吲哚乙酸(IAA)在吲哚乙酸氧(yang)化(hua)酶的作用下(xia)，被氧化(hua)破壞(huai)失(shi)去活(huo)性(xing)。IAA氧化(hua)酶能(neng)調(tiao)節植(zhi)物(wu)體內(nei)吲哚乙酸的的水平，從(cong)而(er)影(ying)響(xiang)植(zhi)物(wu)的生長。
吲哚乙酸氧(yang)化(hua)酶活(huo)性(xing)檢測試劑(ji)盒 光合

NobleRyder BC2988吲哚乙酸氧(yang)化(hua)酶活(huo)性(xing)檢測試劑(ji)盒 Indoleacetic acid oxidase Activity Assay Kit

產(chan)品貨(huo)號(hao)：BC2988

產(chan)品名稱(cheng)：吲哚乙酸氧(yang)化(hua)酶活(huo)性(xing)檢測試劑(ji)盒 Indoleacetic acid oxidase Activity Assay Kit

產(chan)品規格(ge)：50T/24S

吲哚乙酸氧(yang)化(hua)酶活(huo)性(xing)檢測試劑(ji)盒 光合

產(chan)品簡(jian)介(jie)：

自(zi)備(bei)試劑(ji)：該試(shi)劑(ji)盒實驗(yan)過程(cheng)中(zhong)需(xu)自備(bei)試劑(ji)，詳(xiang)情(qing)見(jian)網站(zhan)說(shuo)明書(shu)

中(zhong)文(wen)名稱(cheng)：吲哚乙酸氧(yang)化(hua)酶活(huo)性(xing)檢測試劑(ji)盒

英(ying)文(wen)名稱(cheng)：Indoleacetic acid oxidase Activity Assay Kit

規(gui)格：50T/24S

檢測方法：可(ke)見(jian)分(fen)光(guang)光(guang)度法 Spectrophotometer

儲(chu)存條件(jian)：Store at -20℃，6 months

具(ju)體產品(pin)的參(can)數(shu)以收到(dao)產(chan)品說(shuo)明書(shu)的參(can)數(shu)為準(zhun)

NobleRyder BC2988吲哚乙酸氧(yang)化(hua)酶活(huo)性(xing)檢測試劑(ji)盒 Indoleacetic acid oxidase Activity Assay Kit

產(chan)品說(shuo)明：

吲哚乙酸(IAA)在吲哚乙酸氧(yang)化(hua)酶的作用下(xia)，被氧化(hua)破壞(huai)失(shi)去活(huo)性(xing)。IAA氧化(hua)酶能(neng)調(tiao)節植(zhi)物(wu)體內(nei)吲哚乙酸的的水平，從(cong)而(er)影(ying)響(xiang)植(zhi)物(wu)的生長。

IAA在無(wu)機(ji)酸條件(jian)下(xia)與(yu)FeCl3作用(yong)生(sheng)成紅(hong)色產物(wu)，在530nm下(xia)有最(zui)大吸收峰。酶活(huo)力(li)的大小可(ke)用破(po)壞(huai)IAA的速率(lv)表(biao)示。

需(xu)自備(bei)的儀(yi)器(qi)和用(yong)品(pin)：

可(ke)見(jian)分(fen)光(guang)光(guang)度計(ji)、低(di)溫離心機(ji)、水浴(yu)鍋、可(ke)調式(shi)移液(ye)器(qi)、1mL玻(bo)璃比(bi)色皿、研(yan)缽/勻漿(jiang)器(qi)/超(chao)聲(sheng)破(po)碎儀(yi)、乙醇(chun)(>98%，AR)、冰(bing)和(he)蒸(zheng)餾(liu)水。

壹(yi)、樣本(ben)處理(li)(可(ke)適當(dang)調整(zheng)待測樣本(ben)量(liang)，具體(ti)比例(li)可(ke)以參(can)考文(wen)獻)

1、組(zu)織(zhi)：稱(cheng)取(qu)約0.1g組(zu)織(zhi)，加(jia)入(ru)1mL提取液(ye)進行冰(bing)浴(yu)勻(yun)漿(jiang)。12000g4℃離心15min，取(qu)上(shang)清，置冰(bing)上(shang)待測。

