酸性(xing)磷(lin)酸酶(acid phosphatase，ACP)分(fen)布(bu)極廣泛(fan)，遍(bian)布(bu)各種組(zu)織，主(zhu)要存(cun)在於細(xi)胞(bao)的(de)溶酶(mei)體內，所以(yi)常(chang)作為溶酶(mei)體標誌酶(mei)。溶(rong)酶(mei)體外的(de)酸性(xing)磷(lin)酸酶存(cun)在於內質(zhi)網和胞(bao)質(zhi)內。
抗酒石酸酸性(xing)磷(lin)酸酶染(ran)色試(shi)劑(ji)盒 酶類(lei)染(ran)色

NobleRyder G9270 抗酒石酸酸性(xing)磷(lin)酸酶染(ran)色試(shi)劑(ji)盒 Tartrate-Resistant Acid Phosphatase(TRAP) Stain Kit

產(chan)品(pin)貨(huo)號(hao)：G9270

產(chan)品(pin)名稱(cheng)：抗酒石酸酸性(xing)磷(lin)酸酶染(ran)色試(shi)劑(ji)盒，Tartrate-Resistant Acid Phosphatase(TRAP) Stain Kit

產(chan)品(pin)規格(ge)：4*10ml/4*20ml

抗酒石酸酸性(xing)磷(lin)酸酶染(ran)色試(shi)劑(ji)盒 酶類(lei)染(ran)色

產(chan)品(pin)簡介(jie)：

中(zhong)文(wen)名稱(cheng)：抗(kang)酒石酸酸性(xing)磷(lin)酸酶染(ran)色試(shi)劑(ji)盒

英(ying)文名(ming)稱(cheng)：Tartrate-Resistant Acid Phosphatase(TRAP) Stain Kit

規格(ge)：4*10ml ; 4*20ml

儲存條(tiao)件：-20℃，避(bi)光(guang)保(bao)存，有(you)效(xiao)期(qi)3個(ge)月(yue)。

具(ju)體產(chan)品(pin)的(de)參(can)數以(yi)收(shou)到產(chan)品(pin)說明書(shu)的(de)參(can)數為準

NobleRyder G9270 抗酒石酸酸性(xing)磷(lin)酸酶染(ran)色試(shi)劑(ji)盒，Tartrate-Resistant Acid Phosphatase(TRAP) Stain Kit產(chan)品(pin)介紹

酸性(xing)磷(lin)酸酶(acid phosphatase，ACP)分(fen)布(bu)極廣泛(fan)，遍(bian)布(bu)各種組(zu)織，主(zhu)要存(cun)在於細(xi)胞(bao)的(de)溶酶(mei)體內，所以(yi)常(chang)作為溶酶(mei)體標誌酶(mei)。溶(rong)酶(mei)體外的(de)酸性(xing)磷(lin)酸酶存(cun)在於內質(zhi)網和胞(bao)質(zhi)內。各種動(dong)物(wu)中(zhong)的(de)酸性(xing)磷(lin)酸酶各有(you)不(bu)同(tong)，酸性(xing)磷(lin)酸酶的(de)適宜pH為4.5-5.5。存在於正(zheng)常(chang)人肺泡(pao)巨(ju)噬(shi)細(xi)胞(bao)和白(bai)血(xue)病人脾(pi)臟(zang)的(de)抗酒石酸酸性(xing)磷(lin)酸酶(Tartrate-resist n t acid phosphatase，TRAP)均(jun)在細(xi)胞(bao)濾(lv)泡(pao)中(zhong)，並(bing)不(bu)是(shi)釋(shi)放(fang)入血(xue)液(ye)。血(xue)液(ye)中(zhong)的(de)TRAP絕大多數來(lai)源(yuan)於破(po)骨(gu)細(xi)胞(bao)，因此可(ke)以(yi)通(tong)過(guo)測量血(xue)液(ye)中(zhong)的(de)TRAP了解(jie)破(po)骨(gu)細(xi)胞(bao)的(de)功能(neng)狀(zhuang)態(tai)。

