釋成工作液(ye)(1ml稀釋液(ye)加入10ul Bio-兔抗山羊(yang)IgG濃(nong)縮(suo)液(ye)混勻，此(ci)工(gong)作(zuo)液(ye)4℃可保(bao)存(cun)壹周(zhou))。滴加Bio-兔抗山羊(yang)IgG工作(zuo)液(ye)，20-37℃ 孵(fu)育(yu)30分鐘。PBS（pH7.2-7.4）洗(xi)滌3次(ci)，每次(ci)2分鐘。

7． 根(gen)據(ju)使用量，用稀釋液(ye)將(jiang)鏈(lian)酶親和(he)素(su)-POD 濃(nong)縮(suo)液(ye)按 1:100 稀釋成工作液(ye)(1ml 稀釋液(ye)加入 10ul鏈(lian)酶親和(he)素(su)-POD濃(nong)縮(suo)液(ye)混勻，此(ci)工(gong)作(zuo)液(ye)4℃可保(bao)存(cun)壹周(zhou))。滴加鏈(lian)酶親和(he)素(su)-POD工(gong)作液(ye)，20-37℃，30 分鐘。PBS （pH7.2-7.4）洗(xi)滌4次(ci)，每次(ci)5分鐘。

8． DAB顯(xian)色：根據用量，用PBS（pH7.2-7.4）配制(zhi)，按(an)1ml PBS加入50ul 20×DAB顯(xian)色液(ye)A，加入50ul 20×DAB 顯(xian)色液(ye)B 。充(chong)分混勻後滴加到切(qie)片(pian)上。室溫(wen)顯(xian)色，鏡下控制反應時(shi)間(jian)，壹般(ban)在5-30分鐘之間。蒸餾水(shui)洗(xi)滌終止(zhi)反應。

9． 蘇(su)木素(su)輕(qing)度(du)復染(ran)。脫水(shui)，透(tou)明(ming)，封片(pian)。顯(xian)微鏡觀(guan)察(cha)。

對(dui)於(yu)細胞爬片(pian)，固定(ding)後，PBS漂洗(xi)兩(liang)次(ci)，再(zai)用0.5% Triton X-100室溫(wen)孵(fu)育(yu)20分鐘，PBS漂洗(xi)兩(liang)次(ci)，3% H2O2處(chu)理15分鐘；PBS漂洗(xi)兩(liang)次(ci)，接上(shang)述(shu)第4步(bu)。

對(dui)於(yu)冰(bing)凍切(qie)片(pian)，固定(ding)後，PBS漂洗(xi)兩(liang)次(ci)，接上(shang)述(shu)第二步(bu)。

註意事項(xiang)：

如果(guo)染(ran)色(se)背景(jing)過(guo)高，在SP反應之(zhi)後，DAB顯(xian)色之前，用加有0.01—0.02% TWEEN-20的(de)PBST（pH7.2-7.4）洗(xi)滌切(qie)片(pian)4次(ci)，PBS洗(xi)2次(ci)，然(ran)後DAB顯(xian)色。

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