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| 品牌 | NobleRyder/諾博(bo)萊德 | 貨號(hao) | DC6001 |
|---|---|---|---|
| 規格(ge) | 50T/48S | 供貨(huo)周期(qi) | 現(xian)貨(huo) |
| 主要(yao)用(yong)途(tu) | H2S 是(shi)壹(yi)種(zhong)新(xin)型(xing)氣態(tai)信(xin)號(hao)分子,存在(zai)於腦內的(de)神經(jing)遞(di)質 | 應用(yong)領(ling)域(yu) | 環(huan)保,化工(gong),生物(wu)產業(ye),農(nong)林牧漁,制(zhi)藥/生物(wu)制(zhi)藥 |
H2S 含(han)量測(ce)定(ding)試劑(ji)盒(he)說明書(shu)
分光(guang)光(guang)度(du)法(fa) 50 管(guan)/48 樣(yang)
H2S 含(han)量測(ce)定(ding)試劑(ji)盒(he) 信號(hao)系列(lie)
正式測(ce)定(ding)前務必取(qu) 2-3 個預(yu)期差異(yi)較大的(de)樣(yang)本做預(yu)測(ce)定(ding)測(ce)定(ding)意(yi)義(yi):
H2S 是(shi)壹(yi)種(zhong)新(xin)型(xing)氣態(tai)信(xin)號(hao)分子,存在(zai)於腦內的(de)神經(jing)遞(di)質,生理(li)濃度(du)的(de)H2S 對(dui)神經(jing)系統(tong)海馬的(de)長(chang)時(shi)程增(zeng)強(qiang)功(gong)能具有(you)重(zhong)要(yao)的(de)調(tiao)節作用(yong),並(bing)對(dui)自(zi)發(fa)性(xing)高(gao)血(xue)壓、出血(xue)性(xing)休(xiu)克(ke)及(ji)肝硬(ying)化等(deng)疾病(bing)的(de)過(guo)程發(fa)揮(hui)著(zhe)重(zhong)要(yao)的(de)病(bing)理生理(li)效(xiao)應。
測(ce)定(ding)原(yuan)理:
H2S 與醋(cu)酸(suan)鋅(xin)、N, N-二甲(jia)基(ji)對(dui)苯二胺(an)和(he)硫酸鐵銨等(deng)反(fan)應生成(cheng)ya甲基(ji)藍(lan),ya甲基(ji)藍(lan)在 665nm 處(chu)有(you)最大吸收(shou)峰,通(tong)過(guo)測(ce)定(ding)其吸光(guang)值(zhi)可計(ji)算 H2S 含(han)量。
組成(cheng):
產品(pin)名(ming)稱(cheng) | DC6001-50T/48S | Storage |
提(ti)取(qu)液(ye):液(ye)體(ti) | 50ml | 4℃ |
試(shi)劑(ji)壹(yi):液(ye)體(ti) | 50ml | 4℃ |
試(shi)劑(ji)二:液(ye)體(ti) | 32ml | 4℃ |
試(shi)劑(ji)三(san):液(ye)體(ti) | 16ml | 4℃避(bi)光(guang) |
試(shi)劑(ji)四(si):液(ye)體(ti) | 16ml | 4℃ |
試(shi)劑(ji)五(wu):液(ye)體(ti) | 2.5ml | 4℃避(bi)光(guang) |
說(shuo)明書(shu) | 壹(yi)份 | |
試(shi)劑(ji)三(san):液(ye)體(ti) 16ml×1 瓶(ping),4℃避光(guang)保存。試劑(ji)五(wu):液(ye)體(ti) 2.5ml×1 瓶(ping),4℃避光(guang)保存。
自(zi)備儀(yi)器(qi)和用(yong)品(pin):
天平、低(di)溫離心(xin)機(ji)、可(ke)見(jian)分光(guang)光(guang)度(du)計(ji)、1 ml 玻璃(li)比色(se)皿、蒸(zheng)餾水(shui)。
樣(yang)品處理:
