采(cai)用(yong) RNAzol LS Reagent 與吸(xi)附(fu)柱(zhu)相(xiang)結(jie)合提(ti)取總(zong) RNA 的方法，簡化了(le)RNA 提取的流程，與經(jing)典的異丙(bing)醇(chun)沈(chen)澱(dian)法相(xiang)比(bi)，柱式純(chun)化方法(fa)簡(jian)便(bian)，去除雜(za)質(zhi)能(neng)力(li)更(geng)強，大(da)大(da)提高了(le) RNA 的純(chun)度(du)。該試(shi)劑盒(he)可從各(ge)種血(xue)液(ye)、血(xue)漿(jiang)、血(xue)清中快速(su)提(ti)取總(zong) RNA，每個吸(xi)附(fu)柱(zhu)每次(ci)可處(chu)理(li) 0.25ml 液(ye)體樣(yang)本(ben)或(huo) 5~10×106細(xi)胞(bao)。
超(chao)速(su)全(quan)血(xue)（液(ye)體樣(yang)本(ben)）總(zong)RNA提(ti)取試(shi)劑盒(he)

諾(nuo)博萊(lai)德(de) 超(chao)速(su)全(quan)血(xue)（液(ye)體樣(yang)本(ben)）總(zong)RNA提(ti)取試(shi)劑盒(he)

超(chao)速(su)血(xue)液(ye)總 RNA 提(ti)取試(shi)劑盒(he)FlashPure Blood Total RNA Kit

目錄號：91213

產品內容

自(zi)備試(shi)劑

無(wu)水(shui)乙(yi)醇(chun)

保(bao)存(cun)條件(jian)

室溫(wen)（15 ~ 25℃）

具體產品的參數(shu)以收到(dao)產(chan)品說(shuo)明書(shu)的參數(shu)為準(zhun)

產品簡介

采(cai)用(yong) RNAzol LS Reagent 與吸(xi)附(fu)柱(zhu)相(xiang)結(jie)合提(ti)取總(zong) RNA 的方法，簡化了(le)RNA 提取的流程，與經(jing)典的異丙(bing)醇(chun)沈(chen)澱(dian)法相(xiang)比(bi)，柱式純(chun)化方法(fa)簡(jian)便(bian)，去除雜(za)質(zhi)能(neng)力(li)更(geng)強，大(da)大(da)提高了(le) RNA 的純(chun)度(du)。該試(shi)劑盒(he)可從各(ge)種血(xue)液(ye)、血(xue)漿(jiang)、血(xue)清中快速(su)提(ti)取總(zong) RNA，每個吸(xi)附(fu)柱(zhu)每次(ci)可處(chu)理(li) 0.25ml 液(ye)體樣(yang)本(ben)或(huo) 5~10×10⁶細(xi)胞(bao)。提取的總 RNA 沒有 DNA 和(he)蛋(dan)白(bai)的汙(wu)染，可用(yong)於(yu)Northern Blot、Dot Blot、PolyA 篩(shai)選、體外翻(fan)譯(yi)、RNase 保(bao)護分析(xi)和分(fen)子(zi)克隆。

產(chan)品特點

1. RNA 純(chun)度(du)更(geng)高；

2. 應(ying)用(yong)廣泛(fan)：可提取多(duo)種不(bu)同的樣(yang)本(ben)材(cai)料(liao)。

註意事(shi)項

1. 血(xue)液(ye) RNA 的常(chang)溫(wen)保(bao)存(cun)/運輸(shu)/提(ti)取的簡易方(fang)案：

臨(lin)床(chuang)取樣(yang)：在(zai)臨(lin)床(chuang)上(shang)，使用(yong)抗(kang)凝管(guan)采(cai)血(xue)後，取 250 μl 新鮮(xian)血(xue)液(ye)，加(jia)入(ru) 750μl的裂解(jie)液(ye)RLS( RNAzol LS Reagent，Cat#91012-100)，用(yong)移液(ye)槍反(fan)復抽(chou)打並(bing)振蕩(dang)混勻，在室溫(wen)裂解(jie)5~10min，直至(zhi)血(xue)細胞(bao)充(chong)分(fen)發生(sheng)裂(lie)解(jie)。

保(bao)存(cun)：經(jing)裂解(jie)後的血(xue)液(ye)可在-20℃下(xia)保(bao)存(cun) 1-2 個月，在-70℃保(bao)存(cun)半年。

運輸(shu)：可冰袋 4℃運輸(shu) 1 天(tian)，幹冰-20℃運輸(shu)壹(yi)周(zhou)。

提取：後續(xu) RNA 提取按(an) R213（或(huo) R012）的說(shuo)明書(shu)進(jin)行。

2. 樣(yang)品應(ying)避(bi)免反(fan)復凍融，否則(ze)會(hui)影(ying)響 RNA 的提取得率(lv)和質(zhi)量(liang)。

操作(zuo)步(bu)驟(zhou)（所(suo)有(you)離(li)心(xin)步(bu)驟(zhou)均(jun)可在室溫(wen)下(xia)進(jin)行，不(bu)影(ying)響提(ti)取效(xiao)果(guo)！）

