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聯(lian)系(xi)電(dian)話:10-62817090
| 品牌 | NobleRyder/諾(nuo)博萊(lai)德 | 貨號 | 71011 |
|---|---|---|---|
| 規(gui)格(ge) | 500u/1000u/3000u | 供(gong)貨周期(qi) | 現貨 |
| 主要用(yong)途(tu) | 用於(yu)TA載體(ti)克隆(long) | 應(ying)用領(ling)域 | 環(huan)保,化工(gong),生物(wu)產(chan)業,農(nong)林(lin)牧(mu)漁(yu),制藥(yao)/生物(wu)制(zhi)藥(yao) |
諾(nuo)博萊(lai)德 Taq DNA Polymerase (Buffer含Mg2+)PCR相(xiang)關
Taq DNA Polymerase (Buffer 含 Mg2+)
目(mu)錄(lu)號:71011
產品內容(rong)
產品成份(fen) | 71011-0500 | 71011-03000 |
Taq DNA Polymeras(5U/µl) | 500 U | 3000 U |
10× Taq Buffer+(with Mgcl2) | 1 ml | 6×1ml |
保存(cun)條件(jian)
-20℃保存(cun),有效(xiao)期(qi) 2 年。
經常(chang)使(shi)用,可置於(yu) 4 °C 保存(cun),有效(xiao)期(qi) 3 個月。
具(ju)體(ti)產品的參(can)數(shu)以收(shou)到(dao)產(chan)品說明書(shu)的參(can)數(shu)為準(zhun)
產品簡介(jie)
Taq DNA Polymerase是(shi)從克(ke)隆(long)有Thermu aquaticus DNA Polymerase基因(yin)的大(da)腸桿(gan)菌(jun)經(jing)誘(you)導(dao)表(biao)後(hou)分離(li)純(chun)化的,其(qi)分子(zi)量為94 KD。Taq DNA Polymerase具(ju)有5′-3′DNA聚(ju)合(he)酶(mei)活性(xing)和(he)5′-3′外切核(he)酸(suan)酶(mei)活性(xing),無(wu) 3′-5′外切酶(mei)活性(xing)。在PCR反應(ying)中(zhong),Taq DNA Polymerase延(yan)伸速度為1-2 kb/ 分鐘(zhong),產物(wu)3′端(duan)帶(dai)A,可直(zhi)接(jie)用於(yu)TA載體(ti)克隆(long)(Cat#V114)。
活性(xing)單(dan)位(wei):
1 單(dan)位(wei)(U)Taq DNA Polymerase 活性(xing)定義(yi)為在 74℃、30 分鐘(zhong)內,
以活性(xing)化的大(da)馬哈魚精(jing)子(zi) DNA 作(zuo)為(wei)模(mo)板引物(wu),將(jiang) 10 nmol 脫氧(yang)核(he)苷(gan)酸(suan)摻(chan)入(ru)
到(dao)酸(suan)不(bu)溶(rong)物(wu)質所需(xu)的酶(mei)量。
質量控制:
SDS-PAGE 檢測(ce)純(chun)度大(da)於(yu) 99%,經檢(jian)測(ce)無(wu)外源核(he)酸(suan)酶(mei)活性(xing);PCR 方法(fa) 檢測(ce)無(wu)宿(xiu)主(zhu)殘余 DNA,能(neng)有效(xiao)地(di)擴增(zeng)人基因(yin)組中(zhong)的單(dan)拷貝(bei)基因(yin);室(shi)溫(wen)存(cun)放壹(yi) 周,無(wu)明顯(xian)活性(xing)改(gai)變(bian)。
酶貯存(cun)緩(huan)沖(chong)液:
20mM Tris-HCl (pH8.0),0.1 mM EDTA,1mM DTT,100 mM KCl,Stabilizers,50% glycerol。
10×Taq Buffer (含Mg2+):
200 mM Tris-HCl (pH 8.4),200 mM KCl, 100 mM(NH4)2 SO4,15 mM MgCl2,其他(ta)成(cheng)分。
適用(yong)範(fan)圍:
壹(yi)般用(yong)於(yu)DNA片斷(duan)的PCR擴(kuo)增(zeng)、DNA標記、引物(wu)延(yan)伸、序列測(ce)定、平(ping)末端(duan)加(jia)A等(deng),產物(wu)可以直接(jie)用於(yu)TA載體(ti)克隆(long)。
Taq DNA Polymerase 的使(shi)用說(shuo)明:
壹(yi)、配(pei)制 PCR 反應(ying)體(ti)系(xi):(於(yu)冰上(shang)配(pei)制)
