CAT(EC 1.11.1.6)廣(guang)泛(fan)存(cun)在(zai)於(yu)動(dong)物、植物、微生物和(he)培養(yang)細胞(bao)中，是(shi)最(zui)主要(yao)的(de)H2O2清(qing)除酶，在(zai)活性(xing)氧(yang)清(qing)除系統(tong)中具有(you)重(zhong)要作(zuo)用(yong)。
過氧(yang)化氫酶CAT活性(xing)檢測試(shi)劑盒(he)鉬酸銨(an)法(fa) 抗逆(ni)

NobleRyder BC2563  過氧(yang)化氫酶（CAT）活性(xing)檢測試(shi)劑盒(he)（鉬酸銨(an)法(fa)) Catalase (CAT) Activity Assay Kit （Ammonium Molybdate-Chromogenic Method）

產(chan)品(pin)貨號(hao)：BC2563

產(chan)品(pin)名稱：過氧(yang)化氫酶（CAT）活性(xing)檢測試(shi)劑盒(he)（鉬酸銨(an)法(fa)) Catalase (CAT) Activity Assay Kit （Ammonium Molybdate-Chromogenic Method）

產(chan)品(pin)規格：100T/48S

過氧(yang)化氫酶CAT活性(xing)檢測試(shi)劑盒(he)鉬酸銨(an)法(fa) 抗逆(ni)

產(chan)品(pin)簡(jian)介：

中文名稱：過氧(yang)化氫酶（CAT）活性(xing)檢測試(shi)劑盒(he)（鉬酸銨(an)法(fa)）

英文名稱：Catalase (CAT) Activity Assay Kit （Ammonium Molybdate-Chromogenic Method）

規格：100T/48S

檢測方(fang)法：微量法(fa) Spectrophotometer/Microplate Reader

儲(chu)存條(tiao)件：Store at 2-8℃，6 months

具體產(chan)品(pin)的(de)參數(shu)以收(shou)到產(chan)品(pin)說(shuo)明書(shu)的(de)參數(shu)為準

NobleRyder BC2563過氧(yang)化氫酶（CAT）活性(xing)檢測試(shi)劑盒(he)（鉬酸銨(an)法(fa)) Catalase (CAT) Activity Assay Kit （Ammonium Molybdate-Chromogenic Method）

產(chan)品(pin)說(shuo)明：

CAT(EC 1.11.1.6)廣泛(fan)存(cun)在(zai)於(yu)動(dong)物、植物、微生物和(he)培養(yang)細胞(bao)中，是(shi)最(zui)主要(yao)的(de)H2O2清(qing)除酶，在(zai)活性(xing)氧(yang)清(qing)除系統(tong)中具有(you)重(zhong)要作(zuo)用(yong)。

H2O2可與鉬酸銨(an)反(fan)應形(xing)成穩(wen)定的(de)黃色(se)復合物，在(zai)405nm處有(you)強烈吸(xi)收(shou)峰(feng)，且(qie)其(qi)吸(xi)光(guang)值大(da)小(xiao)與過氧(yang)化氫濃(nong)度(du)成(cheng)正(zheng)比。通過測定反(fan)應(ying)體系中剩(sheng)余(yu)的(de)H2O2量，得(de)出(chu)被CAT催(cui)化分(fen)解的(de)H2O2量，進(jin)而反(fan)映(ying)CAT的(de)活性(xing)。

需自備的(de)儀器(qi)和(he)用(yong)品(pin)：

可見(jian)分光(guang)光(guang)度(du)計(ji)/酶標儀、臺式離心機、可(ke)調(tiao)式移液(ye)器、恒溫水(shui)浴(yu)鍋(guo)、微量玻璃(li)比色(se)皿(min)/96孔(kong)板、研(yan)缽/勻漿(jiang)器(qi)/細(xi)胞(bao)超(chao)聲(sheng)破碎(sui)儀、冰(bing)和(he)蒸餾(liu)水(shui)。

操作步(bu)驟：

壹(yi)、樣本(ben)處理(li)(可(ke)適當(dang)調整待測樣本(ben)量，具(ju)體比例可(ke)以參考(kao)文獻)

1、細菌、細(xi)胞(bao)或組織(zhi)樣本(ben)的(de)制備(bei)：

a、細菌或培養(yang)細(xi)胞(bao)：收集(ji)細菌或細胞(bao)到離心管內，離心後棄(qi)上清(qing)：按(an)照每(mei)500萬(wan)細菌或細胞(bao)加(jia)入(ru)1mL提取液(ye)，超聲(sheng)波破碎(sui)細菌(jun)或細胞(bao)(功率(lv)200W，超(chao)聲(sheng)3s，間(jian)隔(ge)9s，重(zhong)復30次(ci))：8000g，4℃離心10min，取上清(qing)，置(zhi)冰上待(dai)測。

b、組織：按(an)照(zhao)組織質(zhi)量(g)：提取液(ye)體積(V)=1：5~10(建(jian)議(yi)稱取約(yue)0.1g組織，加(jia)入(ru)ImL提取液(ye))進行(xing)冰浴(yu)勻漿(jiang)。8000g，4℃離心10min，取上清(qing)，置(zhi)冰上待(dai)測。

