NO（Nitric Oxide，NO）廣(guang)泛分(fen)布(bu)於(yu)生物(wu)體內神經(jing)、循(xun)環(huan)、呼(hu)吸、消化、泌(mi)尿(niao)生(sheng)殖(zhi)等系統中(zhong)，特(te)別是神(shen)經(jing)組(zu)織中(zhong)較(jiao)豐富(fu)。它(ta)作為細胞間及(ji)細胞內的信(xin)息(xi)物質(zhi)，發揮(hui)信(xin)號(hao)傳遞的(de)作用(yong)，是壹(yi)種新(xin)型(xing)的(de)生(sheng)物信(xin)使(shi)分(fen)子，在機(ji)體(ti)的(de)生(sheng)理、病(bing)理過程中(zhong)起著(zhe)重要的作用(yong)。
壹(yi)氧(yang)化氮(dan)含(han)量(liang)測定試(shi)劑(ji)盒 信(xin)號(hao)系(xi)列(lie)

壹(yi)氧(yang)化氮(dan)（Nitric oxide，NO）含量(liang)測定試(shi)劑(ji)盒說明書(shu)

分(fen)光(guang)光(guang)度法(fa) 50 管/48 樣(yang)

壹(yi)氧(yang)化氮(dan)含(han)量(liang)測定試(shi)劑(ji)盒 信(xin)號(hao)系(xi)列(lie)

正式測定前(qian)務必取 2-3 個預(yu)期差異(yi)較大(da)的樣(yang)本(ben)做(zuo)預(yu)測定測定意(yi)義(yi)：

NO（Nitric Oxide，NO）廣泛分(fen)布(bu)於(yu)生物(wu)體內神經(jing)、循(xun)環(huan)、呼(hu)吸、消化、泌(mi)尿(niao)生(sheng)殖(zhi)等系統中(zhong)，特(te)別是神(shen)經(jing)組(zu)織中(zhong)較(jiao)豐富(fu)。它(ta)作為細胞間及(ji)細胞內的信(xin)息(xi)物質(zhi)，發揮(hui)信(xin)號(hao)傳遞的(de)作用(yong)，是壹(yi)種新(xin)型(xing)的(de)生(sheng)物信(xin)使(shi)分(fen)子，在機(ji)體(ti)的(de)生(sheng)理、病(bing)理過程中(zhong)起著(zhe)重要的作用(yong)。

測定原(yuan)理：

NO 在體內或水溶液中(zhong)極易氧(yang)化生(sheng)成NO₂—，在酸性條(tiao)件(jian)下，NO2—與重氮(dan)鹽磺(huang)酸(suan)胺(an)生(sheng)成重氮化合(he)物(wu)，進壹(yi)步與萘基乙(yi)烯(xi)基二胺(an)偶(ou)合(he)，產(chan)物(wu)在 550nm 處(chu)有特(te)征吸收(shou)峰(feng)，測定其(qi)吸光值，可以計(ji)算 NO 含量(liang)。

組成：

試劑二(er)：液(ye)體(ti) 15ml×1 瓶，4℃避(bi)光保(bao)存。（用(yong)之(zhi)前 60℃加熱(re)震(zhen)蕩(dang) 15min）

自備儀(yi)器(qi)和用品：

天(tian)平、研(yan)缽(bo)或勻(yun)漿器(qi)、可(ke)見分(fen)光(guang)光(guang)度計(ji)、1ml 玻(bo)璃(li)比色皿(min)、蒸餾水。

樣(yang)品處(chu)理(li)：

組織：按(an)照組(zu)織質(zhi)量(liang)（g）：提(ti)取液(ye)體積(ji)(ml)為 1：5~10 的(de)比例（建議(yi)稱取約(yue) 0.1g 組織(zhi)，加入(ru) 1ml 提(ti)取液(ye)）進行(xing)冰浴勻(yun)漿。10000g，4℃離(li)心(xin) 15min，取上(shang)清(qing)，置冰上(shang)待(dai)測。

細菌、真(zhen)菌：按(an)照細胞數量(liang)（104 個(ge)）：提(ti)取液(ye)體積(ji)（ml）為 500~1000：1 的(de)比例（建議(yi) 500 萬(wan)細胞加入(ru) 1ml 提(ti)取液(ye)），冰浴超(chao)聲波(bo)破碎細胞（功率(lv) 300w，超(chao)聲 3 秒(miao)，間隔 7 秒(miao)，總(zong)時間 3min）；然(ran)後 10000g， 4℃，離心 15min，取上(shang)清(qing)置於(yu)冰上(shang)待(dai)測。

體液和培(pei)養(yang)液等其(qi)它(ta)液態樣(yang)品：直(zhi)接(jie)測定。

測定步驟和操作表：

NO 含量(liang)計(ji)算

標(biao)準(zhun)曲線回(hui)歸(gui)方程(cheng)為：y= 0.016x -0.0103，R²= 0. 9986 1、組織樣(yang)品：

按(an)樣(yang)本(ben)質(zhi)量(liang)計(ji)算

NO 含量(liang)（μmol/g 鮮(xian)重）=（ΔA +0.0103）÷0.016×V 反總(zong)÷（V 樣(yang)÷V 樣(yang)總(zong)×W）×10^-3

= 0.14×（ΔA +0.0103）÷W

按(an)樣(yang)本(ben)蛋(dan)白(bai)濃(nong)度計(ji)算

NO 含量(liang)（μmol/mg prot）=（ΔA +0.0103）÷0.016×V 反總(zong)÷（V 樣(yang)×Cpr）×10^-3

= 0.14×（ΔA +0.0103）÷Cpr

2、細胞：

NO 含量(liang)（μmol/10⁴ cell）=（ΔA +0.0103）÷0.016×V 反總(zong)÷（V 樣(yang)÷V 樣(yang)總(zong)×細胞數量(liang)）×10^-3

= 0.14×（ΔA +0.0103）÷細胞數量(liang)（萬(wan)個(ge)）

3、其(qi)他(ta)樣(yang)品：

NO 含量(liang)（μmol/L）=（ΔA +0.0103）÷0.016×V 反總(zong)÷V 樣(yang)

= 140×（ΔA +0.0103）

V 反總(zong)：反應總(zong)體(ti)積，0.9ml；V 樣(yang)：反應中(zhong)樣(yang)品體(ti)積，0.4ml；V 樣(yang)總(zong)：加入(ru)提(ti)取液(ye)體積(ji)，1ml；W：樣(yang)品質(zhi)量(liang)，g；Cpr：蛋(dan)白濃(nong)度，mg/ml

壹(yi)氧(yang)化氮(dan)含(han)量(liang)測定試(shi)劑(ji)盒 信(xin)號(hao)系(xi)列(lie)