RNAsafe 是壹(yi)種水(shui)相(xiang)的，無毒(du)的(de)組織(zhi)保(bao)存(cun)液體，可以(yi)迅速滲入新(xin)鮮(xian)組織(zhi)細胞(bao)的胞(bao)漿(jiang)中，在非凍(dong)狀態(tai)下(xia)原(yuan)位穩定和保(bao)護細胞(bao)內的RNA。適用(yong)於動(dong)物組織(zhi)（心，肝，腎(shen)，肌(ji)肉(rou)，睪丸(wan)，腦，脾(pi)等(deng)）、培養(yang)細胞(bao)、RNA 病(bing)毒(du)、果(guo)蠅、細(xi)菌(jun)、白(bai)細胞(bao)、全血、壹(yi)些植物組織(zhi)等(deng)。
RNAsafe無液氮RNA樣品(pin)保(bao)存(cun)液（RNAlater）

諾(nuo)博(bo)萊德 RNAsafe無液氮RNA樣品(pin)保(bao)存(cun)液（RNAlater）

RNAsafe 無液氮 RNA 樣品(pin)保(bao)存(cun)液

目(mu)錄號(hao)：91115

產(chan)品(pin)內容

具(ju)體產(chan)品(pin)的參(can)數(shu)以(yi)收(shou)到產品說(shuo)明(ming)書(shu)的參(can)數(shu)為(wei)準(zhun)

產(chan)品(pin)簡介(jie)

RNAsafe 是壹(yi)種水(shui)相(xiang)的，無毒(du)的(de)組織(zhi)保(bao)存(cun)液體，可以(yi)迅速滲入新(xin)鮮(xian)組織(zhi)細胞(bao)的胞(bao)漿(jiang)中，在非凍(dong)狀態(tai)下(xia)原(yuan)位穩定和保(bao)護細胞(bao)內的RNA。適用(yong)於動(dong)物組織(zhi)（心，肝，腎(shen)，肌(ji)肉(rou)，睪丸(wan)，腦，脾(pi)等(deng)）、培養(yang)細胞(bao)、RNA 病(bing)毒(du)、果(guo)蠅、細(xi)菌(jun)、白(bai)細胞(bao)、全血、壹(yi)些植物組織(zhi)等(deng)。

特(te)別適(shi)合(he)野外(wai)和臨(lin)床(chuang)采集(ji)樣(yang)本(ben)，無需攜帶(dai)液氮，浸入RNAsafe後，新(xin)鮮(xian)組織(zhi)細胞(bao)中RNA可以(yi)完(wan)好地(di)在(zai)37℃下(xia)保(bao)存(cun)壹(yi)天, 在(zai)25℃下(xia)保(bao)存(cun)壹(yi)周(zhou), 4℃下(xia)保(bao)存(cun)壹(yi)個(ge)月(yue), 在(zai)-20℃或-80℃下(xia)長(chang)期(qi)保(bao)存(cun)。RNA 病(bing)毒(du)樣(yang)品(如(ru)HCV 和HIV)可在37℃保(bao)存(cun)壹(yi)個(ge)月(yue)。

產(chan)品(pin)特點(dian)

操作(zuo)容(rong)易：將(jiang)組織(zhi)jian成適當大(da)小，浸(jin)沒在RNAsafe中(zhong)即(ji)可使其(qi)RNA不被降解。

無需液氮：使樣(yang)品的保(bao)存(cun)不需液氮幹冰或-80℃冰箱(xiang) 尤(you)其(qi)適(shi)用(yong)於臨(lin)床(chuang)和野外(wai)樣(yang)品的快速(su)和大(da)規(gui)模采集(ji)。

方(fang)便(bian)運輸：處(chu)理(li)過(guo)的(de)樣(yang)品(pin)能(neng)在25℃保(bao)存(cun)壹(yi)周(zhou)，使樣(yang)品郵寄和運輸變得(de)容易。

多(duo)次凍(dong)融: 經(jing)RNAsafe處(chu)理(li)的樣品可反復(fu)凍(dong)融多(duo)次，不影響提取(qu)的RNA 質(zhi)量(liang)。

可比性強(qiang): 能(neng)減少(shao)重復實(shi)驗中(zhong)的(de)誤(wu)差(cha)，對(dui)大(da)規(gui)模基因(yin)表達譜的(de)分析(xi)尤(you)其(qi)有用(yong)。

兼(jian)容性(xing)廣: 多(duo)種總(zong)RNA提取(qu)試劑都(dou)可以(yi)用(yong)來(lai)提取(qu)保(bao)存(cun)在RNAsafe內的樣品。還可直(zhi)接用(yong)於組織(zhi)切片免疫(yi)學(xue)和流(liu)式細胞(bao)分析(xi)而不影響RNA提取(qu)的質(zhi)量(liang)。

