β-半(ban)乳(ru)糖苷(gan)酶染(ran)色試(shi)劑盒(β-Galactosidase Staining Kit)是(shi)壹種(zhong)基於衰老時(shi)SA-β-Gal (senescence-associated β-galactosidase)活(huo)性(xing)水(shui)平上(shang)調而(er)對衰老細(xi)胞(bao)或組織進行染(ran)色檢(jian)測(ce)的(de)試(shi)劑盒。
β-半(ban)乳糖苷(gan)酶染(ran)色試(shi)劑盒 酶類(lei)染(ran)色

NobleRyder G9368 β-半(ban)乳糖苷(gan)酶染(ran)色試(shi)劑盒，Senescence-Associated β-Galactosidase（SA-β-Gal） Stain Kit

產(chan)品貨號：G9368

產(chan)品名(ming)稱：β-半乳糖苷(gan)酶染(ran)色試(shi)劑盒，Senescence-Associated β-Galactosidase（SA-β-Gal） Stain Kit

產(chan)品規(gui)格：100T

β-半(ban)乳糖苷(gan)酶染(ran)色試(shi)劑盒 酶類(lei)染(ran)色

產(chan)品簡(jian)介：

中文(wen)名(ming)稱：β-半乳糖苷(gan)酶染(ran)色試(shi)劑盒

英(ying)文名(ming)稱：Senescence-Associated β-Galactosidase（SA-β-Gal） Stain Kit

規(gui)格：100T

儲(chu)存(cun)條(tiao)件：-20℃，避光(guang)保存(cun)，有(you)效期(qi)1年(nian)。

具體產(chan)品的(de)參(can)數(shu)以(yi)收到(dao)產(chan)品說(shuo)明(ming)書的參(can)數(shu)為(wei)準

NobleRyder G9368 β-半(ban)乳糖苷(gan)酶染(ran)色試(shi)劑盒，Senescence-Associated β-Galactosidase（SA-β-Gal）Stain Kit產(chan)品介紹

β-半(ban)乳糖苷(gan)酶染(ran)色試(shi)劑盒(β-Galactosidase Staining Kit)是(shi)壹種(zhong)基於衰老時(shi)SA-β-Gal (senescence-associated β-galactosidase)活(huo)性(xing)水(shui)平上(shang)調而(er)對衰老細(xi)胞(bao)或組織進行染(ran)色檢(jian)測(ce)的(de)試(shi)劑盒。在普通(tong)的(de)光(guang)學顯微鏡下就(jiu)可以(yi)觀(guan)測(ce)到(dao)細(xi)胞(bao)或組織的(de)衰老情況(kuang)。本(ben)試(shi)劑盒可以(yi)用於培養(yang)細(xi)胞(bao)的(de)衰老檢(jian)測(ce)，也(ye)可以(yi)用於組織切片(pian)的衰老檢(jian)測(ce)。β-半(ban)乳(ru)糖苷(gan)酶染(ran)色試(shi)劑盒以(yi)X-Gal為(wei)底物(wu)，在衰老特異性(xing)的(de)β-半(ban)乳(ru)糖苷(gan)酶催(cui)化(hua)下會(hui)生成(cheng)深(shen)藍色產(chan)物(wu)，光(guang)學顯微鏡下很(hen)容(rong)易觀(guan)察(cha)到(dao)變成(cheng)藍色的(de)表達(da)β-半(ban)乳(ru)糖苷(gan)酶的細(xi)胞(bao)或組織。本(ben)試(shi)劑盒僅(jin)染(ran)色衰老細(xi)胞(bao)，對(dui)衰老前(qian)的細(xi)胞(bao)(presenescent cells)、靜(jing)止(zhi)期細(xi)胞(bao)(quiescent cells)、永生細(xi)胞(bao)(immortal cells)或腫瘤細(xi)胞(bao)等(deng)不(bu)會(hui)染(ran)色。對(dui)於組織切片(pian)或組織塊(kuai)，可以(yi)檢(jian)測(ce)的(de)樣(yang)品數(shu)量(liang)視樣(yang)品的(de)大(da)小而定，對於普通(tong)的切片(pian)也(ye)至少(shao)足(zu)夠(gou)檢(jian)測(ce)100個樣(yang)品，使用6孔板測(ce)定(ding)，足(zu)夠(gou)測(ce)定(ding)100個樣(yang)品。 

操(cao)作步(bu)驟：(僅供參(can)考(kao))