抗酒石酸酸性(xing)磷(lin)酸酶染(ran)色液(ye)以(yi)萘(nai)酚AS-BI為底(di)物(wu)，在酸性(xing)pH下(xia)被酸性(xing)磷(lin)酸酶水解(jie)釋(shi)放(fang)出磷(lin)酸和萘(nai)酚，萘酚與重氮(dan)鹽(yan)偶(ou)聯(lian)生成有(you)色(se)產(chan)物(wu)，定(ding)位於細(xi)胞(bao)質(zhi)中(zhong)，若(ruo)細(xi)胞(bao)內的(de)ACP有(you)抗(kang)酒石酸的(de)活性(xing)，則(ze)呈陽性(xing)反(fan)應。該染(ran)色液(ye)可(ke)用(yong)於(yu)新鮮(xian)血(xue)塗片(pian)、細(xi)胞(bao)塗片(pian)，亦可(ke)用(yong)於(yu)冰(bing)凍(dong)切(qie)片(pian)、石蠟(la)切(qie)片(pian)。

自(zi)備材(cai)料(liao)：

蒸(zheng)餾(liu)水、恒(heng)溫(wen)箱、載(zai)玻片(pian)、光(guang)學(xue)顯(xian)微(wei)鏡(jing)

操作步驟(zhou)：(僅供參(can)考)

(壹(yi)) 樣(yang)本(ben)處理(li)：

1、細(xi)胞(bao)塗片(pian)：取新鮮(xian)全血(xue)或骨(gu)髓制備塗片(pian)，推(tui)玻(bo)片(pian)於(yu)載(zai)玻片(pian)保(bao)持30度，置(zhi)於(yu)血(xue)液(ye)或細(xi)胞(bao)滴液(ye)的(de)正前(qian)方， 稍往後移(yi)與血(xue)液(ye)或細(xi)胞(bao)滴液(ye)接觸(chu)使(shi)後者沿推(tui)片(pian)下(xia)緣散(san)開(kai)，再(zai)勻(yun)速(su)沿載(zai)玻片(pian)平(ping)面(mian)平(ping)穩(wen)向前(qian)滑(hua)動(dong)至(zhi)均(jun)勻(yun)鋪 開為止，自(zi)然(ran)晾幹(gan)。

2、貼(tie)壁培(pei)養(yang)細(xi)胞(bao)、細(xi)胞(bao)爬片：吸(xi)去培(pei)養(yang)基(ji)，1×PBS清(qing)洗(xi)3-4次(ci)，瀝(li)去(qu)多余(yu)水分(fen)。取出細(xi)胞(bao)爬片。

3、冰(bing)凍(dong)切(qie)片(pian)：從冰(bing)箱取出放置恢復(fu)室溫(wen)，浸入蒸(zheng)餾(liu)水清(qing)洗1-2min，瀝(li)去(qu)多余(yu)水分(fen)。

4、石蠟(la)切(qie)片(pian)：石蠟(la)切(qie)片(pian)脫(tuo)蠟(la)5-10min，重復(fu)壹(yi)次(ci)。無水乙醇5min，90%乙醇和70%乙醇各2min，蒸(zheng)餾(liu) 水浸洗2min，瀝(li)去(qu)多余(yu)水分(fen)。

(二) 染(ran)色孵育(yu)：

1、使(shi)用2-8℃預冷(leng)的(de)TRAP固(gu)定(ding)液(ye)固(gu)定(ding)30s-3min，多數情(qing)況(kuang)下(xia)30-60s即可(ke)。