組織:按照組織質量(g):提(ti)取(qu)液(ye)體(ti)積(ji)(ml)為 1:5~10 的(de)比(bi)例(建議(yi)稱(cheng)取約(yue) 0.1g 組織,加入 1ml 提(ti)取(qu)液(ye))進行冰浴勻(yun)漿(jiang),然(ran)後(hou) 10000g,4℃離心(xin) 10min,取上(shang)清(qing),置(zhi)冰上待測(ce)。
細菌、真菌(jun):按照細胞數(shu)量(104 個):提(ti)取(qu)液(ye)體(ti)積(ji)(ml)為 500~1000:1 的(de)比(bi)例(建議(yi) 500 萬細胞加入(ru) 1ml 提(ti)取(qu)液(ye)),冰浴超聲波(bo)破碎細胞(功(gong)率 300w,超聲 3 秒(miao),間隔 7 秒(miao),總(zong)時(shi)間 3min);然(ran)後(hou) 10000g, 4℃,離心(xin) 10min,取上(shang)清(qing)置(zhi)於冰上待測(ce)。
血(xue)清(漿(jiang)):直(zhi)接測(ce)定(ding)
操(cao)作表(biao)(取(qu) 2 ml 離心(xin)管,按照下(xia)表(biao)操(cao)作(zuo)):
空(kong)白(bai)管(guan) | 測(ce)定(ding)管 | |
樣(yang)品(μl) | 600 | |
H2O(μl) | 600 | |
試(shi)劑(ji)壹(yi)(μl) | 600 | 600 |
充(chong)分震(zhen)蕩(dang)混勻(yun) | ||
試(shi)劑(ji)二(μl) | 600 | 600 |
10000g,4℃,離心(xin) 10min,去(qu)上清(qing),留沈澱(dian) | ||
H2O(μl) | 600 | 600 |
10000g,4℃,離心(xin) 10min,去(qu)上清(qing),留沈澱(dian) | ||
試(shi)劑(ji)壹(yi)(μl) | 300 | 300 |
試(shi)劑(ji)三(san)(μl) | 300 | 300 |
充(chong)分震(zhen)蕩(dang)混勻(yun) | ||
試(shi)劑(ji)四(si)(μl) | 300 | 300 |
10000g,4℃,離心(xin) 10min,取(qu) 800μl 上(shang)清加(jia)入 1ml 玻(bo)璃(li)比色(se)皿 | ||
試(shi)劑(ji)五(wu)(μl) | 40 | 40 |
混(hun)勻,25℃靜(jing)置 5min,測(ce)定(ding) 665nm 吸(xi)光(guang)值(zhi),記為A 測(ce)定(ding)和A 空(kong)白(bai),ΔA=A 測(ce)定(ding)-A 空(kong)白(bai)。 | ||
H2S 計(ji)算公式(shi):
標(biao)準曲(qu)線(xian)回(hui)歸方(fang)程為:y = 0.0044x,R2 = 0.9988
組織樣(yang)品
a.按照蛋白(bai)濃度(du)計(ji)算
H2S(nmol/mg prot)= b.按照樣(yang)本重(zhong)量計(ji)算 H2S(nmol/g 鮮重(zhong))=
ΔA ×V 反(fan)總÷(V 樣(yang)×Cpr)=340.9×ΔA÷Cpr
0.0044
ΔA ×V 反(fan)總÷(V 樣(yang)÷V 樣(yang)總×W)= 340.9×ΔA÷W
液(ye)體(ti)樣(yang)品
H2S(nmol/ml)=
(3) 細胞
0.0044
ΔA ×V 反(fan)總÷V 樣(yang)= 340.9×ΔA
0.0044
H2S(nmol/104 cell)=
ΔA ×V 反(fan)總÷(V 樣(yang)÷V 樣(yang)總×細胞數(shu)量(萬個))=340.9×ΔA÷細胞數(shu)量(萬個)
0.0044
V 反(fan)總:反(fan)應總(zong)體(ti)積(ji),0.9ml;V 樣(yang):反應中樣(yang)品體(ti)積(ji),0.6ml;V 樣(yang)總:加入提(ti)取(qu)液(ye)體(ti)積(ji),1ml;W:樣(yang)品質量,g;Cpr:蛋白(bai)濃度(du),mg/ml
註(zhu)意(yi)事項(xiang):
最di檢出限為 1nmol/ml。
H2S 含(han)量測(ce)定(ding)試劑(ji)盒(he) 信號(hao)系列(lie)