壹(yi)、如何使用(yong)RNAsafe：

RNAsafe只(zhi)用(yong)於新(xin)鮮(xian)組織(zhi)，浸泡入RNAsafe前禁止(zhi)冷(leng)凍(dong)組織(zhi)。只(zhi)需要迅速將新(xin)鮮(xian)組織(zhi)jian成長(chang)，寬(kuan)，高(gao)任意(yi)壹(yi)邊(bian)厚(hou)度(du)<0.5厘(li)米浸泡入RNAsafe即(ji)可（只(zhi)要有壹(yi)邊(bian)厚(hou)度(du)不超過(guo)0.5厘(li)米，RNAsafe可以(yi)迅速滲透，其(qi)它(ta)兩(liang)邊(bian)的(de)尺寸(cun)並(bing)不重要）。將(jiang)新(xin)鮮(xian)組織(zhi)浸泡在5倍(bei)體積的(de)RNAsafe中，按要求存放在適(shi)當(dang)的(de)溫度(du)。

1. 動(dong)物組織(zhi)

RNAsafe並(bing)不破(po)壞或者溶解組織(zhi)結構(gou)，因(yin)此浸(jin)泡在RNAsafe中(zhong)達到滲透平衡(heng)的組織(zhi)可以(yi)從RNAsafe中取(qu)出，然(ran)後切(qie)成(cheng)更小的(de)塊(kuai)，然(ran)後放(fang)回(hui)到RNAsafe中(zhong)下(xia)次(ci)繼續使用(yong)。小器(qi)官如小鼠(shu)肝，腎(shen)，和脾(pi)不需要剪(jian)切，可以(yi)完(wan)整的存放(fang)在(zai)RNAsafe中(zhong)。

2. 植物組織(zhi)

很(hen)多(duo)植物組織(zhi)直(zhi)接浸泡入RNAsafe即(ji)可，有的植物有天然(ran)滲透屏(ping)障如臘質(zhi)保(bao)護層(ceng)，需要先破(po)壞掉(diao)臘質(zhi)層(ceng)，便(bian)於RNAsafe滲透。

3. 組織(zhi)培養(yang)細胞(bao)

細(xi)胞(bao)吹打下(xia)來(lai)後，離心收(shou)集(ji)細(xi)胞(bao),棄上(shang)清，用(yong)冰浴(yu)的PBS緩沖(chong)液洗(xi)壹(yi)次去除(chu)殘(can)留(liu)培養(yang)液。將細胞(bao)懸浮在(zai)少(shao)量(liang)PBS緩沖(chong)液中。加入五到(dao)十(shi)倍(bei)體積RNAsafe, 混(hun)均。

4. 血(xue)和血漿(jiang)

和紅(hong)細胞(bao)和血清(qing)分離的白(bai)細胞(bao)可以(yi)和組織(zhi)培養(yang)細胞(bao)壹(yi)樣的(de)保(bao)存(cun)。RNAsafe也可以(yi)保(bao)存(cun)抗(kang)凝全(quan)血，血清和血漿(jiang)。對(dui)於全(quan)血(xue)加入3倍體積RNAsafe，混(hun)勻。

5. 酵(jiao)母

離心收(shou)集(ji)3X108的(de)細(xi)胞(bao)（>12，000g離心兩(liang)分鐘(zhong)），立刻(ke)將(jiang)細(xi)胞(bao)團(tuan)重懸在0.5~1 ml 的(de)RNAsafe中(zhong)。酵(jiao)母細胞(bao)可以(yi)保(bao)存(cun)在RNAsafe中25℃8小時或者4℃壹(yi)個(ge)星期(qi)。如(ru)果(guo)要保(bao)存(cun)存更長(chang)時間(jian)，將酵(jiao)母細胞(bao)在RNAsafe中放置壹(yi)個(ge)小時後， 再次於>12,000g離心5分鐘(zhong)，將(jiang)酵(jiao)母細胞(bao)團(tuan)放入液氮瞬時冷(leng)凍(dong)後放(fang)置於–80℃儲(chu)存(cun)。

6. 細(xi)菌(jun)

細(xi)菌(jun)並(bing)不能(neng)在RNAsafe 中(zhong)生長(chang)，但是RNAsafe並(bing)不破(po)壞細菌，E. coli在4℃ 保(bao)存(cun)壹(yi)個(ge)月(yue)仍(reng)舊可以(yi)提出完整的(de)RNA。

二(er)、RNAsafe中樣(yang)本的(de)存放：

1. 存(cun)放(fang)在–80℃

文(wen)檔(dang)樣品(pin)長(chang)期(qi)保(bao)存(cun)用(yong)。將(jiang)RNAsafe中樣(yang)本(ben)放置於4℃過(guo)夜(ye)，然(ran)後將(jiang)樣(yang)本(ben)撈出，盡(jin)量(liang)去除(chu)幹(gan)凈(jing)RNAsafe液體，然(ran)後放(fang)置(zhi)於–80℃. 對(dui)於組織(zhi)培養(yang)細胞(bao)，則不需要去除(chu)RNAsafe，直(zhi)接冷(leng)凍(dong)於–80℃，並(bing)不會裂(lie)解細胞(bao)。樣品使用(yong)時可以(yi)在(zai)室溫(wen)融化，並(bing)且(qie)還可以(yi)再(zai)次冷(leng)凍(dong)而不影響RNA的完整(zheng)性和產量(liang)。