2、血清(qing)(漿(jiang))樣本(ben)：直(zhi)接(jie)檢測。

二、測定步(bu)驟

1、分光(guang)光(guang)度(du)計(ji)或酶標儀預(yu)熱(re)30min以上，調(tiao)節波長(chang)至(zhi)405nm，蒸(zheng)餾(liu)水(shui)調(tiao)專(zhuan)。

2、測定前將(jiang)30μmol/mL標準品(pin)與試(shi)劑壹(yi)在(zai)25°C水(shui)浴(yu)10min 以上。

三、CAT 活性(xing)計(ji)算

1、血清(qing)(漿(jiang))CAT活力(li)的(de)計算(suan)：

單位的(de)定義：在(zai)25℃條(tiao)件(jian)下(xia)，每(mei)mL血清(qing)(漿(jiang))每(mei)分(fen)鐘催(cui)化1μmolH2O2降(jiang)解定義為壹(yi)個酶活力(li)單(dan)位。

CAT(U/mL)= (ΔA+△A標準)x30xV標(biao)準(zhun)+V 樣+TxF=15x(△A+△A標準(zhun))xF

2、組織、細(xi)菌(jun)或細胞(bao)中CAT 活力(li)計(ji)算：

1)按樣本(ben)蛋白濃(nong)度(du)計(ji)算：

單位的(de)定義：在(zai)25℃條(tiao)件(jian)下(xia)，每(mei)mg組(zu)織蛋白每(mei)分(fen)鐘催(cui)化1μmol H₂O₂降(jiang)解定義為壹(yi)個酶活力(li)單(dan)位。

CAT(U/mg prot)=(△A+ΔA標準)x30xV標(biao)準(zhun)+(CprxV樣) +TxF=15x(△A÷AA 標準(zhun))+CprxF

2)按樣本(ben)質量計(ji)算(suan)：

單位的(de)定義：在(zai)25C條(tiao)件(jian)下(xia)，每(mei)g組(zu)織每(mei)分(fen)鐘催(cui)化1μmol H₂O₂降(jiang)解定義為壹(yi)個酶活力(li)單(dan)位。

CAT(U/g 質量)≡(△A+△A標(biao)準(zhun))x30xV標(biao)準(zhun)+(V樣÷V 樣總(zong)xW) +TxF=15x(△A+△A標(biao)準(zhun))+WxF

3)按細菌(jun)或細胞(bao)數(shu)量計(ji)算(suan)：

單位的(de)定義：在(zai)25℃條(tiao)件(jian)下(xia)，每(mei)1萬(wan)個細菌(jun)或細胞(bao)每(mei)分(fen)鐘催(cui)化1μmolH₂O₂降(jiang)解定義為壹(yi)個酶活力(li)單(dan)位。

CAT(U/10'cell)= (△A÷△A標準)x30xV標(biao)準(zhun)+(V樣+V樣總(zong)x500)+TxF=0.03x(ΔA÷△A標(biao)準(zhun)) xF

30：標準品(pin)濃(nong)度(du)，30μmol/mL;V標(biao)準：加(jia)入(ru)標(biao)準(zhun)品(pin)體積，0.1mL;V樣：加(jia)入(ru)樣本(ben)體積，0.02mL;T：反(fan)應(ying)時間(jian)，10min;F：樣本(ben)稀釋(shi)倍(bei)數：Cpr：樣本(ben)蛋白質(zhi)濃度(du)，mg/mL;V樣總(zong)：加(jia)入(ru)提取液(ye)體積，1mL;W：樣本(ben)質量，g;500：細(xi)胞(bao)或細菌(jun)總(zong)數(shu)，500萬(wan)。

註意(yi)事項(xiang)：

1.本(ben)試(shi)劑盒(he)多(duo)給(gei)出(chu)25mL的(de)提取液(ye)，供樣本(ben)稀釋(shi)使(shi)用(yong)。

2.如果反(fan)應(ying)液(ye)有(you)大(da)量氣(qi)泡(pao)產(chan)生，將(jiang)樣本(ben)用(yong)提取液(ye)稀釋(shi)後(hou)再進行測定。

3.如果樣本(ben)量過多(duo)，為保(bao)證(zheng)反(fan)應(ying)時(shi)間(jian)(25℃，10min)的(de)準確性，建(jian)議分(fen)成(cheng)若幹(gan)批(pi)次(ci)檢測，每(mei)批(pi)次檢測均(jun)需配1-2個空白管與標準(zhun)管。

4.當A測定小(xiao)於(yu)0.12或者(zhe)約等於(yu)A對照時(shi)，建議(yi)將(jiang)樣本(ben)用(yong)提取液(ye)稀釋(shi)後(hou)再進行測定。

5.動(dong)物組織如肝(gan)臟(zang)、腎臟(zang)等酶活性(xing)較高(gao)樣本(ben)，預(yu)實(shi)驗建議將(jiang)樣本(ben)用(yong)提取液(ye)多個高(gao)倍稀釋(shi)(如(ru)25倍、50倍、100倍、200倍等)試(shi)驗後(hou)，再進(jin)行檢測。

過氧(yang)化氫酶CAT活性(xing)檢測試(shi)劑盒(he)鉬酸銨(an)法(fa) 抗逆(ni) 

產(chan)品(pin)訂購(gou)信息(xi)：

BC2563過氧(yang)化氫酶（CAT）活性(xing)檢測試(shi)劑盒(he)（鉬酸銨(an)法(fa)) Catalase (CAT) Activity Assay Kit （Ammonium Molybdate-Chromogenic Method） 100T/48S