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| 品牌(pai) | NobleRyder/諾博(bo)萊(lai)德(de) | 貨(huo)號 | RET04 |
|---|---|---|---|
| 規(gui)格 | 50rxns / 100rxns | 供貨(huo)周期(qi) | 現(xian)貨(huo) |
| 主(zhu)要用(yong)途(tu) | 可高效(xiao)去(qu)除RNA中(zhong)的(de)基因(yin)組DNA汙染(ran)。 | 應用(yong)領(ling)域(yu) | 環(huan)保(bao),化工,生物產(chan)業,農林(lin)牧(mu)漁(yu),制(zhi)藥(yao)/生物制藥(yao) |
諾博(bo)萊(lai)德(de) cDNA合(he)成
cDNA合成(cheng) 反轉錄
產(chan)品名(ming)稱：cDNA合(he)成(cheng)
產(chan)品內(nei)容：
| 組分 | RET04-50 | RET04-100 |
| 4× Master SuperMix 5×gDNA Eraser Mix RNase-free Water | 250 μL 100 μL 1 mL | 500 μL 2×100 μL 2×1 mL |
產(chan)品簡介(jie):
NobleRyder® First Strand cDNA Synthesis SuperMix for qPCR（with dsDNase）是壹(yi)款含(han)有基因組去除組分的(de)第(di)壹鏈(lian)cDNA合(he)成(cheng)試(shi)劑(ji)盒，可高效(xiao)去(qu)除RNA中(zhong)的(de)基因(yin)組DNA汙染(ran)。4× Master SuperMix 中(zhong)包(bao)含(han)第(di)壹鏈(lian)cDNA合(he)成(cheng)所需(xu)的(de)所有組分，使(shi)用(yong)時(shi)僅需(xu)加入RNA模(mo)板和水即(ji)可進行合成，使(shi)用(yong)本試(shi)劑(ji)盒獲(huo)得的(de)cDNA可用(yong)於qPCR、普(pu)通(tong)PCR等(deng)實(shi)驗(yan)。
註(zhu)意(yi)事(shi)項(xiang):
1. 請(qing)於使(shi)用(yong)前(qian)確(que)保產(chan)品wan全(quan)解凍，che底(di)混(hun)勻後(hou)短(duan)暫離心(xin)，置於冰(bing)上備(bei)用(yong)。
2. 為(wei)避免(mian)樣品(pin)間交叉(cha)汙染(ran)和氣(qi)溶膠(jiao)汙染(ran)，推薦在超凈臺或生物安(an)全(quan)櫃中(zhong)進(jin)行反應體系(xi)的(de)配(pei)制,並(bing)使(shi)用(yong)帶(dai)濾(lv)芯的(de)吸頭。
3. 反(fan)復(fu)凍融會(hui)影(ying)響(xiang)產(chan)品的(de)性能。
4. 為(wei)了(le)您(nin)的(de)安(an)全(quan)和健(jian)康，請穿(chuan)實(shi)驗(yan)服並(bing)戴(dai)壹(yi)次性手套(tao)操(cao)作(zuo)。
實(shi)驗(yan)流(liu)程(cheng):
基(ji)因組DNA去除
| 試(shi)劑(ji) | 體積(ji) |
| 5× gDNA Eraser Mix | 2 μL |
| Total RNA | ＜1 μg |
| RNase-free Water | up to 10 μL |
用(yong)移(yi)液(ye)器輕輕(qing)吹(chui)打混(hun)勻，37℃反應2min，立即(ji)置於冰(bing)上，或者繼(ji)續55℃反(fan)應5min後(hou)置於冰(bing)上。（55℃反應5min能充(chong)分(fen)失(shi)活dsDNase，後(hou)續加入的(de)4× Master SuperMix中(zhong)含(han)有DTT也能抑制(zhi)dsDNase的(de)活性(xing)）
配(pei)置第(di)壹鏈(lian)cDNA合(he)成(cheng)反應體系(xi)
試(shi)劑(ji)配(pei)置
| 試(shi)劑(ji) | 體積(ji) |
| 4× Master SuperMix | 5 μL |
| Total RNA | Up to 1 μg |
| RNase-free Water | Up to 20 μL |
2 輕(qing)柔(rou)吸(xi)打混(hun)勻。
3反應程(cheng)序設(she)置
| 溫度 | 時(shi)間 |
| 25℃ 50℃* 85℃ | 5 min 15~45 min 5 min |
*如(ru)果(guo)模(mo)板具(ju)有復(fu)雜(za)二(er)級結(jie)構或高GC區(qu)域(yu)，可將反應溫(wen)度(du)提高到(dao)55℃，有助於提高產(chan)量(liang)。
4 該產(chan)物可直接(jie)用(yong)於第(di)二鏈(lian)的(de)合成(cheng)或qPCR擴(kuo)增反應，請(qing)在-20℃保(bao)存(cun)產(chan)物。
cDNA合成(cheng) 反(fan)轉錄