2、蒸(zheng)餾(liu)水洗(xi)，瀝(li)去(qu)多余(yu)水分(fen)(不(bu)宜過分幹燥(zao))。

3、（切(qie)片(pian)處理(li)）滴(di)加(jia)TRAP孵育(yu)液(ye)覆蓋(gai)切(qie)片(pian)，置於(yu)濕(shi)盒內37℃溫(wen)箱孵育(yu)45-60min，蒸(zheng)餾(liu)水洗(xi)。

4、（貼(tie)壁細(xi)胞(bao)）滴加(jia) TRAP孵育(yu)液(ye)覆蓋(gai)細(xi)胞(bao)，置於37℃溫(wen)箱孵育(yu)45-60min，蒸(zheng)餾(liu)水洗(xi)。

5、復(fu)染(ran)：蘇(su)mu素(su)或甲(jia)基綠復(fu)染(ran)液(ye)染(ran)色2-3min。如選用(yong)蘇(su)mu素(su)染(ran)色液(ye)復(fu)染(ran)，染(ran)色後須自(zi)來(lai)水返(fan)藍10min 或1×PBS返(fan)藍3-5min。

(三) 封片觀(guan)察(cha)：

1、（切(qie)片(pian)處理(li)）蒸(zheng)餾(liu)水稍(shao)洗，瀝(li)去(qu)多余(yu)水分(fen)，滴加(jia)水性(xing)封片劑(ji)封片後鏡(jing)檢(jian)觀(guan)察(cha)。

2、（貼(tie)壁細(xi)胞(bao)）蒸(zheng)餾(liu)水稍(shao)洗，可(ke)帶(dai)水或1×PBS鏡下(xia)觀察(cha)。

註意(yi)事(shi)項(xiang)：

1、該染(ran)色試(shi)劑(ji)盒為酶活(huo)原(yuan)位染(ran)色試(shi)劑(ji)盒，常用(yong)於(yu)破骨(gu)細(xi)胞(bao)細(xi)胞(bao)誘(you)導(dao)培(pei)養(yang)後細(xi)胞(bao)鑒定(ding)和組(zu)織中(zhong)特(te)定(ding)細(xi)胞(bao)定(ding)位，反應底(di)物(wu)和染(ran)料易(yi)失(shi)效，收到產(chan)品(pin)後建議第壹(yi)時間(jian)根(gen)據說(shuo)明書(shu)描(miao)述(shu)溫(wen)度妥(tuo)善保(bao)存。

2、試(shi)劑(ji)B2為偶(ou)氮(dan)染(ran)料儲備液(ye)，有(you)顆粒狀(zhuang)懸浮物(wu)屬(shu)正(zheng)常(chang)現(xian)象不(bu)影(ying)響(xiang)染(ran)色。如擔(dan)心，預混合(he)B1和B2可(ke)使(shi) 顆粒物(wu)wan全(quan)溶(rong)解(jie)，但(dan)需在2小時內使(shi)用完畢(bi)。

3、酶活(huo)易(yi)受(shou)多種因素(su)影(ying)響(xiang)導致(zhi)衰減(jian)或消失(shi)。建議樣(yang)本(ben)新鮮(xian)取材(cai)，使(shi)用預冷(leng)固(gu)定(ding)液(ye)在2-8℃冰(bing)箱固(gu)定(ding)，時間(jian)不(bu)宜超過24h。包埋時推(tui)薦(jian)使(shi)用低(di)熔(rong)點(dian)蠟(la)（52-56℃），避免(mian)熱失活(huo)。

4、為了您(nin)的(de)安全和健(jian)康，請(qing)穿實驗服(fu)並(bing)戴壹(yi)次(ci)性(xing)手(shou)套(tao)操作。

抗酒石酸酸性(xing)磷(lin)酸酶染(ran)色試(shi)劑(ji)盒 酶類(lei)染(ran)色 

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NobleRyder G9270 抗酒石酸酸性(xing)磷(lin)酸酶染(ran)色試(shi)劑(ji)盒，Tartrate-Resistant Acid Phosphatase(TRAP) Stain Kit 4*10ml/4*20ml