2× LongHiFi PCR Mix為多(duo)種采用(yong)最(zui)xian進(jin)基因(yin)工程(cheng)改(gai)造而(er)來(lai)的(de)超保(bao)真(zhen)酶添(tian)加延(yan)伸因(yin)子混合而成，極大(da)的(de)提高(gao)了(le)擴增長(chang)度(du)、擴增速度(du)、保真(zhen)性和(he)產量(liang)。2× LongHiFi PCR Mix是(shi)長(chang)片(pian)段、超(chao)保(bao)真(zhen)、快速(su)擴增的(de)首(shou)xuan產品(pin)。
PCR產物為平(ping)末端(duan)，不需要(yao)加(jia)A頭，可直(zhi)接(jie)用(yong)金(jin)百特TOPO- Blunt平(ping)末端(duan)系列(lie)載體克隆(long)。
2×LongHiFi PCR Master Mix（含(han)染料）

諾博(bo)萊(lai)德(de) 2×LongHiFi PCR Master Mix（含染(ran)料(liao)）

2× LongHiFi PCR Master Mix (含(han)染料(liao))

目(mu)錄號(hao):71814

產(chan)品內容

保(bao)存條(tiao)件

-20℃保(bao)存，有(you)效期 2 年(nian)。

經(jing)常使(shi)用(yong)，可(ke)置(zhi)於(yu) 4 °C 保存，有(you)效期 3 個月(yue)。

具(ju)體產(chan)品的(de)參數以(yi)收到(dao)產(chan)品說明書的(de)參數為(wei)準

產(chan)品簡(jian)介

2× LongHiFi PCR Mix為(wei)多(duo)種采用(yong)最(zui)xian進(jin)基因(yin)工程(cheng)改(gai)造而(er)來(lai)的(de)超保(bao)真(zhen)酶添(tian)加延(yan)伸因(yin)子混合而成，極大(da)的(de)提高(gao)了(le)擴增長(chang)度(du)、擴增速度(du)、保真(zhen)性和(he)產量(liang)。2× LongHiFi PCR Mix是(shi)長(chang)片(pian)段、超(chao)保(bao)真(zhen)、快速(su)擴增的(de)首(shou)xuan產品(pin)。

PCR產(chan)物為平(ping)末端(duan)，不需要(yao)加(jia)A頭，可直(zhi)接(jie)用(yong)平(ping)末(mo)端(duan)系列(lie)載體（Cat#V116、V117）克隆(long)。

本(ben)產品(pin)包含LongHiFi DNA Polymerase、dNTPs和(he)優(you)化(hua)的(de)反應緩沖液，濃度(du)為2×。使(shi)用(yong)時，只(zhi)需(xu)加(jia)入模(mo)板(ban)、引物，並補足水至Mix終(zhong)濃度(du)為1×即可(ke)。

本(ben)制(zhi)品(pin)含紅色(se)示蹤(zong)染(ran)料(liao)，不需(xu)添(tian)加上(shang)樣緩沖液即可(ke)直接(jie)上(shang)樣進(jin)行(xing)電泳(yong)；也可經(jing)過純(chun)化(hua)處(chu)理(li)，以用(yong)於(yu)酶切(qie)、連接(jie)、熒(ying)光(guang)測序(xu)等(deng)後續操(cao)作(zuo)。

產(chan)品特(te)點

1. 高(gao)產：壹(yi)般 PCR 產物量比傳(chuan)統產量(liang)高 50%-100%！

2. 高(gao)效：延(yan)伸速(su)度(du)可以(yi)達(da)到(dao) 3-4kb/min，是(shi) pfu 的(de) 6-8 倍！

3. 高(gao)成功率(lv)：對(dui)於(yu)高 GC 模(mo)板(ban)和(he)特殊(shu)結構(gou)的(de)復雜模(mo)板(ban)有良(liang)好(hao)效果(guo)！

4. 超(chao)高保(bao)真(zhen)：保真(zhen)度(du)是(shi) taq 的(de) 81 倍以上(shang)。

5. 擴增長(chang)度(du)長(chang)：以復雜基因(yin)組 DNA 為模(mo)板(ban)擴增可達 10kb，以(yi)簡單基因(yin)組、質(zhi)粒和(he)噬菌體 DNA 為(wei)模(mo)板(ban)擴增可達 15kb。

2 × LongHiFi PCR Master Mix 使(shi)用(yong)說明：

壹(yi)、配(pei)制(zhi) PCR 反(fan)應體系(xi)：(於(yu)冰(bing)上配(pei)制(zhi))

參考模(mo)板(ban)用(yong)量(liang)：（以(yi) 50 μl 反應體系(xi)為例(li)）

質(zhi)粒：0.1-10 ng；

細菌基因(yin)組：10-100 ng；

人(ren)類基因(yin)組：50-150 ng；

cDNA：1-5 μl from RT。

註(zhu)意(yi)：實際(ji)操(cao)作(zuo)中，首(shou)先要(yao)計算(suan)好(hao)需(xu)要(yao)補(bu)加 ddH2O 的(de)量以(yi)後，建議(yi)先(xian)加(jia)水(shui)，然(ran)後按上(shang)述(shu)順序(xu)添(tian)加其它(ta)成分，最(zui)後加 LongHiFi PCR Mix，瞬(shun)離(li)，上(shang)機(ji)。

二(er)、設置(zhi) PCR 循(xun)環(huan)條(tiao)件：（請(qing)根據(ju)實際(ji)情(qing)況適(shi)當(dang)調(tiao)整）

註(zhu)意(yi)：壹(yi)般情(qing)況下，Annealing Temperature = Tm - 5°C

1. 質(zhi)粒和(he)簡單基因(yin)組等(deng)簡單模(mo)板(ban)，可以(yi)采用(yong) 10-15 sec/kb；復雜模(mo)板(ban) ( 如人(ren)類基因(yin)組 DNA )，可以采用(yong) 20-25 sec/kb。

2. 對(dui)於(yu)高 GC 含量(liang)的(de)模(mo)板(ban)，預變(bian)性(xing)和(he)變性(xing)溫度(du)可以(yi)提(ti)高(gao)到(dao) 98℃。

3. 如(ru)果(guo)電(dian)泳(yong)發(fa)現(xian)主帶(dai)上下拖尾(wei)模(mo)糊(hu)現(xian)象，或者(zhe)泳(yong)道(dao)出(chu)現(xian)從(cong)上(shang)樣孔拖下來(lai)的(de)塗抹帶現(xian)象，壹般提示延(yan)伸時間過(guo)長(chang)，梯度(du)縮(suo)短延(yan)伸時間（建(jian)議(yi) 10-15sec/kb 為(wei)梯度(du)減(jian)少(shao)延(yan)伸時間）直(zhi)到(dao)獲(huo)得滿(man)意(yi)結果(guo)。

三(san)、結果(guo)檢(jian)測(ce)：反(fan)應結束(shu)後取 5 µl 反(fan)應產物，瓊(qiong)脂(zhi)糖(tang)凝(ning)膠(jiao)電(dian)泳(yong)檢(jian)測(ce)。

2×LongHiFi PCR Master Mix（含(han)染料(liao)）