SOD（EC 1.15.1.1）是壹(yi)種廣泛(fan)存(cun)在(zai)於生物體(ti)內(nei)的金屬(shu)酶，是重(zhong)要的氧(yang)自由(you)基(ji)清除劑(ji)，能(neng)催化(hua)超(chao)氧(yang)化(hua)物陰(yin)離(li)子(zi)發生歧(qi)化(hua)作(zuo)用，生(sheng)成(cheng)H2O2和O2。SOD不(bu)僅是超(chao)氧(yang)化(hua)物陰(yin)離(li)子(zi)清除酶，也是H2O2主要生(sheng)成(cheng)酶，在生(sheng)物抗(kang)氧(yang)化(hua)系統(tong)中具有(you)重(zhong)要作(zuo)用。
超(chao)氧(yang)化(hua)物歧(qi)化(hua)酶SOD活性(xing)檢(jian)測(ce)試劑(ji)盒(he) 抗(kang)逆

NobleRyder BC8958超(chao)氧(yang)化(hua)物歧(qi)化(hua)酶(SOD)活性(xing)檢(jian)測(ce)試劑(ji)盒(he) Superoxide Dismutase(SOD) Activity Assay Kit

產(chan)品(pin)貨(huo)號(hao)：BC8958

產(chan)品(pin)名(ming)稱(cheng)：超(chao)氧(yang)化(hua)物歧(qi)化(hua)酶(SOD)活性(xing)檢(jian)測(ce)試劑(ji)盒(he) Superoxide Dismutase(SOD) Activity Assay Kit

產(chan)品(pin)規(gui)格(ge)：50T/24S

超(chao)氧(yang)化(hua)物歧(qi)化(hua)酶SOD活性(xing)檢(jian)測(ce)試劑(ji)盒(he) 抗(kang)逆

產(chan)品(pin)簡(jian)介(jie)：

中文名(ming)稱(cheng)：超(chao)氧(yang)化(hua)物歧(qi)化(hua)酶(SOD)活性(xing)檢(jian)測(ce)試劑(ji)盒(he)

英文名(ming)稱(cheng)：Superoxide Dismutase(SOD) Activity Assay Kit

規(gui)格(ge)：50T/24S

檢(jian)測(ce)方(fang)法：可見(jian)分光(guang)光度法 Spectrophotometer

儲(chu)存(cun)條(tiao)件(jian)：Store at 2-8℃，6 months

具(ju)體(ti)產(chan)品(pin)的參(can)數以(yi)收(shou)到產品說明(ming)書的參(can)數為準(zhun)

NobleRyder BC8958超(chao)氧(yang)化(hua)物歧(qi)化(hua)酶(SOD)活性(xing)檢(jian)測(ce)試劑(ji)盒(he) Superoxide Dismutase(SOD) Activity Assay Kit

SOD（EC 1.15.1.1）是壹(yi)種廣泛(fan)存(cun)在(zai)於生物體(ti)內(nei)的金屬(shu)酶，是重(zhong)要的氧(yang)自由(you)基(ji)清除劑(ji)，能(neng)催化(hua)超(chao)氧(yang)化(hua)物陰(yin)離(li)子(zi)發生歧(qi)化(hua)作(zuo)用，生(sheng)成(cheng)H₂O₂和O₂。SOD不(bu)僅是超(chao)氧(yang)化(hua)物陰(yin)離(li)子(zi)清除酶，也是H₂O₂主要生(sheng)成(cheng)酶，在生(sheng)物抗(kang)氧(yang)化(hua)系統(tong)中具有(you)重(zhong)要作(zuo)用。

通過黃piao呤及(ji)黃(huang)piao呤氧(yang)化(hua)酶反(fan)應(ying)系(xi)統(tong)產生(sheng)超(chao)氧(yang)陰離(li)子(zi)(O2-)，O2-可還原氮(dan)藍四唑生(sheng)成(cheng)藍色(se)甲臜，後(hou)者(zhe)在560nm處有(you)吸收(shou)；SOD可清除O2-，從(cong)而抑(yi)制(zhi)了(le)甲臜的形(xing)成(cheng)；反(fan)應(ying)液(ye)藍色(se)越深，說(shuo)明(ming)SOD活性愈低(di)，反(fan)之(zhi)活(huo)性(xing)越高(gao)。