註(zhu)意(yi)：配置(zhi)染(ran)色工(gong)作液推(tui)薦使用聚(ju)丙烯(PP)容(rong)器，不(bu)能使用聚(ju)苯乙烯(PS)容(rong)器配制(zhi)染(ran)色工(gong)作液。

染(ran)色過(guo)程(cheng)中的(de)37℃孵育(yu)不(bu)能在二氧(yang)化(hua)碳(tan)培養(yang)箱中進行，易(yi)造成(cheng)假(jia)陽性(xing)染(ran)色。

(壹)貼壁(bi)細(xi)胞(bao)染(ran)色：

1. 對(dui)於6孔(kong)板(ban)中培養(yang)的細(xi)胞(bao)，吸(xi)除細(xi)胞(bao)培養(yang)液，用PBS洗(xi)滌1次，加入1mlβ-Gal 固(gu)定(ding)液，室(shi)溫固(gu)定(ding)15min。

對(dui)於其(qi)它(ta)類(lei)型的(de)培養(yang)板，固(gu)定(ding)液及後續溶(rong)液的(de)用量(liang)參(can)照此(ci)比(bi)例(li)進行操(cao)作。

2. 吸(xi)除細(xi)胞(bao)固(gu)定(ding)液，用1×PBS洗(xi)滌細(xi)胞(bao)3次(ci)，每(mei)次(ci)3min。（優選步驟見(jian)註意(yi)事(shi)項(xiang)3）

3. 按(an)照(zhao)比(bi)例(li)配置(zhi)染(ran)色工(gong)作液。吸(xi)除β-Gal清(qing)洗(xi)液，每(mei)孔(kong)加入(ru)1ml染(ran)色工(gong)作液。

4. 37℃孵育(yu)過(guo)夜(ye)12-24h，可以(yi)用封板膜或保鮮(xian)膜封住6孔(kong)板防止(zhi)蒸發。

5. 普(pu)通光(guang)學顯微鏡下觀(guan)察(cha)。如不能及時(shi)觀(guan)察(cha)計數(shu)，可以(yi)去(qu)除染(ran)色工(gong)作液，加(jia)入(ru)2mlPBS，2-8℃可以(yi)保(bao)存(cun)數(shu)天(tian)；或者加(jia)上(shang)水(shui)性(xing)明(ming)膠封片(pian)劑封片(pian)後，可以(yi)保(bao)存(cun)較(jiao)長(chang)時(shi)間(jian)。

(二(er))懸(xuan)浮細(xi)胞(bao)染(ran)色：

1. 離(li)心(xin)收集細(xi)胞(bao)至1.5ml離(li)心(xin)管內，用PBS洗(xi)滌1次，加入1mlβ-Gal 固(gu)定(ding)液，室(shi)溫固(gu)定(ding)15min。固(gu)定(ding)時(shi)可以(yi)在搖(yao)床上(shang)緩慢(man)搖(yao)動(dong)，以(yi)避(bi)免細(xi)胞(bao)結(jie)成團塊(kuai)。

2. 離(li)心(xin)，吸除細(xi)胞(bao)固(gu)定(ding)液，用1×PBS洗(xi)滌細(xi)胞(bao)3次(ci)，每(mei)次(ci)3min。（優選步驟見(jian)註意(yi)事(shi)項(xiang)3）

3. 按(an)照(zhao)比(bi)例(li)配置(zhi)染(ran)色工(gong)作液。離(li)心(xin)，吸除β-Gal清(qing)洗(xi)液，每(mei)管(guan)加入(ru)0.5-1ml染(ran)色工(gong)作液。37℃孵育(yu)過(guo)夜(ye)12-24h。

4. 取部(bu)分染(ran)色後的細(xi)胞(bao)，滴加到(dao)載玻(bo)片(pian)上(shang)或6孔板(ban)內(nei)，普通光(guang)學顯微鏡下觀(guan)察(cha)。如不能及時(shi)觀(guan)察(cha)計數(shu)，可以(yi)離(li)心(xin)，去除染(ran)色工(gong)作液，然(ran)後加入(ru)1mlPBS，2-8℃可以(yi)保(bao)存(cun)數(shu)天(tian)。如果離(li)心(xin)，取細(xi)胞(bao)用於塗片(pian)，加上(shang)封片(pian)液封(feng)片(pian)後，2-8℃可以(yi)保(bao)存(cun)較(jiao)長(chang)時(shi)間(jian)。

(三(san))組織切片(pian)染(ran)色：

1. 對(dui)於酶保護(hu)處理(li)過(guo)的冷(leng)凍切片(pian)，直接(jie)按(an)照(zhao)以(yi)下步(bu)驟進行。（見(jian)註意(yi)事(shi)項(xiang)4）