2、細(xi)胞或(huo)細(xi)菌(jun)樣本(ben)的制備(bei)先(xian)收(shou)集(ji)細(xi)胞或(huo)細(xi)菌(jun)樣本(ben)到(dao)離心管內，棄上(shang)清，按(an)照每(mei)500萬(wan)細(xi)胞或(huo)細(xi)菌(jun)加(jia)入(ru)1mL提取液(ye)，超(chao)聲(sheng)波破碎細(xi)菌(jun)或(huo)細(xi)胞(功率200W，超(chao)聲(sheng)3s，間(jian)隔(ge)10s，重(zhong)復(fu)30次(ci))。12000g，4℃離心15min，取(qu)上(shang)清，置冰(bing)上(shang)待測。

二(er)、測定步驟

1、可(ke)見(jian)分(fen)光(guang)光(guang)度計(ji)預熱(re)30min，波長調至530nm，蒸(zheng)餾(liu)水調(tiao)零。

2、標準(zhun)液(ye)的稀釋(shi)：將標準(zhun)溶(rong)液(ye)用蒸(zheng)餾(liu)水稀(xi)釋(shi)為0.2、0.1、0.05、0.025、0.0125μmol/mL的標準(zhun)液(ye)。

三(san)、吲哚乙酸氧(yang)化(hua)酶酶活(huo)計(ji)算

1、標準(zhun)曲(qu)線(xian)的繪制：

以標準(zhun)液(ye)的濃度(μmol/mL)為x軸，對應的AA標準(zhun)為(wei)y軸繪制標準(zhun)曲(qu)線(xian)，得(de)到(dao)標準(zhun)方(fang)程y=kx+b，將(jiang)△A測(ce)定(ding)帶(dai)入(ru)方程中(zhong)計(ji)算得(de)到(dao)樣本(ben)濃度(x，μmol/mL).

2、吲哚乙酸氧(yang)化(hua)酶活(huo)力(li)計(ji)算：

Solarbio

(1)按(an)樣本(ben)蛋白濃度計(ji)算：

IFE

單位的定義(yi)：每(mei)mg組(zu)織(zhi)蛋白在反應體(ti)系(xi)中(zhong)每(mei)分鐘(zhong)消(xiao)耗1nmolIAA的酶量(liang)定義(yi)為(wei)壹個酶活(huo)性(xing)單位。

IAA氧(yang)化酶酶活(huo)(U/mg prot) =xxV酶促(cu)x1000÷(V樣xCpr)÷T=333xx+Cpr

(2)按(an)樣本(ben)質量(liang)計(ji)算：

單位的定義(yi)：每(mei)g組(zu)織(zhi)在反應體(ti)系(xi)中(zhong)每(mei)分鐘(zhong)消(xiao)耗1nmolIAA的酶量(liang)定義(yi)為(wei)壹個酶活(huo)性(xing)單位。

IAA氧(yang)化酶酶活(huo)(U/g質(zhi)量(liang))=xxV酶促(cu)x1000÷(W÷V提(ti)取xV樣)÷T=333xx÷W

(3)按(an)細(xi)胞或(huo)細(xi)菌(jun)數(shu)量(liang)計(ji)算：

單位的定義(yi)：每(mei)104個細(xi)胞或(huo)細(xi)菌(jun)在反應體(ti)系(xi)中(zhong)每(mei)分鐘(zhong)消(xiao)耗lnmolIAA的酶量(liang)定義(yi)為(wei)壹個酶活(huo)性(xing)單位。

IAA氧(yang)化酶酶活(huo)(U/104cell)=xxV酶促(cu)x1000+(N÷V提(ti)取xV樣)÷T=333xx÷N

V酶促(cu)酶促(cu)反應總體(ti)積,0.4mL;1000：單位換算系(xi)數(shu)，lμmol=1000nmol;V樣：加(jia)入(ru)的樣本(ben)體積,0.04mL;Cpe樣本(ben)蛋白濃度，mg/mL;W：樣本(ben)質量(liang)，g;V提取(qu)：提取(qu)液(ye)體積(ji)，1mL;N：細(xi)胞數(shu)量(liang)，以萬(wan)計(ji)：T：反應時(shi)間，30min。

吲哚乙酸氧(yang)化(hua)酶活(huo)性(xing)檢測試劑(ji)盒 光合 

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