操作(zuo)前，請(qing)先在(zai)漂洗液(ye) RW、70%乙(yi)醇(chun)中加(jia)入(ru)無(wu)水(shui)乙(yi)醇(chun)，詳見(jian)瓶(ping)身的標簽(qian)。

1. 每 250 μl 液(ye)體樣(yang)品 (血(xue)清、血(xue)漿(jiang)、腦脊(ji)液(ye)、凍存(cun)血(xue)等(deng))，加(jia)入(ru) 750 μl裂解(jie)液(ye) RLS，用(yong)移液(ye)器反(fan)復抽(chou)打幾次(ci)，然(ran)後劇(ju)烈(lie)渦(wo)旋震(zhen)蕩(dang)，充(chong)分(fen)混勻。

（液(ye)體樣(yang)品和裂解(jie)液(ye) RLS 的終體積比(bi)總是 1：3）

2. 將(jiang)勻漿(jiang)樣(yang)品在室溫(wen)下(xia)放(fang)置(zhi) 5 min，使得核(he)酸蛋白復合物完quan分離(li)。

3. 加(jia)入(ru) 200μl 氯仿，劇烈(lie)振蕩(dang) 15 秒(miao)，並(bing)在(zai)室溫(wen)下(xia)放(fang)置(zhi) 2-3 分鐘(zhong)。

4. 12,000 rpm 離(li)心(xin) 10 min。樣(yang)品會(hui)分成(cheng)三層：下(xia)層有(you)機相(xiang)，中間(jian)層和(he)上(shang)層(ceng)無(wu)色的水(shui)相(xiang)，RNA 存(cun)在於(yu)水(shui)相(xiang)中。水(shui)相(xiang)層的容量大(da)約為所(suo)加(jia) RLS體積(ji)的 70%，轉移上(shang)清(qing)至(zhi)壹(yi)個新的離(li)心(xin)管中，進(jin)行下(xia)壹(yi)步(bu)操(cao)作(zuo)。

5. 向(xiang)上(shang)清(qing)中加(jia)入(ru)等(deng)體(ti)積(ji) 70％乙(yi)醇(chun)（檢(jian)查(zha)是否(fou)已(yi)加(jia)入(ru)乙(yi)醇(chun)），顛(dian)倒(dao)混勻。

6. 每次(ci)轉移≤750 μl 上(shang)清(qing)混合(he)液(ye)（包(bao)括沈澱(dian)）至(zhi) RNA 吸(xi)附(fu)柱(zhu)中，12,000rpm 離(li)心(xin) 1 min，倒棄(qi)濾液(ye)。重復此過(guo)程(cheng)，直(zhi)到(dao)溶液(ye)全部(bu)上(shang)柱(zhu)。

7. 加(jia)入(ru) 500μl 去蛋白液(ye) RE，12,000 rpm 離(li)心(xin) 1 min，倒棄(qi)濾液(ye)。

8. 加(jia)入(ru) 500 μl 漂洗液(ye) RW，12,000 rpm 離(li)心(xin) 1 min，倒棄(qi)濾液(ye)。

（註意：漂洗液(ye) RW 中按要(yao)求(qiu)加(jia)入(ru)無(wu)水(shui)乙(yi)醇(chun)，用(yong)後立(li)即蓋緊瓶(ping)蓋，以(yi)防乙(yi)醇(chun)揮(hui)發）

9. 可選步(bu)驟(zhou)：重復步(bu)驟(zhou) 8 壹(yi)次(ci)。

10. 將RNA吸(xi)附(fu)柱(zhu)放(fang)回空(kong)收集(ji)管(guan)中，12,000 rpm 離(li)心(xin)2min，去除乙(yi)醇(chun)。

11. 取出RNA吸(xi)附(fu)柱(zhu)，放(fang)入(ru)壹(yi)個新的 RNase-Free 1.5 ml 離(li)心(xin)管中，向(xiang)吸(xi)附(fu)膜(mo)的中央加(jia)入(ru) 30~50 μl 的RNase-Free ddH2O，室溫(wen)放(fang)置(zhi) 2 min，12,000 rpm 離(li)心(xin) 1 min。

（註(zhu)意：如(ru)要(yao)要(yao)提(ti)高 RNA 濃度(du)，可將得到(dao)的溶液(ye)重新加(jia)到(dao)吸(xi)附(fu)柱(zhu)中，室溫(wen)放(fang)置(zhi)2 min，再次(ci)離(li)心(xin)收集(ji)）

12. 提(ti)取的 RNA，可直接(jie)用(yong)於(yu)下(xia)遊(you)實(shi)驗(yan)，或(huo)於(yu)-70℃保(bao)存(cun)，以免降解(jie)。

相(xiang)關產(chan)品：

71118-100 Script III 1st Strand cDNA Synthesis Kit（for PCR or qPCR）

71710-100 Script III All-in-one RT Mix with dsDNase（for qPCR）

71600-500 2x Universal SYBR Green qPCR Mix (適用(yong)於(yu)所(suo)有qPCR儀)

超(chao)速(su)全(quan)血(xue)（液(ye)體樣(yang)本(ben)）總(zong)RNA提(ti)取試(shi)劑盒(he)