2. 滴加適(shi)當(dang)體積的β-Gal 固(gu)定(ding)液，以(yi)充(chong)分蓋住組織為(wei)宜，室(shi)溫固(gu)定(ding)不少於15min。

3. 用PBS浸泡(pao)洗(xi)滌組織3 次(ci)，每(mei)次不(bu)少於5min。（優選步(bu)驟見(jian)註意(yi)事(shi)項(xiang)3）

4. 按(an)照(zhao)比(bi)例(li)配置(zhi)染(ran)色工(gong)作液。滴加適(shi)當(dang)量(liang)的染(ran)色工(gong)作液。

5. 37℃孵育(yu)過(guo)夜(ye)12-24h。建議使用濕盒防止(zhi)揮(hui)發(fa)或把整(zheng)個切片(pian)浸泡(pao)在染(ran)色工(gong)作液中。

6. 普(pu)通光(guang)學顯微鏡下觀(guan)察(cha)。如不能及時(shi)觀(guan)察(cha)，可使用水(shui)性(xing)明(ming)膠封片(pian)劑封片(pian)保存(cun) 。

註(zhu)意(yi)事(shi)項(xiang)：

1.    β-Gal 固(gu)定(ding)液有(you)壹定(ding)的腐(fu)蝕(shi)性(xing)和(he)毒性(xing)，操(cao)作(zuo)時(shi)請註意(yi)防護(hu)。

2.    β-半(ban)乳糖苷(gan)酶染(ran)色反(fan)應(ying)依賴(lai)於特定的(de)pH條件，不能在二氧(yang)化(hua)碳(tan)培養(yang)箱中進行染(ran)色反(fan)應(ying)。用於細(xi)胞(bao)培 養(yang)的二(er)氧化(hua)碳(tan)培養(yang)箱中較(jiao)高(gao)濃(nong)度的二氧(yang)化(hua)碳(tan)會(hui)影響染(ran)色工(gong)作液的(de)pH值(zhi)，而導致(zhi)染(ran)色失敗。

3.    優(you)選步(bu)驟，在滴加染(ran)色工(gong)作液之(zhi)前(qian)使用試(shi)劑(E):β-Gal染(ran)色液C替代(dai)1×PBS進行清(qing)洗(xi)和孵育(yu)。

4.    半(ban)乳糖苷(gan)酶穩定性(xing)較(jiao)差(cha)，在使用多(duo)聚(ju)甲(jia)醛固(gu)定(ding)或制備(bei)石(shi)蠟(la)切片(pian)時(shi)極(ji)易滅(mie)活(huo)，建議(yi)制備(bei)速(su)凍(dong)切片(pian)，或使 用酶保護(hu)型專(zhuan)用固(gu)定(ding)液：G2195-半(ban)乳(ru)糖苷(gan)酶定色劑進行固(gu)定(ding)和冰凍切片(pian)制備(bei)。組織浸(jin)於(yu)半乳(ru)糖苷(gan)酶定 色劑中可穩(wen)定(ding)酶活(huo)至少(shao)壹周(zhou)。

5.    配制(zhi)染(ran)色工(gong)作液時(shi)需使用聚(ju)丙烯(PP)容(rong)器或玻璃(li)容(rong)器，不(bu)宜(yi)使用聚(ju)苯乙烯(PS)容(rong)器。但(dan)染(ran)色時(shi)對(dui)容(rong)器 材(cai)質(zhi)無要(yao)求，例(li)如普通的(de)6孔板(ban)就可以(yi)用作染(ran)色的(de)容(rong)器。

6.    爬片(pian)或塗片(pian)如需長期(qi)保(bao)存(cun)可染(ran)色後蒸餾(liu)水(shui)洗(xi)2次，傾(qing)去多(duo)余液體晾幹(gan)後中性(xing)樹(shu)膠(jiao)封(feng)片(pian)。

7.    為(wei)了(le)您的(de)安全和(he)健(jian)康(kang)，請穿實(shi)驗(yan)服(fu)並戴壹次(ci)性(xing)手套操(cao)作。

β-半(ban)乳糖苷(gan)酶染(ran)色試(shi)劑盒 酶類(lei)染(ran)色 

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NobleRyder G9368 β-半(ban)乳糖苷(gan)酶染(ran)色試(shi)劑盒，Senescence-Associated β-Galactosidase（SA-β-Gal） Stain Kit 100T