2. 存(cun)放(fang)在–20℃

將(jiang)RNAsafe中(zhong)樣本(ben)放置(zhi)於4℃過(guo)夜(ye)，然(ran)後轉(zhuan)移(yi)到(dao)–20℃。在–20℃樣品並(bing)不會被(bei)冰凍(dong)，但是可能(neng)會形(xing)成壹(yi)些結(jie)晶，這並(bing)不會影響將來的(de)RNA提取(qu)。樣品(pin)使用(yong)時可以(yi)在(zai)室溫(wen)融化，並(bing)且(qie)還可以(yi)再(zai)次冷(leng)凍(dong)而不影響RNA的完整(zheng)性和產量(liang)。

3. 存(cun)放(fang)在4℃

樣(yang)本(ben)可以(yi)在(zai)4℃存放壹(yi)個(ge)月(yue)。

4. 存(cun)放(fang)於25℃

存(cun)放(fang)於25℃樣(yang)本(ben)的RNA在(zai)壹(yi)周(zhou)內保(bao)持(chi)完整，保(bao)存(cun)兩(liang)周(zhou)的樣品(pin)RNA有輕微(wei)降解，勉強能(neng)用(yong)於northern analysis, 但(dan)是質(zhi)量(liang)足(zu)夠(gou)用(yong)於nuclease protection assay or RT-PCR analysis。

5. 存(cun)放(fang)於37℃

存(cun)放(fang)於37℃樣(yang)本(ben)的RNA在(zai)24小時內保(bao)持(chi)完整，3天的(de)時候有部(bu)分降解。

三、RNAsafe 保(bao)存(cun)樣本的(de) RNA 提取(qu)：

將(jiang)樣(yang)本從RNAsafe中取(qu)出，RNAsafe可以(yi)直(zhi)接倒(dao)入水池(chi)，用(yong)自來水(shui)沖(chong)洗(xi)即(ji)可，不需特殊處(chu)理(li)。

1. 組織(zhi)

需要用(yong)幹(gan)凈(jing)鑷子(zi)將樣本從RNAsafe中撈(lao)出，用(yong)吸(xi)水紙(zhi)稍(shao)稍吸去殘(can)留的RNAsafe後，可以(yi)和新(xin)鮮(xian)組織(zhi)壹(yi)樣按照液氮研(yan)磨，然(ran)後勻(yun)漿(jiang)處理(li)的標準(zhun)程序進行(xing)提取(qu)RNA。

2. 細(xi)胞(bao)

對(dui)於儲(chu)存(cun)在RNAsafe中(zhong)的細胞(bao)有兩(liang)種選(xuan)擇(ze)。壹(yi)是去除(chu)RNAsafe後(hou)提取(qu)RNA, 另(ling)壹(yi)個(ge)是直(zhi)接從細胞(bao)和RNAsafe的混(hun)合物(wu)提取(qu)。

a. 去除(chu) RNAsafe 後(hou)提取(qu) RNA

存(cun)放(fang)於RNAsafe中(zhong)的(de)細胞(bao)變得不那(na)麽脆弱，可以(yi)承(cheng)受較(jiao)高(gao)的離心速(su)度(du)而不被裂(lie)解。我們有在5000g離心成(cheng)功(gong)收集(ji)細(xi)胞(bao)的經驗，由(you)於每(mei)種細(xi)胞(bao)的強度(du)不壹(yi)樣， 可以(yi)先用(yong)不重要的(de)細胞(bao)做個(ge)預(yu)試驗(yan)，以(yi)保(bao)證(zheng)在使用(yong)的(de)速度(du)下(xia)離心不會破(po)壞細胞(bao)。另(ling)壹(yi)個(ge)選擇(ze)是在(zai)離心前加等(deng)體積的(de)

PBS稀(xi)釋(shi)RNAsafe和細胞(bao)的混合物，以(yi)減(jian)少(shao)溶液的密度(du)，使細(xi)胞(bao)溶液可以(yi)沈澱下(xia)來(lai)。

b. 不去除(chu) RNAsafe，直(zhi)接提取(qu) RNA

也可以(yi)直(zhi)接加10倍(bei)體積的(de)壹(yi)步法(fa)提取(qu)試劑（如RNAzol，Trizol reagent）到(dao)細胞(bao)和RNAsafe的混(hun)合物(wu)，然(ran)後按照正(zheng)常(chang)步驟(zhou)操作(zuo)。

相(xiang)關產(chan)品：

71118-100 Script III 1st Strand cDNA Synthesis Kit（for PCR or qPCR）

71710-100 Script III All-in-one RT Mix with dsDNase（for qPCR）

71600-500 2x Universal SYBR Green qPCR Mix (適(shi)用(yong)於所(suo)有qPCR儀)

RNAsafe無液氮RNA樣品(pin)保(bao)存(cun)液（RNAlater）