Component | 20 μl Reaction | 50 μl Reaction | 終(zhong)濃度(du) |
Template DNA | as required | as required | 10pg-0.5μg |
Forward Primer (10 M) | 0.4 μl | 1 μ | 0.2 μM |
Reverse Primer (10 μM) | 0.4 μl | 1 μl | 0.2 μM |
10×Buffer+(withmgcl2) | 2 μl | 5 μ | 1 × |
dNTP Mixture(各2.5mM) | 1.6 μ | 4 μl | 0.2 μM |
Taq DNA polymerase(5U/μl) | 0.2-0.4 μl | 0.5-1 μl | |
ddH2O | up to 20 μl | up to 50 μ |
參(can)考模板用量(50 μl 反應(ying)體(ti)系(xi)):
質粒:0.1-10 ng;細菌(jun)基因(yin)組:10-100 ng;人類(lei)基因(yin)組:50-150 ng;cDNA:1-5 μl from RT。
壹(yi)、 設置 PCR 循環條件(jian):(請(qing)根據(ju)實(shi)際(ji)情(qing)況(kuang)適當(dang)調(tiao)整)
Step | Temperature | Tim | Cycle Number |
Initialdenaturation | 94℃ | 3 minutes | |
Denaturation | 94℃ | 30 seconds | 30-35 cycles |
Annealing | 55℃ | 30 seconds | |
Extension | 72℃ | 1-2 kb / minute | |
Final Extension | 72℃ | 5 minutes | |
4-8℃ | Hold |
三、結(jie)果(guo)檢測(ce):反應(ying)結束(shu)後(hou)取 5 µl 反應(ying)產物(wu),瓊(qiong)脂(zhi)糖(tang)凝膠電(dian)泳(yong)檢測(ce)。
北京(jing)諾(nuo)博萊(lai)德科(ke)技(ji)有限公(gong)司(si)始創(chuang)於(yu)2012年,總(zong)部(bu)位(wei)於(yu)北京(jing)海澱區(qu),專(zhuan)註於(yu)科(ke)研(yan)生物(wu)領(ling)域,是(shi)壹(yi)家研(yan)發、銷售和(he)服務於(yu)壹(yi)體(ti)的企業。公(gong)司(si)秉承(cheng)“誠(cheng)信為(wei)本(ben),博采眾(zhong)長(chang)"的發(fa)展(zhan)理(li)念(nian),致(zhi)力於(yu)為科(ke)研(yan)工(gong)作(zuo)者提供高質量的生物(wu)產(chan)品和(he)服務。
諾(nuo)博萊(lai)德的產(chan)品覆(fu)蓋面廣泛,包括以下
生化試劑:抗(kang)生素、蛋(dan)白(bai)質、染(ran)色(se)劑(ji)、細胞培(pei)養(yang)基、緩(huan)沖(chong)試(shi)劑(ji)、對(dui)照(zhao)品、標準(zhun)品、磁珠(zhu)、維生素、酶和(he)輔酶、分離(li)試劑、表(biao)面活性(xing)試劑(ji)、碳水(shui)化(hua)合(he)物(wu);
即用型(xing)試(shi)劑(ji):常(chang)規(gui)試劑(ji)溶(rong)液、即用型(xing)染(ran)色(se)液、免(mian)疫學(xue)試劑、細胞生物(wu)學(xue)、分子(zi)生物(wu)學(xue)、檢測(ce)試劑(ji)盒(he)、細胞分離(li)液人(ren)或(huo)其他(ta)動(dong)物(wu)細胞、熒(ying)光(guang)定量、蛋(dan)白(bai)酶(mei)系(xi)列;
通用耗(hao)材:超濾(lv)離心管、吸(xi)頭/盒(he)、離(li)心管/盒(he)、封(feng)板(ban)膜、PCR耗(hao)材、濾(lv)紙、口(kou)罩手(shou)套、冷凍存管(guan)/盒(he)、培(pei)養(yang)板/皿(min)/瓶、酶(mei)標條/板(ban)、巴氏吸(xi)管(guan)、載玻(bo)片、蓋玻(bo)片、包埋/盒(he)/模(mo)具(ju)、封片劑、刀片、石(shi)蠟(la)、印跡膜、藍(lan)蓋瓶、研(yan)磨器材、透析(xi)袋/夾(jia)子、血凝板、記號筆、註(zhu)射(she)器、加(jia)樣槽(cao)、取樣杯(bei)、細胞篩(shai)網、細胞刮刀/鏟、單(dan)道(dao)多道(dao)手動(dong)自動(dong)移液器/支(zhi)架、防卷板等(deng)產品被國內科(ke)研(yan)工(gong)作(zuo)者廣泛應(ying)用。
Taq DNA Polymerase (Buffer含Mg2+)PCR相(xiang)關