需自備(bei)的儀(yi)器(qi)和(he)用品(pin)：

可見(jian)分光(guang)光度計、臺式(shi)離心機(ji)、可調(tiao)式(shi)移液(ye)器(qi)、1mL玻(bo)璃(li)比色(se)皿(min)、研(yan)缽/勻(yun)漿(jiang)器(qi)/細(xi)胞(bao)超(chao)聲(sheng)破碎(sui)儀(yi)、冰和蒸(zheng)餾水。

操(cao)作(zuo)步驟：

壹(yi)、樣本處(chu)理(li)(可適(shi)當調(tiao)整待測樣(yang)本量(liang)，具(ju)體比例(li)可以(yi)參考(kao)文獻(xian))

1.細(xi)菌或(huo)細胞(bao)樣本：收(shou)集細菌或(huo)細胞(bao)到離心(xin)管內(nei)，離(li)心(xin)後(hou)棄(qi)上清，按(an)照細(xi)菌或(huo)細胞(bao)數量(liang)(10°個(ge))：提取液體積(ji)(mL)為500-1000：1的比例(li)(建議(yi)500萬細(xi)菌或(huo)細胞(bao)加(jia)入(ru)1mL提取液)，超(chao)聲(sheng)波破(po)碎細菌或(huo)細胞(bao)(冰浴，功(gong)率(lv)200W，超(chao)聲(sheng)3s，間隔10s，重(zhong)復(fu)30次)，8000g4℃離(li)心10min，取上清，置(zhi)冰上待(dai)測(ce)。

2.組(zu)織(zhi)樣(yang)本(ben)：按(an)照組(zu)織質(zhi)量(liang)(g)：提取液體積(ji)(mL)為1：5-10的比例(li)(建議(yi)稱(cheng)取(qu)約0.1g組織(zhi)，加(jia)入(ru)1mL提取液)，進行(xing)冰浴勻漿;8000g4℃離(li)心(xin)10min，取(qu)上清，置(zhi)冰上待(dai)測(ce)。

3.血(xue)清(漿)樣(yang)本：直(zhi)接(jie)檢(jian)測(ce)。

二(er)、測(ce)定步驟

1.分(fen)光(guang)光(guang)度(du)計預熱(re)30min以(yi)上，調(tiao)節(jie)波長(chang)至(zhi)560nm，蒸(zheng)餾水調零(ling)。

2.臨(lin)用前(qian)根據樣(yang)本數(shu)量(liang)取(qu)部分試劑(ji)壹(yi)、試劑(ji)三(san)和(he)試劑(ji)四工作(zuo)液(ye)37°℃水浴5min 以(yi)上。

三(san)、SOD活(huo)性(xing)計(ji)算(suan)

1、抑(yi)制(zhi)百(bai)分(fen)率(lv)的計(ji)算(suan)：抑制(zhi)百(bai)分(fen)率(lv)=(ΔA空白(bai)-△A測定)+△A空白(bai)x100%

盡(jin)量(liang)使樣本(ben)的抑(yi)制(zhi)百(bai)分(fen)率(lv)在30-70%範圍內(nei)，越靠近50%越準確(que)。如(ru)果(guo)計(ji)算(suan)出(chu)來的抑(yi)制(zhi)百(bai)分(fen)率(lv)小於30%或(huo)大於70%，則(ze)通常需要調(tiao)整加(jia)樣(yang)量(liang)後(hou)重(zhong)新測(ce)定。如(ru)果(guo)測(ce)定出(chu)來的抑(yi)制(zhi)百(bai)分(fen)率(lv)偏高(gao)，則(ze)需適(shi)當稀釋(shi)樣本;如(ru)果(guo)測(ce)定出(chu)來的抑(yi)制(zhi)百(bai)分(fen)率(lv)偏低(di),則(ze)需重(zhong)新準(zhun)備(bei)濃度(du)比較高(gao)的待(dai)測樣(yang)本或(huo)者提高(gao)操(cao)作(zuo)表(biao)中樣本(ben)體(ti)積,同(tong)時(shi)減少相同(tong)的蒸(zheng)餾水體積(ji)。

2、SOD酶活性(xing)單位(wei)：在(zai)上述(shu)黃(huang)piao呤氧(yang)化(hua)酶偶聯(lian)反(fan)應(ying)體(ti)系(xi)中抑制(zhi)百(bai)分(fen)率(lv)為50%時(shi)，反(fan)應(ying)體(ti)系(xi)中的SOD酶活力定義(yi)為壹(yi)個(ge)酶活力單位(wei)。

3、SOD酶活性(xing)計(ji)算(suan)：

(1)血(xue)清(漿)SOD活(huo)性(U/mL)=[抑(yi)制(zhi)百(bai)分(fen)率(lv)+(1-抑制(zhi)百(bai)分(fen)率(lv))xV 反(fan)總(zong)]÷1mL÷V 樣(yang)xF

=11.11x抑(yi)制(zhi)百(bai)分(fen)率(lv)+(1-抑制(zhi)百(bai)分(fen)率(lv))xF

(2)組(zu)織(zhi)、細(xi)菌或(huo)培(pei)養(yang)細(xi)胞(bao)SOD活力計(ji)算(suan)：

A.按(an)樣本(ben)蛋白(bai)濃度(du)計(ji)算(suan)

SOD活(huo)性(xing)(U/mg prot)=[抑(yi)制(zhi)百(bai)分(fen)率(lv)+(1-抑制(zhi)百(bai)分(fen)率(lv))xV 反(fan)總(zong)]+1mL+ (V 樣(yang)xCpr) xF

=11.11x抑(yi)制(zhi)百(bai)分(fen)率(lv)+(1-抑制(zhi)百(bai)分(fen)率(lv))÷CprxF

B.按(an)樣本(ben)質量(liang)計(ji)算(suan)

SOD活(huo)性(xing)(U/g質(zhi)量(liang))=[抑(yi)制(zhi)百(bai)分(fen)率(lv)+(1-抑制(zhi)百(bai)分(fen)率(lv))xV 反(fan)總(zong)]+lmL+(WxV 樣(yang)+V 樣總(zong))xF

=11.11x抑(yi)制(zhi)百(bai)分(fen)率(lv)÷(1-抑制(zhi)百(bai)分(fen)率(lv))+WxF

C.按(an)細菌或(huo)細胞(bao)數量(liang)計(ji)算(suan)

SOD活(huo)力(U/104cell)-[抑(yi)制(zhi)百(bai)分(fen)率(lv)+(1-抑制(zhi)百(bai)分(fen)率(lv))xV 反(fan)總(zong)]+1mL+(NxV 樣(yang)+V 樣總(zong))xF

=11.11x抑(yi)制(zhi)百(bai)分(fen)率(lv)÷(1-抑制(zhi)百(bai)分(fen)率(lv))xF÷N

V反(fan)總(zong)：反(fan)應(ying)體(ti)系(xi)總(zong)體(ti)積，1mL：V樣：加(jia)入(ru)反(fan)應(ying)體(ti)系(xi)中樣本(ben)的體(ti)積，0.09mL;V樣(yang)總(zong)：加(jia)入(ru)提取液體積(ji)，1mL：Cpr：樣(yang)本(ben)蛋白(bai)質濃度(du)，mg/mL：W：樣(yang)本(ben)質量(liang)，g;N：細(xi)胞(bao)或(huo)細菌總(zong)數(shu)，以(yi)萬計(ji)：F：樣(yang)本(ben)稀釋(shi)倍數：1mL：1mL反(fan)應(ying)體(ti)系(xi)。

註(zhu)意(yi)事項(xiang)：

1、樣(yang)本(ben)和(he)試劑(ji)二(er)工作(zuo)液(ye)使用時(shi)在(zai)冰上放置(zhi)。

2、樣(yang)本(ben)較多時，可按(an)表格(ge)配制(zhi)測(ce)定管工作(zuo)液(ye)和對照管(guan)工作(zuo)液(ye)(包含試劑(ji)壹(yi)、(試劑(ji)二(er)工作(zuo)液(ye))、試劑(ji)三(san)、蒸(zheng)餾水)，試劑(ji)四工作(zuo)液(ye)必須(xu)最(zui)後(hou)加(jia)入(ru)。

3、反(fan)應(ying)完(wan)成(cheng)後(hou)，可能(neng)有(you)沈(chen)澱(dian)生成(cheng)，混勻(yun)後(hou)測(ce)定即可。

超(chao)氧(yang)化(hua)物歧(qi)化(hua)酶SOD活性(xing)檢(jian)測(ce)試劑(ji)盒(he) 抗(kang)逆 

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BC8958超(chao)氧(yang)化(hua)物歧(qi)化(hua)酶(SOD)活性(xing)檢(jian)測(ce)試劑(ji)盒(he) Superoxide Dismutase(SOD) Activity Assay Kit 50T/24S